（云南省普洱市人民医院检验科 云南普洱 665000）
摘要：目的 寻找一种能够简便易行的方法准确检测EDTA依赖致假性血小板减少血细胞计数方法。方法 对本院2012年11月至2015年10月间共发现的7例EDTA依赖导致血小板假性降低的患者依然用EDTA抗凝剂抗凝抽取3ml全血分别在离体时间0分钟、5分钟、10分钟、15分钟、30分钟、60分钟进行检测，评估其检测的有效性。结果 7例患者EDTA抗凝血液离体时间在5分钟内检测血小板无聚集 结论 EDTA依赖导致血小板假性降低的标本可以通过抽取静脉血液使用EDTA抗凝5分钟内立即进行检测的方法进行纠正。
关键词：EDTA依赖假性血小板减少；立即检测；EDTA 抗凝剂;
血常规检测是临床最常见的检测项目之一，常规抗凝剂为乙二胺四乙酸盐是国际血液学标准化委员会推荐应用于血细胞计数分类时使用的标本抗凝剂。一般情况下EDTA抗凝剂对细胞形态和血小板计数影响很小，而且还可以抑制血小板聚集，因此一直被认为是血细胞计数及分类最理想的抗凝剂，但是有些EDTA抗凝标本出现血小板聚集，导致血小板计数出现假性降低，临床上称为EDTA依赖假性血小板减少症（EDTA-PTCP）,如何应用简便快速的方法纠正并正确计数出此类患者血小板的数量，笔者做了以下研究
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集2012年11月至2015年10月间本院发现的7例EDTA依赖导致血小板假性降低的患者静脉血标本，年龄在31-74岁之间。
1.2 仪器与试剂 血细胞分析采用美国Beckman Coulter LH 750型全自动血细胞分析仪及其原装配套试剂及校准品，质控品由伯乐公司提供。周围血样本进行手工涂片复检采用日本OLYMPUS BX41型显微镜、瑞氏染液由贝索公司提供。实验期间，所用试剂、校准品和质控品均在效期内，室内质控均显示在控。
1.3 方法
对每位患者抽取3ml静脉血用EDTA抗凝剂抗凝，立即（0分钟）、5分钟、10分钟、30分钟、60分钟在LH750血细胞分析仪上进行检测并同时在相应时段涂片观察血小板分布及有无聚集。血涂片观察由两位具有三年以上细胞形态学检查经验的主管检验师进行双盲镜检，镜检方法严格按照全国临床检验操作规程进行［1］。
2 结果
2.1结果判断 对应时间段内血涂片观察未发现血小板聚集为EDTA依赖假性血小板减少患者理想检测时间，未见聚集用：— 表示，聚集：+ 表示。
2.2结果分析 统计发现7位EDTA依赖假性血小板减少患者用EDTA抗凝血检测血小板计数从血液离体时间到检测时间在5分钟之内结果无影响，血小板无聚集。10分钟有3位患者血小板出现聚集，30分钟后全部患者血小板出现聚集。见表1-2
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3 讨论
EDTA-K2于1993 年被国际血液学标准化委员会（ICSH）认定为血常规的常用抗凝剂，在血细胞分析计数中具有很多优点，但对有些患者能引起血小板体外聚集，造成假性血小板减少，误导临床诊断。EDTA-PTCP 发生机制的研究也持续了40余年，其包括EDTA导致患者抗凝血中针对血小板膜表面抗原的抗体增多，发生抗原抗体反应；血小板糖蛋白Ⅱｂ（GPⅡｂ）与血小板糖蛋白Ⅲａ（GPⅢａ）间存在一种单克隆抗体，当此抗体遇到EDTA 抗凝剂时会引起血小板凝集；血小板表面带负电荷的磷脂抗体与由EDTA 修饰的血小板膜表面抗原结合从而发生血小板凝集。研究EDTA-PTCP 国内外均有报道，临床发生率约为0.07％ ～0.1 ％[2]为减少EDTA 依耐性血小板假性减少患者的误诊和漏诊，有学者报道能用其它抗凝剂，如枸橼酸盐、肝素代替EDTA能得到准确的血小板计数［3］，又有学者报道1例多抗凝剂依赖的假性血小板减少症患者［4］。在临床检验工作中，遇到血细胞分析计数出现PLT减少，血小板直方图存在异常或者仪器出现阳性预警我们应该进行血涂片复检[5]，发现血小板聚集若怀疑EDTA-PTCP应与医生及患者联系沟通，通过笔者研究应用EDTA抗凝抽血后5分钟内立即进行血细胞仪器检测的方法可以纠正EDTA依赖导致血小板假性减低的患者得到准确的血小板数量。
4 小结
通过本次研究，EDTA抗凝血离体后5分钟内立即进行检测可以纠正EDTA依赖导致血小板假性减低的患者血小板数量，此方法简便易行，能给患者减少不必要的生理及经济负担，同时能为临床提供准确的检测结果。
参考文献
[1]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:10
[2]Bragnani G,Bianconcini G,Brogna R,et al,Pseudo thrombocy topenia,Clinical Comment on 37 Cases[J],Minerva Med,2001,92(1):13-1
[3]周小棉，巫小莉，邓伟雄，等.丁胺卡那霉素抑制和解离抗凝剂依赖的假性血小板聚集作用研究[J].中华检验医学杂志，2007,30（3）：333-336
[4]Zhou X ,Wu X,Deng W,et al. Amikacin can beadded to blood to reduce the fall in platelet count [J].Am J Clin Pathol,2oo1,136(4):646-652.
[5]北京协和医院血细胞分析复检规则制定组.Siemens Advia2120血细胞分析仪复检规则的制定及应用[J].中华检验医学杂志，2010,33（7）：674-679
论文作者:刘春燕
论文发表刊物:《医师在线》2016年1月第2期
论文发表时间:2016/5/24
标签：血小板论文; 血细胞论文; 患者论文; 涂片论文; 方法论文; 血小板减少论文; 抗体论文; 《医师在线》2016年1月第2期论文;