（扬中市人民医院检验科 江苏 扬中 212200）
【摘要】 目的：分析UF-1000尿液有形成分分析仪检测尿有形成分的影响因素，寻找导致其结果误判的原因及解决对策。方法：分别采用UF-1000尿液有形成分分析仪和尿沉渣镜检对600例临床尿液标本进行检测，对尿中RBC、WBC、CAST、上皮细胞等检测结果进行比较，分析引起UF-1000尿沉渣分析仪结果误判的原因，建立复核标准。结果：UF-1000尿液分析仪检测结果的假阳性率为：红细胞25.8%，白细胞17.0%，上皮细胞12.1%，小圆上皮20.3%，管型38.5%，病理管型34.6%，结晶4.2%。一定量的结晶、细菌和酵母样菌易被仪器误报告为红细胞，小圆上皮细胞、大量细菌和非晶形结晶是引起白细胞误判的主要原因，黏液丝是引起管型误判的最主要原因。结论：多种因素可以影响尿沉渣分析仪对尿液有形成分的检测结果，因此应用UF-1000尿沉渣分析仪检测尿液有形成分只能作为一种初步筛查方法，当尿液病理成分检测结果提示增多，同时上述干扰成分亦呈阳性或增多时，尿沉渣镜检十分重要。
【关键词】 UF-1000；尿沉渣分析仪；尿沉渣镜检；结果误判
【中图分类号】R693 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）01-0107-03
尿沉渣检查是检测尿液有形成分的主要手段，对诊断肾脏疾病的病情进展和预后判断具有极其重要的意义，也是对泌尿系统疾病做出诊断和鉴别的主要方法之一。尿液有形成分检查经典的方法是在显微镜下进行人工判别。人工镜检最大的问题是速度慢，当前临床检查的尿液标本不断增加，每份尿都进行人工镜检难以做到。全自动的尿沉渣分析仪去除了繁琐的离心方法，具有操作规范化、检测自动化、速度快、重复性好、一次可检测多个参数等优点。我院引进了UF-1000全自动尿沉渣分析仪，采用红色半导体激光的流式细胞分析方法，对尿中有形成分进行定量分析，提供定量参数。但由于尿液成分的多样性、复杂性以及仪器本身检测的局限性，常导致某些检测项目存在一定程度的结果误判，即假阳性、假阴性。如果不予以及时发现和纠正将会误导临床对疾病的诊断和治疗[1]。因此，我们将尿沉渣分析仪与显微镜镜检法的检测结果进行对比观察，统计仪器的误判率，分析仪器检测结果的影响因素，提出结果误判的解决对策，确定复检标准，对保证检验结果的准确性具有重要价值。
1.材料和方法
1.1 标本来源
标本来自扬中市人民医院住院患者，用一次性尿液离心管采集晨尿共900例。
1.2仪器与试剂
1.2.1仪器、器材 Sysmex UF-1000i全自动尿液有形成分分析仪，OLYMPUS显微镜，离心机，尿沉渣离心管，玻片、盖玻片等。
1.2.2试剂 UF-1000i配套试剂，鞘液UFII SHEATH，染色液UFII SEARCH-SED，稀释液UFII PACK-SED，染色液UFII SEARCH-BAC，稀释液UFII PACK-BAC；高、低值质控品。
1.3 方法
1.3.1 UF-1000检测 按UF-1000尿液分析仪的仪器说明严格正规操作，每日检测标本前均进行质控物校准。指控结果合格后，将尿液标本在UF-1000检测系统进行检测，记录各成分的测定值。
1.3.2显微镜检测 取尿液标本约10mL，以相对离心力400g离心5min，然后手持离心管45～90°吸弃上清液，保留0.2mL沉渣量，轻轻摇匀，用一次性滴管取1滴（20μL）置于清洁载玻片上，加盖玻片，于高倍镜下连续计数至少10个视野中红、白细胞、上皮细胞数，于低倍镜下连续计数至少20个视野中管型数，分别取其平均值，所有操作在2h内完成[2]。
1.3.3计算、分析 根据两种方法的测定结果，统计UF-1000检测各有形成分的假阳性率、假阴性率。对尿沉渣分析仪法与显微镜法测定结果不符的标本，再用显微镜复查尿沉渣，分析影响UF1000检测尿液有形成分的影响因素，建立复检标准。
1.3.4统计复检率 另随机抽取300份住院患者的尿液标本，用UF-1000尿液分析仪进行分析，根据以上所建立的复检标准，统计仪器检测尿液有形成分的复检率。
2.结果
2.1 参考值范围
（1）UF-1000由Sysmex提供：RBC男0～17/μl，女0～27/μl；WBC男0～16/μl，女0～36/μl，管型 0～3/μl，病理管型0～0.5/μl，小圆上皮0～3/μl，结晶0～10/μl，高于此范围均视为阳性。（2）尿沉渣镜检结果参照《全国临床检验操作规程》[2]：RBC 0～3个/HP，WBC 0～5个/HP，管型 0～偶见/LP。阳性结果以显微镜法为标准，即UF-1000判为阳性，而镜检为阴性的则认为是假阳性，UF-1000判为阴性，而镜检为阳性的则认为是假阴性。
2.2 UF-1000与显微镜法检测结果的对比分析
UF-1000尿液分析仪检测各有形成分的假阳性率、假阴性率见表1。由表1可见，UF-1000的各检测结果的假阳性率较高，其中管型和病理管型的假阳性率最高，其次是红细胞、小圆上皮。该仪器检测各有形成分的假阴性率很低，但结晶的假阴性高于其他成分。
2.4 结果误判的解决对策、复核标准的建立
对仪器检测尿液有形成分的影响因素进行分析后，我们提出结果误判的解决对策,建立以下复检标准：（1）当仪器与干化学检测结果不一致和出现异常散点图或有报警提示时，必须进行尿沉渣镜检；（2）仪器报告精子、不均一红细胞时，应显微镜检测确认；（3)管型超过仪器参考范围上限且在报告有黏液丝、上皮细胞的情况下一定要镜检确认；（4）当仪器报告小圆上皮、类酵母样细胞阳性全部需镜检确认并鉴别；（5）对于高浓度标本，由于大量结晶、杂质的干扰导致计数不准确，应镜检后以显微镜结果报告。
2.5 复检率
按照以上标准，UF-1000尿液分析仪的复检率为38.7%（116/300）。
3.讨论
UF-1000尿沉渣分析仪是使用流式细胞计数法(FCM)技术来获得尿细胞前向散射光及前向荧光的强度参数，UF-1000i在对细胞中的特定物质进行荧光染色并调节到悬浮状后，使用鞘液包围此物质然后通过喷嘴以单柱形式喷出，此时每个尿细胞都将暴露[3]。UF-1000尿液分析仪检测时尿液无需离心，可以实现尿液分析的全自动化和标准化，具有高效、简便快速、结果较为准确的性能。然而，UF-1000尿液分析仪仍存在一些不足，对杂质含量较少的标本其分析结果均比较准确，但对含杂质多，如结晶、非结晶型盐类多的标本，其出现假阳性的比例比较高[4]。UF-1000测定尿液有形成分时有诸多的影响因素，现分析如下：
3.1 红细胞的检测
UF-1000检测红细胞的过程中所产生的假阴性、假阳性，主要是由草酸钙结晶、酵母菌、细菌等[5]。UF-1000利用对细胞膜和核酸亲和力不一样的2种荧光染料进行染色，RBC双膜被染色产生的荧光强度弱，位于散点图低荧光强度区。由于结晶的多样性，导致其散射光强度分布很宽，小型草酸钙结晶、聚集成团的非晶型尿酸盐、磷酸盐形态、大小、染色敏感度等与RBC基本相似，在散点图上两者交叉分布，会使测定结果假阳性升高并影响尿RBC形态分析；细菌体积较RBC小，但成堆的细菌颗粒与RBC相似，此外酵母菌大小与RBC相似较易误认。UF-1000检测为假阴性的标本，经镜检证实，红细胞为碎片或少量影红细胞，所产生的荧光强度弱，位于低荧光区，且测定碎片的体积比小红细胞小，产生假阴性。
3.2 白细胞的检测
UF-1000检测阳性而尿沉渣镜检阴性的标本，大多数是由于尿pH>8. 0造成白细胞破碎使尿沉渣镜检不出来，或由标本中的上皮细胞、滴虫、精子、无定型盐等引起。精子出现在尿液中时，常伴随有生殖道脱落的上皮细胞的存在，与白细胞形态相似，极易造成白细胞假阳性。UF-1000测定阴性而尿沉渣镜检阳性的结果原因不明，待进一步研究[6]。
3.3 管型的检测
UF-1000对管型的检测存在着很高的假阳性率。当尿液中黏液丝、上皮细胞多时，会使管型计数错误，其容易吸附于被荧光染料上色的物质发生强的前向散射光脉冲，易被UF-1000误认。所以UF-1000在第2个散射图出现的红绿色方格实际上是黏液丝或上皮细胞的前向散射光脉冲宽度(FSCW)和荧光脉冲宽度(FLW)，当混合尿中黏液丝含量增大时提示出现假阳性的可能性增大。为了尿液沉渣结果的可靠性和准确性，尿沉渣分析的2个散射图提示管型应进行显微镜检查以排除黏液丝干扰的情况[6]。UF-1000检测假阴性的标本，经镜检后发现少量透明管型，可能是少量透明管型在UF-1000上前向散射光和荧光脉冲较少、较低的原因，并且尿中少量透明管型的检出意义不大[7]。
3.4 上皮细胞的检测
UF-1000测定阳性而尿沉渣镜检阴性的标本并不多，经证实是由白细胞、管型、滴虫误辨造成，然而UF-1000检测小圆上皮的假阳性率较高，可能由于不典型白细胞、滴虫、裸核EC的存在。小圆上皮细胞是指细胞大小和白细胞相似或略大，形态较圆的上皮细胞，这些细胞散射光、荧光及电阻的信号变化较大，UF-1000不能较好地区分[8]。当存在大量白细胞尤其是脓细胞时，由于脓细胞大小形态与小圆上皮细胞相似，常导致小圆上皮细胞假阳性。
3.5 结晶的检测
UF-1000检测结晶的假阳性率较低且低于IQ-200，但UF-1000具有假阴性现象，结晶的种类繁多，无定形的盐类结晶极易漏检，可能与其不易被染料着色有关。此外，小型草酸钙结晶、聚集成团的非晶型尿酸盐、磷酸盐的形态、大小、染色敏感度等与RBC基本相似，在散点图上两者交叉分布，导致结晶的假阴性。
4.结论
尽管UF-1000尿液分析仪能快速、准确地测定尿中的多项参数，但因尿中有形成分种类较多、形态差异，仪器自身原理的局限性，标本的采集、处理等因素均影响尿中有形成分的测定。UF-1000尿液分析仪的优点是能对红细胞的异型性进行分析；它有专门的细菌通道，减少了大量细菌对其他有形成分检测的干扰；假阴性率低，不易漏检。该仪器最大的缺点是假阳性率高，这大大提高了复检率，增加了日常工作量。UF-1000除了有些结晶和霉菌容易被误认为红细胞以外，像肿瘤细胞、胱氨酸和酪氨酸结晶、脂肪滴或药物结晶以及各类管型的分型等还是需要依靠人工镜检[9-11]。多种因素可以影响尿沉渣分析仪的检测结果，应用UF-1000检测尿液有形成分只能作为一种初步筛查方法，当尿液病理成分检测结果提示增多，同时上述干扰成分亦呈阳性或增多时，尿沉渣镜检十分重要。因此，我们在日常实际工作中应严格执行本文提出的复检标准，从而减少误判率、避免漏诊或误诊，以保证报告结果的准确性。目前任何自动分析仪器仍不能完全替代人工镜检。
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论文作者:曹必蓉
论文发表刊物:《医药前沿》2016年1月第1期
论文发表时间:2016/5/12
标签：尿液论文; 分析仪论文; 阴性论文; 阳性论文; 成分论文; 结晶论文; 标本论文; 《医药前沿》2016年1月第1期论文;