李 瑾 余悠悠 潘秀军
(上海交通大学医学院附属新华医院 检验科 200433)
摘要：目的：探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase, GPI)抗原检测在类风湿关节炎( rheumatiod arthritis, RA)患者诊断中的意义。 方法：
用酶联免疫吸附试验(LIESA) 检测74 例（其中类风湿关节炎病人37 例，其他风湿病人17 例,正常对照20 例）患者血清中的GPI 抗原的含量。同时还检测了其血
清中类风湿因子( rheumatiod factor, RF)、抗环瓜氨酸肽( CCP)抗体的含量。通过ROC 曲线的绘制比较GPI 抗原、抗CCP 抗体、RF 的检测对于RA 诊断的敏感性
和特异性，并取理想临界值，同时分析3 者的相关性。 结果：GPI 抗原在RA 组中的阳性率为91.9%，并且56%的病人含量高于2mg/L，GPI 的含量在RA 组和
其他风湿病组的差异有统计学意义（P<0.01）；同时GPI、CCP、RF 在RA 组的检测结果明显高于其他风湿病组和正常对照组，但3 者无相关性。 结论：GPI
在RA 组中有明显的升高并有很高的特异性，可作为RA 诊断的新指标。如果结合抗CCP 联合检测，将提高RA 的早期诊断率。
关键词：ROC 曲线 葡萄糖-6-磷酸异构酶 抗环瓜氨酸肽 类风湿因子 类风湿关节炎
类风湿关节炎是某种感染引起的自身免疫反应，多入侵关节，
后期发生软骨及骨的破坏，并可出现畸形及功能障碍。因早期临床
症状复杂多样且不典型，常给临床早期诊断带来困难而延误治疗，
从而给患者造成不良后果。目前，在RA诊断标准中，RF作为血清学
标准其敏感性高但特异性差。近年来，人们逐渐认识到CCP、GPI在
RA诊断中的重要性，特别是GPI作为一种自身免疫性抗原，与RA有
高度的相关性。本次研究检测患者血清中的GPI浓度，并通过与RF、
CCP比较，探讨3个指标在类风湿关节炎诊断中的价值。
一、资料与方法
二、研究对象：
选择2010年-2014年上海新华医院住院患者74例，包括RA患者37
例,其中男性7例，女性30例，年龄38-83岁。其诊断均符合1987年美
国风湿病协会修订的诊断分类标准；其他风湿病对照组17例，包括红
斑狼疮，干燥综合征，皮肌炎等。其中男性4例，女性13例，年龄31-89
岁。正常对照组20例，均来自体检人群，其中男性6例，女性14例，
年龄29-76岁。
三、标本采集：
所有研究对象均空腹静脉采血5ml，3000r/min离心10min，取血
清于-20℃冰箱保存，一次溶解后测定。
四、方法：
（1）GPI抗原测定：采用上海北加生化试剂有限公司生产的双
抗体夹心酶联免疫检测(LIESA)试剂盒，严格按照说明书进行操作。
结果>0.2mg/L为阳性。
（2）抗CCP抗体测定：采用上海富莼科芯生物技术有限公司生
产的LIESA试剂盒，结果>25RU/ml为阳性。
（3）RF检测：在IMMAGE800上检测，试剂为美国Beckman公司
配套的药盒。结果>20IU/ml为阳性。
五、统计学方法：
采用SPSS13.0软件进行分析GPI抗原、抗CCP抗体、RF对RA诊断
的灵敏度及特异度，同时取GPI的理想临界值。三者相关性使用
Spearman相关性分析，GPI的含量在RA组和其他风湿病组的差异有无
统计学意义使用卡方检测。
六、结果
七、GPI 浓度
GPI 在RA 患者血清浓度为2.66±2.3mg/L，其他风湿病组为0.39
±0.34mg/L，正常对照组为0.12±0.13mg/L。GPI 在RA 组的检测结
果明显高于其他风湿病组和正常对照组，GPI 的含量在RA 组和其他
风湿病组的差异有统计学意义（P<0.01）见下表
2.2 GPI、CCP、RF 的相关性分析
RA 组中同时检测了GPI、CCP、RF 的浓度，GPI 的平均值为2.66
±2.3mg/L，CCP 的平均值为173.44±133.83RU/ml，RF 的平均值为
166.99±134.16IU/ml。经Spearman 相关性分析，GPI 与CCP 无相关
性（r=0.114,p=0.845），与RF 也无相关（r=0.289,p=0.633）。
2.3 GPI 诊断RA 的理想临界值的取值
假设将GPI 作为诊断RA 的指标，以不同浓度GPI 值计算诊断的
灵敏度和特异度。以灵敏度为纵坐标，以1﹣特异度为横坐标，建立
ROC 曲线（见下图）。选择最佳临界值为0.49 mg/L， 此时的灵敏度
为75%，特异度为91.9%。曲线下面积为0.883，面积>0.5，P 值<0.001。
讨论
类风湿关节炎是一种常见以关节滑膜炎症为特征的慢性全身性
自身性疾病。患者体内存在多种自身抗原和相应的自身抗体，若未
经及时治疗，可出现严重的关节畸形，甚至致残，因此早期诊断和
治疗尤其重要。目前，类风湿因子（RF）是RA 最经典的诊断指标，
是针对免疫球蛋白IgG 稳定区的抗体，但RF 可出现在正常人群及其
他自身免疫疾病中，故特异性不高。抗环瓜氨酸肽（CCP）是针对瓜
氨酸是RA 血清抗filaggrin 相关抗体识别的主要抗原决定簇的特异性
抗体，所以CCP 的特异性更高。CCP 在类风湿关节炎的诊断价值已
得到公认[1]GPI 是一种多功能蛋白质，分子量60 KD，也称磷酸葡萄糖异构
酶或磷酸己糖异构酶，存在于细胞质和细胞外液尤其是关节腔内。
1996 年Kouskoff 等发现KRN 转基因小鼠与NOD 小鼠进行杂交产生
的F1 代小鼠中，所有转基因T 细胞受体阳性的小鼠都发生了类似人
RA 的多发性关节炎[2]， Matsumoto 等在进一步的研究中发现其致病
性蛋白为GPI，并且在人类RA 患者血清和关节液中也检测到了
GPI[3]。提示GPI 在RA 诊断中的重要性。也有文献报道[4]血清和关
节液中明显增高的GPI 抗原本身可能与类风湿关节炎相关。
本次研究发现，RA 患者组中的GPI 含量显著高于其他风湿病组
和正常对照组（p<0.01），并通过绘制ROC 曲线取得GPI 理想临界
值为0.49 mg/L，虽然此时的灵敏度为75%,低于CCP 的78.9%和RF
的80.6%，但其特异度为91.9%，高于RF 的77.3%接近CCP 的92.3%。
所以有理由认为GPI 抗原有可能成为RF、CCP 以外的又一种RA 标
记物[5]。同时进一步分析得出GPI 与CCP、RF 均无相关性，故GPI
又是一独立的指标。
为了弥补单一应用GPI、CCP、RF 诊断RA 的不足，本实验将特
异性较好的抗CCP 抗体和GPI 抗原作为联合检测组合，测得其灵敏
度为66.7%，特异度高达97.3%。说明抗CCP 抗体和GPI 抗原的联合
检测能大大提高RA 的诊断效率，是RA 早期诊断的理想指标。
综上所诉，GPI 作为一种自身免疫性抗原，由于有较高的特异性，
所以对RA 的诊断有重要价值，有可能成为一种新的标记物，而且
ELISA 方法简单，结果可靠，适用于临床推广。
参考文献
[1]徐朝焰，赵素萍，吴美辉等，抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿关
节炎的诊断意义［J］ 中华风湿病杂志,2005,9:700-701
[2] Matsumoto I, Staub A, Benoist C et al. Arthritis provoked by linked
Tand B cell recognition of a glycolytic enzyme[J]. Science，1999，286:
1730-1735.
[3] Matsumoto I,Maccioni M,Lee DM,et al.How antibodies to a
ubiquitous cytoplasmic enzyme may provoke joint-specific autoimmune
disease[J].Nat Immunol,2002,3(4):360-365.
[4] 鲍春德,叶萍,陈晓翔,等. 血清中6 磷酸葡萄糖异构酶抗原
升高在类风湿关节炎中的意义探讨［ J］ 中华风湿病学杂志,
2005,9(5):277——279.
[5] 林珺芳， 陈君敏， 郑玲， 薛原， 芮红兵[J] 福建医科大学
报 20102010 年8 月44 卷4 期
论文作者:李 瑾 余悠悠 潘秀军
论文发表刊物:《卫生部公告》2015年6期供稿
论文发表时间:2015/11/5
标签：抗原论文; 抗体论文; 风湿病论文; 类风湿论文; 关节炎论文; 血清论文; 特异性论文; 《卫生部公告》2015年6期供稿论文;