【摘要】目的：探讨高效液相色谱法（HPLC）测定六味地黄丸中的丹皮酚含量。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）测定六味地黄丸中丹皮酚，使丹皮酚同其它成分分离，快速的测定中成药中的丹皮酚中的含量。结果：高效液相色谱法检测六味地黄丸中,丹皮酚含量和RSD为批号A丹皮酚含量2.85mg/g,RSD1.64%;批号B丹皮酚含量3.15mg/g,RSD1.75%;批号C丹皮酚含量2.96mg/g,RSD2.43%。结论：高效液相色谱法（HPLC）测定六味地黄丸中丹皮酚的含量，方法快捷，精密度高，可用于药品质量的控制。
【关键词】高效液相色谱；六味地黄丸；丹皮酚；含量
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）32-0297-01
六味地黄丸是中国药典收载的品种，处方为熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻，具有滋阴补肾等功能。用于肾阴亏损，头晕耳鸣，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精，消渴[1]。
六味地黄丸中丹皮酚含量是中国药典规定的质量检测指标，检测三种常见六味地黄丸中丹皮酚的含量。
1.材料与仪器
1.1 仪器与试剂
高效液相色谱仪、分析天平(精度0.0001g、0.00001g)、微量注射器、超声波提取器、具塞锥形瓶、量瓶、移液管等。试剂为甲醇，丹皮酚对照品，六味地黄丸市售品3种同一厂家的不同批号药品。
1.2 方法与步骤
1.2.1对照品溶液制备 用分析天平(精度0.00001g)精密称定丹皮酚对照品10mg，称量范围为0.00950～0.01050g，置50ml量瓶中，加入甲醇到刻度，摇匀，用移液管精密量取10mL置100mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含20μg的溶液，即得。
1.2.2仪器测定条件要求，色谱柱 日立胶3010，50cm×φ2.1mm；流动相甲醇；流速1.5ml/min；压力：85kg/cm2；纸速：2.5mm/min；检测波长：274nm；灵敏度：0.08AUFS；理论塔板数：2.1万；温度：室温测定。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
1.2.3标准曲线的绘制 取丹皮酚对照品适量，制成与1ml中约含0.1mg的甲醇液，分别以2，4、6，8，10μl进样，记录对应峰的峰高。以进样量为横坐标，峰高为纵坐标绘图，并求得回归方程。
1.2.4样品溶液制备 取等检验样本的水蜜丸或小蜜丸，切碎，精密称取0.3g，称量范围为0.2700～0.3300g，或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，精密称取0.4g，称量范围为0.3600～0.4400g，置具塞锥形瓶中，移液管精密加入50％甲醇50mL，密塞，称定质量，置超声波提取器中超声处理（功率250w，频率33kHz）45min，放至室温，再称定质量，用50％甲醇补足减失的质量，进行摇匀，用滤纸进行滤过，取续滤液即得[2]。
2.结果
对3个批次溶液10μl进行高效液相色谱仪测定，将丹皮酚对照品溶液准确吸取测定，重复操作n=5，以丹皮酚的峰面积计，相对标准偏差（RSD）为0.78%。丹皮酚含量和RSD为批号A丹皮酚含量2.85mg/g，RSD1.64%；批号B丹皮酚含量3.15mg/g，RSD1.75%；批号C丹皮酚含量2.96mg/g，RSD2.43%。
3.讨论
六味地黄丸是临床中药中滋阴补肾较具有代表性的方剂，临床应用广泛，治疗各科多种病症。六味地黄丸为历版《中国药典》收载，六味地黄丸最常见的是水蜜丸、口服液[3]。体外溶出度试验表明，本品中丹皮酚溶出较快，而熊果酸不溶出。本品以全药材原粉末入药，可避免有效成分损失；牡丹皮以生品入药丹皮酚含量高于炮制品；蜜水为粘合剂，又能协助主药滋阴润肠。测定丹皮酯含量的方法很多，如库伦滴定法、紫外分光光度法，但这些方法都需要比较复杂的前处理过程[4]。利用高效液相色谱仪的高分离性能，可使丹皮酚与其它成分分离，快速地测定多种中成药中的丹皮酚含量。
高效液相色谱法(HPLC)又称“高压液相色谱”“高速液相色谱”“高分离度液相色谱”等。高效液相色谱（HPLC）是色谱的重要分支，使用液体作为流动相，使用高压输注系统将具有不同极性的单一溶剂或不同溶剂和缓冲液的混合物的流动相泵送至固定相，在色谱柱中的组分分离后，色谱柱进入检测器进行检测，从而实现样品的分析[5]。高效液相色谱法(HPLC)分离效能高、专属性强和检测灵敏高，不仅可以分离，而且可以准确地测定各组分的峰面积，在特殊杂质检查中应用广泛。测定时甲醇必须为色谱纯，水则必须为去离子水，使用期限不得超过2d，超过需要重新进行配制。对照品用称量天平精度必须在万分之一以下，以确保称量精度。流动相瓶口不能用密封带封死，以保证内外压力相等，流动相接口要固定，不应随意更换，棕色瓶固定为水，白色瓶固定为甲醇或腈；流动相的流速不要超过3.0 mL/min。采用外标法定量时，必须精确控制进样量。
应用高效液相色谱法测定丹皮酚的含量，操作快速，简便，精密度高，准确可行，可以做为六味地黄丸的质量控制。
【参考文献】
[1]王灵霞，朱东亮，柴逸峰.高效液相色谱法同时测定3种不同剂型六味地黄丸中4种成分的含量[J].药学实践杂志，2013，31(4):296-299.
[2]宋晓，孙晓慧，李珂.HPLC测定不同厂家六味地黄丸中丹皮酚的含量[J].泰山医学院学报，2014，35(3):200-202.
[3]罗国辉.高效液相色谱法测定六味地黄丸(浓缩丸)中丹皮酚的含量[J].临床和实验医学杂志，2012，11(21):1694-1696.
[4]李向阳，屠万倩.RP-HPLC法测定六味地黄丸中丹皮酚、芍药苷和乌苏酸[J].中成药，2012，34(2):277-282.
[5]童湘晖，邬国庆，张小茜.高效液相色谱法测定六味地黄丸中丹皮酚的含量[J].首都食品与医药，2003，10(16):50-52.
论文作者:宋岳,解词
论文发表刊物:《心理医生》2018年32期
论文发表时间:2018/12/6
标签：丹皮论文; 高效论文; 含量论文; 色谱论文; 液相论文; 地黄丸论文; 甲醇论文; 《心理医生》2018年32期 论文;