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摘要：目的 分析高效液相色谱法（HPLC）测定维生素AD滴剂中维生素A含量的效果。方法 HPLC测定维生素AD滴剂中维生素A含量的色谱条件：分析柱为 Kromasil 100-5C18（150mm×43mm，5µm）；流动相为甲醇：酒精（80：20）；流速为0.5mL/min；柱温30℃，检测器在270nm波长处检测维生素A。结果 维生素AD滴剂中维生素A分离良好，回归方程为A=775.98C+12.97（r=0.9997），线性范围为1.21-2.84mg/mL。维生素A的平均回收率为99.94%，RSD为1.28%。维生素A样品在6h内稳定性较好。维生素A含量为（0.3969±0.05）mg/mL。结论 用HPLC法测定维生素AD滴剂中维生素A的含量方法简便、速度快、灵敏度和精确度高、重复性和稳定性好，值得推广应用。
关键词：维生素A；高效液相色谱法
维生素A具有多种生理功能[1]：调节生长发育、提高免疫力、保护视力等，缺乏维生素A会导致发育迟缓、易感性提高、视力下降等疾病。维生素AD滴剂是临床补充维生素A的常用方法，准确检测其中的维生素A含量对于把握药物的质量和疗效至关重要。临床测定维生素常用的一种方法是高效液相色谱法（HPLC）[2]。本研究采用HPLC法测定药品（维生素AD滴剂）中维生素A含量，效果颇佳，现将结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 仪器及试剂
高效液相色谱仪（美国赛默飞公司）、紫外检测器（南京普阳科学仪器研究所）；离心机（德国奥豪斯公司）；旋涡器（美国SCI公司）；维生素A标准品（北京神州科创化工技术研究所）；乙醇（分析纯）；甲醇（色谱纯）；正己烷（分析纯）；高纯氮气。
1.2 色谱条件
分析柱：Kromasil 100-5C18（150mm×43mm，5µm），柱温30℃。检测波长270nm；流动相：甲醇：酒精（80：20）；流速0.5mL/min；进样量20µL。
1.3 制备校准曲线
将维生素A贮备液用乙醇进行稀释，分别用10mL容量瓶取0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.4mL溶液，加满流动相后充分摇匀，用HPLC进行测定。
2 结果
2.1 校准曲线
校准曲线的回归方程为A=775.98C+12.97（r=0.9997）。线性范围为1.21-2.84mg/mL。
2.2 回收率 回收率结果见表1。
表1 维生素A回收率
表1显示，维生素A的平均回收率为99.94%，RSD为1.28%。
2.3 精密度和稳定性
选取维生素A样品经校准曲线计算实际浓度，结果为0.1795%。取同一样品，分别于0h、2h、4h、6h进样测定，其结果分别为0.1790%、0.1787%、0.1792%、0.1769%，说明检测物在6h内具有良好的稳定性。
2.4 维生素A含量测定
经HPLC测得样品中的维生素A含量为（0.3969±0.05）mg/mL。
3 讨论
作为一种重要的微量物质，维生素A在神经、呼吸、消化、内分泌、生殖、免疫等各个系统都可发挥相应作用。维生素A具有维持神经兴奋性、调节呼吸、帮助消化吸收、调节内分泌、促进生殖功能、提高免疫力等多种生理功能[3]。维生素A缺乏会导致多种多样的疾病，而补充维生素A是最常用最简便易行的方法。维生素AD滴剂是临床补充维生素A的常用药品，而对其中的维生素A含量的准确把握是保证药品质量和疗效的首要因素。因此需要一种简便而可靠地测定维生素A的方法，HPLC法正是可以满足这一要求的检测方法[4]。
HPLC法的工作流程是，用微量加样器将提纯过的样品加入顶端起始系统后开启高压泵，在压力的推动下，流动相进入色谱柱。随着样品在流动相与固定相之间多次的不断行进，完成物质交换，随后按不同样品所带的不同电荷数量、不同分子极性以及不同分配系数进行分离并根椐检测所得的曲线峰面积计算样品含量。HPLC法检测过程比较简单、分析速度较快、灵敏度和精确度较高、重复性和稳定性良好。本研究采用HPLC法测定维生素AD滴剂中维生素A的含量。结果显示，维生素AD滴剂中维生素A分离良好，回归方程为A=775.98C+12.97（r=0.9997），线性范围为1.21-2.84mg/mL。维生素A的平均回收率为99.94%，RSD为1.28%。维生素A样品在6h内稳定性较好。维生素A含量为（0.3969±0.05）mg/mL。表明HPLC法可以排除维生素AD滴剂中杂质的干扰，更加准确、便捷、有效地测定了其中所含维生素A的量。
综上所述，HPLC法测定维生素A的方法操作快速、简便、准确，且成本低，适宜常规开展，值得推广应用。
参考文献：
[1] 张银花，冯新昌. 景泰县妇女血清维生素A、E含量测定[J]. 甘肃科技，2016，11（3）：182-183.
[2] 阳利龙，银雪花，祝文兵，等. HPLC测定血清中25-羟基维生素D3和维生素A及应用[J]. 儿科药学杂志，2015，15（1）：41-43.
[3] 郑凤家，别明江，孙成均. DLPME-HPLC同时测定微量人血清中的维生素A和E[J]. 现代预防医学，2014，11（4）：1522-1524.
[4] 刁娟娟，田兰，孙炜，等. 高效液相色谱法测定人血清中维生素A、E、C的含量[J]. 化学通报，2017，18（9）：826-831.
论文作者:陶骥文
论文发表刊物:《健康世界》2018年15期
论文发表时间:2018/8/27
标签：维生素论文; 滴剂论文; 含量论文; 样品论文; 高效论文; 色谱论文; 方法论文; 《健康世界》2018年15期论文;