罗德维1 王开宇1 王顺东1 周林碧1 彭焕文1 袁丹2(通讯作者)
（1四川省达州市疾病预防控制中心 四川 达州 635002）
（2四川省疾病预防控制中心 四川 成都 610041）
【摘要】 目的：比较梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）在梅毒诊断和疗效中的应用价值。方法：对1763例性病门诊就诊者、120例非梅毒病例患者、120例健康体检者、100例梅毒治疗患者随访3个月、6个月后的血清标本用TRUST法与TPPA法联合检测，记录结果并分析。结果：1763例性病门诊就诊者中，TRUST检出阳性303份（17.19%），TPPA检出阳性493份（27.96%），TRUST和TPPA均阳性296份（16.79%）；120例非梅毒患者的TRUST和TPPA阳性率分别为6.67%和0；120例健康体检者的TRUST和TPPA阳性率分别为0.83%和0；TRUST阳性滴度>1:4、滴度≤1：4的样品TPPA检测结果有差异；100例梅毒治疗患者随访检测结果显示，TPPA均为阳性，TRUST出现滴度下降或转阴。 结论：TRUST和TPPA都是梅毒诊断快速有效的方法，TPPA特异度和灵敏度均明显高于TRUST，但TRUST适合大批量标本筛查，且在疗效观察价值上明显好于TPPA，建议对高危人群就诊者、初诊患者使用TRUST和TPPA联合检测，在治患者可只进行TRUST检测。
【关键词】 梅毒；梅毒甲苯胺红不加热血清试验；梅毒明胶颗粒凝集试验；价值分析
【中图分类号】R52 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）04-0021-02
Value analysis of TRUST and TPPA testing for syphilis diagnosis and curative effect
Luo Duowei1, Wang Kaiyu1, Wang Shundong1, Zhou Linbi1,Peng Huanwen1,Yuan Dan2.
1.Dazhou Center for Disease Control and Prevention, Dazhou, Sichuan 635002, China；2. Sichuan Center for Disease Control and Prevention,Chengdu 610041,China.
【Abstract】Objective To compare the clinical value of TPPA (treponema pallidum Antibody particles agglutinate experiment) and TRUST (toluidine red unheated serum test) in the diagnosis and treatment of syphilis. Methods 1763 cases of STD clinic patients, 120 cases of non syphilis patients ,120 cases of normal ,100 cases of syphilis patients treated for 3 months and 6 months were selected as subjects.The results of the joint detection with TRUST and TPPA were recorded and compared. Results In 1763 cases of STD clinic patients, 303 cases (17.19%) were syphilis positive in TRUST tests, 493 cases(27.96%) were syphilis positive in TPPA tests , and 296 cases(16.79%) were syphilis positive both in TRUST and TPPA tests. Among the 120 cases of non syphilis patients with TRUST and TPPA, the positive rates were 6.67% and 0. Among the 120 cases of normal with TRUST and TPPA, the positive rates were 0.83% and 0. The TPPA results were differences between the TRUST titer> 1:4 samples and the TRUST titer ≤1:4 samples. 100 cases of syphilis patients follow-up test results showed that, TPPA was positive, TRUST titer was decreased or negative. Conclusion Both the TRUST test and TPPA test could be the fast and effective method in diagnosis of syphilis. TPPA, as confirmed diagnose test in the specificity and sensitivity is significantly higher than TRUST. However, TRUST was more suitable foe screening a large number of specimens, and significantly better than TPPA in clinical therapeutic effect observation. The author suggested that the high-risk groups and the first-visit patients should be tested by TRUST and TPPA joint detection, the patients in treatment can only be detected by TRUST.
【Key words】Syphilis ; TRUST; TPPA; Value analysis;
梅毒（syphilis）是由苍白螺旋体苍白亚种（TP）感染所引起的一种慢性、系统性性传播疾病[1]。以性传播、母婴垂直传播等为主要传播途径。其临床表现复杂多样，时显时隐，病程长，危害大，是我国重点防治的性传播疾病之一，在《中华人民共和国传染病防治法》中纳入乙类传染病管理。近年来我国梅毒感染率呈急剧上升趋势，在梅毒阳性检出者中，隐性梅毒数量最多[2]，且梅毒感染可增加患艾滋病的风险[3]。因此，推行简单有效的检测方法是防治监测梅毒的重要手段之一，目前，梅毒血清学试验仍然是基层医疗机构发现和诊断梅毒病例的主要手段，其方法有多种，一类是检测特异性抗体，如梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA），酶联免疫吸附试验（ELISA）等，另一类是检测非特异性抗体，如甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、快速血浆反应素试验（RPR）等。笔者对本实验室收到的血清标本分别进行了TRUST和TPPA检测，现对检测结果进行分析，探讨TRUST和TPPA试验在梅毒诊断和疗效观察中的应用价值。
1.资料和方法
1.1 血清标本
收集2014年1月至2015年6月达州市疾病预防控制中心性病门诊就诊者血清标本1763例，其中男性974例，女性789份，平均年龄41岁。随机选择100例梅毒治疗患者随访3个月、6个月后复查。同时选取附属医院门诊120例非梅毒患者和120例健康体检者，作为正常对照。
1.2 仪器和试剂
TRUST试剂购自上海荣盛生物技术有限公司，TPPA试剂由日本富士株式会社提供，试剂均在有效期内使用。TRUST试验用摇床为苏州东吴电子WZR-H6000型数显混匀器。
1.3 方法
1.3.1检测方法 采用TRUST法、TPPA法对以上标本进行检测，操作步骤和结果判断均严格按试剂盒说明书和仪器SOP文件的要求进行。
1.3.2参考标准 参照《中华人民共和国卫生行业标准》（WS273-2007）进行梅毒检测和梅毒病例诊断。
1.3.3质量控制 每次实验均设阴、阳对照，带外部质控品进行室内质量控制，实验室每年参加国家疾控中心组织的梅毒血清学检测室间质评。
1.4 统计学处理
计数资料比较用χ2 检验，以 P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 两种检测方法对不同受检人群梅毒检测结果
性病门诊就诊者TPPA和TRUST检测阳性率分别为27.96%和17.19%，有显著性差异（P<0.05）；非梅毒病例TPPA和TRUST检测阳性率分别为0和6.67%，有显著性差异（P<0.05）；健康体检者TPPA和TRUST检测阳性率分别为0和0.83%，无显著性差异（P>0.05），见表1。
表1 两种检测方法对不同受检人群的梅毒检测结果
2.4 100例梅毒治疗患者追踪检测结果。
对100例梅毒治疗患者分别在治疗3个月、6个月后进行了TRUST和TPPA联合检测，以TRUST阳性滴度下降4倍以上或转阴作为治疗有效的标准，检测结果显示，治疗3个月后，TRUST阳性滴度下降4倍以上的有30例，滴度转为阴性的有14例，治疗有效率为44.0%,治疗6个月后，TRUST阳性滴度下降4倍以上患者42例，滴度转为阴性的有21例，治疗有效率为63.0%，二者有显著性差异（P<0.05)；而治疗三个月、6个月后的患者血清标本TPPA检测结果均为阳性。
3.讨论
人体感染梅毒螺旋体后可发生一系列血清免疫反应，产生两种抗体，一种是直接针对梅毒螺旋体抗原的特异性抗体，主要成分是IgM和IgG，大约在感染4周后形成；另一种是抗磷脂类的非特异性抗体，也称反应素，大约在感染6周后形成。
TRUST试验主要是测定血清中的心磷脂抗体，操作简单快速，肉眼可以观察结果。但易受多种因素影响，某些病毒性疾病、自身免疫性疾病也可能产生反应素导致假阳性结果[4]。在本次研究中，非梅毒病例对照组有8例TRUST阳性，TPPA阴性的患者，经进一步确诊其中有5例为活动性肺结核患者，3例为病毒性肝炎患者，由此可见TRUST易发生生物学假阳性。据文献报道，人体感染梅毒螺旋体后，血清中产生的抗螺旋体抗体比类脂质抗体早[5]，晚期梅毒时反应素又可转为阴性等，TRUST法不适应于I期梅毒早期，3期梅毒，对潜伏梅毒和神经性梅毒也不敏感，有可能出现假阴性结果[6]。本试验性病门诊就诊者中检测阳性率从高到低依次为TPPA阳性（27.96%）、TRUST阳性（17.19）、TPPA和TRUST均阳性（16.79%），TPPA和TRUST阳性率有显著性差异，493例TPPA阳性病例中TRUST阴性197例（39.96%），TPPA法敏感性高于TRUST法，单纯使用TRUST法进行筛查存在假阴性，有漏检现象。
TPPA法测定的是血清标本中的梅毒特异性抗体，抗体类型为IgG抗体，具有高度的特异性和敏感性，是目前公认的梅毒确认试验[7]。本次试验结果显示，在非梅毒病例对照组和健康体检者中，TPPA试验均为阴性，可见TPPA试验具有高度特异性。
本实验中对TRUST>1:4的87例阳性样本进行TPPA检测，结果显示均为阳性，建议使用TRUST检出高滴度时可直接作出梅毒诊断；而对TRUST低度≤1:4的216例阳性样本的TPPA阳性检出率为96.76%，因此在检出低滴度时，应结合TPPA结果和临床症状，谨慎排除生物学假阳性。
对100例梅毒治疗患者正规驱梅治疗3个月、6个月后检测结果显示，TPPA试验检测结果均为阳性，而TRUST试验转为阴性的和滴度下降4倍以上的患者数量随着治疗进程的深入而增多。可见TPPA试验不能用于评价疗效或判断复发与再感染，而TRUST则是评价疗效或判断复发与再感染的良好指标。
以上研究说明，TRUST法虽然适用于人群筛查和疗效观察，但仅以TRUST法作为梅毒血清学检测，存在一定的假阳性和假阴性，在滴度较低时需结合TPPA法结果进行鉴别诊断；而TPPA法的敏感性、特异性优于TRUST法，是临床常用的梅毒确诊试验，但成本较高、观察时间长，不适合大量标本的筛查和疗效观察。因此，笔者建议对于大批量的非高危人群标本可使用TRUST法筛查，再用TPPA法确认；对于高危人群患者、初诊患者最好同时开展TPPA和TRUST两种试验，对于已确诊的梅毒治疗患者，可只进行TRUST检测。
【参考文献】
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论文作者:罗德维1,王开宇1,王顺东1,周林碧1,彭焕文1,
论文发表刊物:《医药前沿》2016年2月第4期
论文发表时间:2016/5/20
标签：梅毒论文; 阳性论文; 患者论文; 血清论文; 抗体论文; 阴性论文; 螺旋体论文; 《医药前沿》2016年2月第4期论文;