哈药集团三精制药 150000
【摘 要】目的：通过应用薄层色谱鉴定方法，对山银花以及金银花两种药材进行鉴定。方法：首先需要确定指标成分，本次实验静啊山银花之中的皂苷乙作为实验的质变成分，选用的吸附剂主要是硅胶H，将特制的混合型溶剂当做展开剂进行应用，借助HPLC-ELSD这种鉴定结果比较好的方法对山银花与金银花两种中药药材进行鉴别。结果：在本次接受鉴定的55批金银花之中，检测出其中有23批金银花药品之中存在山银花，鉴别数值准确，检测效果比较好。结论：本次选用的TLC鉴别方法操作简单，鉴别速度比较快，具有快捷的药材检测效果。
【关键词】金银花；山银花（灰毡毛忍冬）；TCL鉴别方法
金银花是一种药用价值极高的重要药材，其最主要的功效就是清热解毒，这种药材与一般的中药药材相比，不会伤害到服用者的胃部，刺激比较小，可以对热毒、身热以及咽喉肿痛等疾病起到比较好的治疗效果，金银花药材还可以与其他的药材配合使用，对于高血压、呼吸道感染等多种疾病均有较好的治疗效果。山银花是金银花重要植物来源，其与金银花具有相似的使用功效，同样具有解毒清热的药用价值，可以消除热毒血痢、丹毒温热等症状。在我国的《药典》之中，给出了两种药物的使用量以及使用方法，其用法以及用量极为相似，两种药材的外形也比较相似，在这种鉴定条件下，鉴定两种药材是极为困难的，一些药材生产者常常会将山银花混入到金银花之中售卖，本文对有效的鉴定山银花以及金银花的方法进行分析，采用的鉴定方法是TLC薄层色谱鉴定法。
1 材料与方法
1.1 一般材料
仪器岛津高效液相色谱仪、灰毡毛忍冬皂苷乙对照品(批号:111814-201102，纯度88.1%);金银花对照药材(批号:121060-201107);山银花(灰毡毛忍冬)对照药材(批号:121595-201202)；均购自中国药品生物制品检定所。
1.2 方法
1.2.1 制备方法
提取溶剂考察:供试品分别用三种不同的溶剂进行提取，分别为甲醇、丙酮、乙酸乙酯。实验方法为:取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。另取金银花对照药材和山银花(灰毡毛忍冬)对照药材粉末各0.5g，每样3份，分别加上述三种溶剂各10ml。超声处理10分钟(250W 35KHZ)，滤过，滤液作为供试品溶液。吸取上述对照品溶液及6种供试品溶液各10W，分别点于同一硅胶H板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5)上层溶液为展开剂，展开，展距8厘米，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，日光下检视。以上结果表明，甲醇提取效果良好，斑点清晰，因此选用甲醇作为提取溶剂。
供试品用三种不同的方法进行提取，分别为超声(250W 35KHZ)、浸泡(静置过夜)、震荡(30min)。实验方法为:取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。另取金银花对照药材和山银花(灰毡毛忍冬)对照药材粉末各0.5g，每样3份，加甲醇溶剂各10ml，分别按上述3种不同方法提取，滤过，滤液作为供试品溶液。吸取上述对照品溶液及6种供试品溶液各10叫，分别点于同一硅胶H板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5)上层溶液为展开剂，展开，展距8厘米，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在l〇5°C加热至斑点显色清晰，日光下检视。以上结果表明，3种提取方法的实验结果无显著差异，因此从简便、省时的角度考虑，选择超声作为提取方法。
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1.2.2 其他考察方法
按优化后的制备方法制备的供试品(金银花对照药材和山银花(灰毡毛忍冬)对照药材)溶液(0.05g/ml甲醇提取液)，对照品(灰毡毛忍冬皂苷乙)溶液(1mg/ml甲醇溶液)。吸取供试品溶液，对照品溶液各10%，分别点与同一硅胶H板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5)上层溶液为展开剂，展开，展距8厘米，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在l〇5°C加热至斑点显色清晰，日光下检视。以上结果表明，供试品(山银花(灰毡毛忍冬)药材)色谱与对照品色谱(灰毡毛忍冬皂苷乙)在相同位置(RP0.33)上，显相同的紫色斑点。
稳定性考察中，供试品溶液在室温下分别放置了0天、2天、4天。吸取对照品(灰毡毛忍冬皂苷乙)溶液(1mg/ml甲醇溶液)及供试品溶液各10叫分别点与同一硅胶H板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5)上层溶液为展开剂，展开，展距8厘米，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，日光下检视。
重现性考察中，取编号为446的样品6份制成供试品溶液。吸取对照品(灰毡毛忍冬皂苷乙)溶液(1mg/ml甲醇溶液)及6份供试品溶液各100，分别点与同一硅胶H板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4:1:5)上层溶液为展开剂，展开，展距8厘米，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，日光下检视。以上结果表明，6份供试品溶液的色谱图基本一致，说明此方法重复性良好。
2 结果
本次实验主要对55份金银花药材样品进行检测，经过检验之后发现有23份药材样品之中存在灰毛毡忍冬皂苷乙这种山银花成分，因此可以确定这23份金银花药材之中掺有山银花，检测人员将这23份药材清晰地标注出来，剩余32份药材通过检测。
结合薄层色谱的鉴别结果，我们又用高效液相色谱(蒸发光检测器)进行了验证，色谱图显示，灰毯毛忍冬皂苷乙的色谱峰保留时间为21.7±0.1min。有23批样品中检出灰毡毛忍冬皂苷乙。薄层色谱鉴别结果与高效液相色谱(蒸发光检测器)验证结果相吻合。充分说明此薄层色谱方法准确可靠
3 讨论
随着药理研究人员对于金银花药材的了解不断深入，《药典》之中关于其药材的基本来源也在出现变化，在长时间之前就已经将山银花与金银花区分开，虽然从理论上来讲，两种药材被有效区分，但是从药材检验的成果来看，常规的药材鉴别方式是无法将山银花与金银花两种药材完善区分，在药材生产的实际过程之中，常常会有生产人员将两种药材混合在一起，从山银花与金银花的实际成分来看，两种药品最大的区别就是，山银花具有灰毛毡忍冬皂苷乙这种成分。从药品的价格来看，山银花与金银花药品的价格差距比较大，几乎达到相差2-3倍的情况，而在当前的药品市场之中，常常会存在将山银花混入到优等的金银花之中的情况，当前应用的金银花药材应用标准之中并没有明确给出鉴别方法，本次研究实验选择了薄层色谱的鉴别方法，这种方法比外观鉴别法更为精准，操作也相对比较简单，完成鉴别工作之后，有选择借助HPLC-ELSD法对鉴别结果进行检测，可以了解到该方法确实适合被应用在鉴别山银花与金银花两种药理与外形均相似的的药材，对于这种薄层色谱鉴别法，还可以加以改进，提升鉴别速度，有效地减少金银花药材掺假的情况。
参考文献
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论文作者:苏晓明
论文发表刊物:《世界复合医学》2017年第10期
论文发表时间:2018/4/10
标签：溶液论文; 药材论文; 忍冬论文; 银花论文; 色谱论文; 两种论文; 方法论文; 《世界复合医学》2017年第10期论文;