雅安市名山县人民医院 625100
摘要：目的 分析宫颈癌HPV16/18感染及P53、PCNA的相关性，讨论宫颈癌HPV16/18感染及P53、PCNA与宫颈癌的关系。方法 选取本院2012年5月-2013年4月收治的60例患有宫颈癌的患者，通过免疫组织化学方法，检测P53、PCNA蛋白表达情况，对临床资料进行统计学分析。结果 宫颈癌HPV16/18阳性组中，P53与PCNA表达增强，呈正相关，阳性组与阴性组有明显差异（P<0.05）；临床Ⅱ期的P53和PCNA指标要明显高于临床Ⅰ期，有明显差异（P<0.05）。结论 HVP16/18是宫颈癌并发的主要原因，并促使P53、PCNA蛋白阳性率增高，在宫颈癌并发中具有重要作用。
关键词：宫颈癌；感染；pcNA
宫颈癌是一种非常常见的女性肿瘤疾病，其发病率和死亡率都比较高。近年来，这种疾病的发病率呈逐年上升趋势，所以当前研究的重点是分析其发病机制，研究出合理有效的治疗方法。90%以上的宫颈癌患者伴有HPV感染，HPV16/18都属于高危型感染，与宫颈鳞癌直接相关。本次研究主要是针对HPV16/18及P53、PCNA表达相关性意义，现汇报如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选取本院2012年5月-2013年4月收治的60例患有宫颈癌的患者，按照HPV16/18检查的阴阳性进行分组，阳性组有34例患者，年龄在28-57岁，平均年龄为（43.1±5.1）岁。阴性组有26例，年龄在29-64岁，平均年龄为（48.7±4.2）岁。宫颈癌的病例病理分级参考WHO女性生殖肿瘤分类，Ⅰ级20例，Ⅱ级19例，Ⅲ级21例。FIGO临床分析，I期33例，Ⅱ期27例。所有宫颈癌的患者的年龄、疾病无统计学意义（P<0.05），具有可比性。
1.2方法
采用免疫组化SP法检测P53、PCNA的表达情况[1]。
1.用石蜡包埋组织，并进行切片，在62℃下烤片2-5小时，脱蜡至水；
2.用3%的双氧水孵育15分钟，用蒸馏水冲洗，通过PBS清洗3次。在微波炉中进行加热10分钟，修复抗原，然后取出冷却。
3.在每张切片上滴入50μl的第一抗体，即P53、PCNA。
4.PBS冲洗3次，每次5分钟左右。滴入加辣根过氧化酶标记的二抗，在37℃下孵育12-20分钟，再进行PBS冲洗，每次5分钟左右。
5.DAB显色，在室温下放置20分钟，然后用自来水冲洗30分钟。
6.苏木素复染，常规脱水透明后中性树胶封片。用已知表达阳性的宫颈鳞癌切片作为阳性对照，用PBS作为阴性对照。
1.3判断标准
每张切片上都需要在400倍的显微镜下观察，随机选取10个瘤细胞区，相关人员要在每个癌细胞区选取100个肿瘤细胞，然后对这些肿瘤细胞进行观察，记录阳性细胞的数量，并计算出阳性细胞所在比例。如果小于25%，则为阳性，如果比例大于等于25%，则为阴性。P53、PCNA阳性染色细胞核出现棕黄色颗粒为阳性判断标准。
1.4统计学分析
采用SPSS18.0软件检验，各组间用X2检验，P<0.05说明有统计学意义。
2结果
60例宫颈癌患者，HPV16/18阳性组的P53、PCNA阳性比例明显高于阴性组，具有明显差异（P<0.05），具体内容如下：
3讨论
宫颈癌患者的HPV感染细胞最终会导致出现宫颈癌，子宫颈癌HPV感染的阳性率在55%-85%左右，其中HPV16型在总数的45%-78%左右，HPV18型占总数的12%-32%左右。
很多恶性肿瘤，例如胃癌和肺癌等，通过免疫组织化学方法进行检验P53的阳性率较高，能够达到45%-52%。在相关研究结果中[2]，人体的细胞内的P53蛋白的主要机制有：P53基因突变，突变型P53蛋白拥有较长的半衰期，长时间会造成基因积累。由此基因毒性的堆积会诱导致癌因素，从而损伤正常细胞中的DNA，造成P53基因活性上涨。P53蛋白高表达会导致野生型P53蛋白堆积，这种情况下导致胃癌、肺癌的出现。宫颈癌P53基因突变率比较低，所以相关学者认为宫颈癌积累的稳定性得到增强，但是功能失去活性野生结构有所改变，这种情况下，稳定性得到提高。但是PCNA的调控功能来讲，这P53蛋白的这种环境使PCNA失去部分功能，导致PCNA过度表达，P53蛋白和PCNA都升高，成正相关趋势。
在本次研究中，高危型HPV16/18是导致宫颈癌发病的主要因素，在宫颈癌的产生和发展阶段，具有重要作用。HPV16/18的阳性组中P53蛋白和PCNA明显高于和阴性组的P53蛋白和PCNA。P53和PCNA蛋白表达的情况与宫颈鳞癌细胞的增值状态有关，并呈现正相关状态，在临床Ⅰ期和临床Ⅱ期中，临床Ⅱ期的P53和PCNA指标要明显高于临床Ⅰ期，所以可以判断宫颈癌的恶性程度与预后的分子生物学研究标准，具有非常重要的联系。
参考文献：
[1]钟萍萍，顾依群，王爱春，汪颖南，卢利娟，王荔.宫颈上皮内瘤变中不同高危型HPV感染与p53表达的相关性研究[J].中国现代医学杂志，2013，23（12）：64-66.
[2]刘安丽，贺生.高危型HPV原位杂交检测和P53、Ki-67在宫颈鳞癌及子宫颈上皮内瘤变组织中的表达及意义[J].中国妇幼保健，2012，23（29）：4611-4613.
论文作者:张达理
论文发表刊物:《健康世界》2014年24期供稿
论文发表时间:2016/4/11
标签：宫颈癌论文; 阳性论文; 蛋白论文; 阴性论文; 宫颈论文; 患者论文; 细胞论文; 《健康世界》2014年24期供稿论文;