【摘要】目的：探讨在病理技术中应用新型环保生物组织透明剂（ＴＯ试剂）替代二甲苯的可行性。方法：病理常规制片中，应用ＴＯ试剂与二甲苯各制片10000张，并进行效果比较。结果：应用ＳＰＳＳ１７．０统计软件对两种试剂制片效果进行比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：在日常病理技术工作中，ＴＯ试剂可以替代二甲苯。
【关键词】ＴＯ试剂 二甲苯 病理技术 替代
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2018）15-0447-02
病理技术在临床制作前切片工作中具有重要作用，其首要任务是制作出性能优良的组织切片，常规石蜡制片技术中，切片脱蜡、透明及封固工作中都需要应用到透明脱蜡剂，因此透明脱蜡剂是临床病理制片技术中常用的有机溶剂，通常会将二甲苯作为透明脱蜡剂有效成分，使其透明能力增强、脱蜡工作进行彻底，且工作时间较短，但二甲苯属于中度毒性试剂，使病理组织变脆、收缩，对长期工作于二甲苯有毒环境下工作人员的身心健康造成威胁，且严重污染生活环境。而环保生物组织透明剂可与石蜡、水及乙醇等混合，同时具有脱蜡和透明作用，近年来，各医院病理科正逐步使用一种新型环保生物组织透明剂（ＴＯ试剂），笔者结合本科室使用该试剂的效果报告如下：
１ 材料与方法
１．１ 材料 选取2014年1月—2017年12月临床送检标本，包括脑、眼球、甲状腺、扁桃体、淋巴结、肾脏、乳腺、骨、软骨、食管、胃、肠、子宫等组织，ＴＯ试剂与二甲苯试剂均由正规厂家提供。
１．２ 方法
１．２．１ 组织处理
按常规程序进行固定、脱水、透明、浸蜡来处理组织。其中，透明过程用ＴＯ试剂Ⅰ、ＴＯ试剂Ⅱ和二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ进行对照。组织包埋、切片后，染色中同样使用ＴＯ试剂Ⅰ、ＴＯ试剂Ⅱ和二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ进行对照。
１．２．２ 制片质量
把脱蜡干净、透明度好、着色适中、颜色鲜亮的切片划归为优质片，其次为良好片，再次为差片。
１．３ 统计学方法
应用ＳＰＳＳ１７．０统计软件将两种试剂制片各级制片数进行比较，经检验两种试剂差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。
２ 结果
将10000张切片进行比较后，两种试剂制片质量。ＴＯ试剂与二甲苯制片效果对比：ＴＯ试剂优质片7633，良好片2145，差片222。二甲苯优质7587，良好片2213，差片200。
3 讨论
经试验研究显示，二甲苯在石蜡制片技术中脱蜡透明效果较好，但其燃点和沸点较低，易燃、易发挥。二甲苯属于芳香烃类化合物，其结构中含有苯环，长期使用二甲苯使工作人员身体造成极大危害，二甲苯吸入过量可对患者眼睛。喉咙等部位产生刺激，二甲苯与呼吸道及皮肤接触可对神经系统造成损害，尤其是血液系统，轻症可造成神经功能紊乱、造血功能低下，重症可导致再生障碍性贫血，工作人员长期吸入二甲苯还可引起神经衰弱综合征、肌肤粘膜刺激症等，还可引起贫血、皮炎、皮肤干燥、白细胞减少、免疫功能低下等，吸入浓度较高的二甲苯还可能引发重症呼吸困难，甚至导致死亡；我国卫生部已将二甲苯浓度做出具体规定，并将二甲苯中毒列为职业病，因此必须研发一种安全无毒可代替二甲苯的优良试剂，有关实验报道称使用松节油代替二甲苯进行制片，但单纯使用松节油进行透明，其效果相比二甲苯较差，且松节油比较粘稠，不易清洗。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
一直以来二甲苯是用于组织透明的常规试剂； 由于二甲苯能很好地溶解石蜡， 所以在病理组织制片过程中， 二甲苯是首选的脱蜡剂。 但二甲苯属于中度毒性的化学试剂， 会对长期在二甲苯环境下工作的技术员的身体健康造成损害， 尤其在快速石蜡制片的操作过程中， 需要加热二甲苯， 加速了试剂的挥发， 既会造成环境污染， 又不利于操作人员的身体健康。 因此不少学者探讨用其他试剂代替二甲苯， 有研究用松节油代替二甲苯作为透明剂， 但是单纯的松节油透明和脱蜡效果远不及二甲苯， 而且使用久了会变得黏稠。二甲苯结构中含有苯环，属于芳香烃类化合物，长期处于二甲苯环境中可对机体产生危害。
ＴＯ试剂是一种新型生物组织透明剂，其结构中不包含芳香烃类化合物，主要以醇类作为稀释剂，对人体不会产生危害，且有效保护环境。患者组织经过梯度乙醇清洗并脱水后浸蜡，但石蜡同乙醇不互溶，因此需要一种试剂作为石蜡和乙醇间融合桥梁，ＴＯ试剂可作为二者间桥梁，使乙醇、石蜡互溶。新型生物组织透明剂与二甲苯对患者组织均具有收缩作用，经试验研究结果显示，只要适当控制透明时间，新型生物组织透明剂对组织收缩作用不会影响其结构正常显示，且该试剂可有效溶解组织中石蜡，因此新型生物组织透明剂可代替二甲苯进行脱蜡。使用ＴＯ试剂制作的切片核质分明、细胞形态结构完好，较好显示细胞结构，但在使用过程中需注意以下内容：首先，乙醇浓度梯度掌握程度，根据组织大小适当调整脱水时间；首次使用新型生物组织透明剂应更换石蜡及乙醇；染色处理过程中可加热切片，提升脱蜡效果。
生物组织透明剂和二甲苯对组织都有收缩作用， 但比二甲苯少， 但在组织透明过程中， 只要作用时间适当，对组织的收缩作用较少， 能很好地保存组织细胞结构， 其作用效果与二甲苯相当。在病理科日常工作中，病理医师对送检标本取材后，病理技师需将待检标本进行固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等步骤，以上总称为病理制片。其中，透明与染色两步操作中均需使用透明剂对标本进行处理，透明效果直接影响制片质量。二甲苯是常用的组织透明剂，但因其毒性、刺激性气味及环境污染等弊端，均需一种替代产品。
综上所述，临床病例技术中，可使用新型环保生物组织透明剂代替传统二甲苯作为制片试剂，符合实验室环保需要，减少对工作人员身体损害程度。以上研究表明，在病理技术工作中该新型环保生物组织透明剂能够替代二甲苯，病理切片优良率较高，能够达到临床病理诊断和科研要求，同时也符合实验室环保要求及减少病理工作者身体损害。制作出的组织染片不会对组织细胞结构和组织细胞内其他成分以及组织抗原造成破坏， 符合临床病理诊断和研究所的要求， 同时也符合实验室环保的要求。
参考文献
[1] 凌启波.实用病理特殊染色和组化技术 [M] . 广州 ： 广东高等教育出版社,1989.
[2] 梁英杰， 黎红， 赖英荣. 免疫组织化学 LDP 染色法在病理诊断中的应用 [J] . 中华病理学杂志， 1999， 28 （1）： 60.
[3] 李玲, 王文东, 栗学军,等.低浓度苯和甲苯及二甲苯对作业人员健康及 血 清 中 超 氧 化 物 歧 化 酶 的 影 响 [J] . 工 业 卫 生 与 职 业 病 ，2003， 29 （4）： 238.
[4] 詹彦平， 张 云.松节油代替二甲苯透明剂制片探讨 [J] .实用医技杂志， 2007,14 (16) :2256.
[5] 凌启波 , 梁英杰 . HE 制片质控要求 [J] . 临床与实验病理学杂志 ，2000,16 (4) :333.
［6］ 梁英杰，罗灿峤，董愉，等．新型生物组织透明剂代替二甲苯在病理制片技术中的应用研究［Ｊ］．２００９，１６（３）：５８－５９．
［7］ 王伯沄．病理学技术［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２０００：７８－７９．
［8］ 中华人民共和国卫生部．工业企业设计卫生标准［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，１９７９：１１－１２．
［9］ 丁文清，潘小川．室内污染物与白血病关系研究进展［Ｊ］．环境与健康杂志，２００６，２３（１）：８３－８６．
论文作者:苏莹
论文发表刊物:《医师在线》2018年第15期
论文发表时间:2018/11/16
标签：甲苯论文; 试剂论文; 透明论文; 组织论文; 病理论文; 制片论文; 石蜡论文; 《医师在线》2018年第15期论文;