（牡丹江市疾病预防控制中心；黑龙江牡丹江157099）
【摘要】目的：探讨腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验运用不同方法的临床效果。方法：选择2016年4月-2018年4月期间32例腹泻患者为研究对象，分别运用RT-PCR法和培养法检验小肠结肠炎耶尔森菌，对比分析两种方法检测结果。结果：所有患者均顺利完成检验，与培养法相比，RT-PCR法的阳性率较高，对比差异明显（P<0.05）；同时，10例阳性患者中，儿童占有较高的比例，并且主要为阑尾炎、胃肠炎。结论：临床上运用RT-PCR法检测腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌可以提高检出率。
【关键词】小肠结肠炎、耶尔森菌、腹泻、聚合酶链反应
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2018）18-0363-01
结肠炎是比较常见的一种消化道疾病，其发病与感染病原菌有关，尤其是小肠结肠炎耶尔森菌，作为肠道的一种传染性病菌，患者感染后，以腹泻、腹痛等症状为主要表现，并且还会出现胃肠道、骨骼以及呼吸道症状，如果不及时治疗，容易出现诸多并发症，尤其是败血症，严重的情况下，甚至危及患者生命安全，所以早发现、早诊断、早治疗尤为重要[1]。因此，本文对RT-PCR法运用在腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验中的临床价值进行了探讨，现报道如下。
1.资料和方法
1.1一般资料
选择2016年4月-2018年4月期间腹泻患者32例为研究对象，年龄5个月-72岁，平均（36.2±12.7）岁，其中12例为女性、20例为男性。入选标准：①所有患者的每天排便次数均>3次，且大便性状改变；②患者及家属自愿参与研究，且签署知情同意书；③经医院伦理委员会批准同意。排除标准：①哺乳期或妊娠期妇女；②严重精神异常或意识障碍者；③合并心肝肾功能病变或恶性肿瘤者。
1.2方法
1.2.1标本采集
按照常规方法，对患者的新鲜粪便进行采集，放置在洁净、干燥且有盖的容器中，需要注意的是，避免混入水或尿液等杂质。
1.2.2检验方法
1.2.2.1培养法：在Cary-Blair保存液中放入粪便样本0.5g，加入生理盐水4.5ml均匀混合，放置在16°C条件下进行培养。经过18h的培养后，在CIN平板上放置5μl标本进行接种处理，完成接种后，在24°C条件下进行24h培养，需要注意的是，要对可疑菌落进行初筛和培养，并且完成筛选后，与标准菌落进行对比。
1.2.2.2RT-PCR法：在16°C条件下放置粪便样本进行18h以上培养，取200μl标本提取DNA，同时扩增产物，设置反应温度为95°C，扩增长度一般为154bp，并且设置对照组，对反应前后的荧光差值进行衡量。
1.3观察指标
对两种方法检出小肠结肠炎耶尔森菌的阳性率进行观察和记录，并且比较小肠结肠炎耶尔森菌阴性与阳性患者的特征，包括肠外并发症、阑尾炎、胃肠炎、男性、女性、成人以及儿童等。
1.4统计学分析
本次数据采用SPSS18.0软件分析，其中计数资料由百分率（%）表示，组间对比行X2检验，以P<0.05表示有差异。
2.结果
2.1两种方法的阳性检出情况比较
所有患者均顺利完成检验，相比较培养法而言，RT-PCR法的阳性率较高，对比有明显差异（P<0.05），见表1。
表1 两种方法阳性检出率对比
2.2小肠结肠炎耶尔森菌阴性与阳性患者特征对比
10例阳性患者中，儿童占有较高的比例，主要为阑尾炎、胃肠炎，并且大部分患者出现肠外并发症，见表2。
表2 阳性与阴性患者特征比较[n（%）]
3.讨论
通常情况下，患者感染小肠结肠炎耶尔森菌后，可以表现为两种类型，分别是胃肠型和肠道外感染型，其中肠道外感染包括脑膜炎、自身免疫性疾病、肝脾疾病以及关节炎等，而胃肠型则包括恶心、呕吐、腹泻以及腹痛等，人类往往通过进食被污染的水或猪肉等获得感染，严重的情况下，还可能导致院内感染，具有较大的危害性[2]。当前在检验小肠结肠炎耶尔森菌时，培养法是常用的一种方法，虽然操作简单，能够使肉眼判断的主观性和难度减少，但是耗费时间长，容易延误治疗时机[3]。而与培养法相比，RT-PCR不仅具有耗时短、操作简单的优点，能够使污染因素减少，并且还能对检测结果进行定量分析，对患者的疾病感染情况进行了解，使诊断准确率提高[4]。同时，本次研究发现，大部分患者为儿童，这一结果与郑浩轩[5]等研究报道一致，其原因可能与儿童年龄较小，其卫生和饮食习惯不良，从而增加了粪口传播感染的风险有关。
综上所述，在腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验中，通过运用RT-PCR法，不仅可以使阳性检出率提高，还能准确判断患者病情，为制定针对性治疗方案提供有效依据，具有一定的推广价值。
参考文献：
[1]周东梅.RT-PCR法应用于50例小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值[J].延边大学医学学报,2018(02):142-143.
[2]杨飞.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果分析[J].中国医药指南,2018,16(01):131-132.
[3]张凤,丁业荣,高大维,徐鹏鹏,张丽梅,范玉珍.腹泻病人标本分离小肠结肠炎耶尔森菌及其病原学研究[J].中国卫生检验杂志,2015,25(16):2693-2696.
[4]周旭.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果分析[J].中国医药指南,2014,12(14):102-103.
[5]郑浩轩,张明军,孙勇,姜泊.实时定量聚合酶链反应检测腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的研究与评价[J].中华医学杂志,2016(32):2281-2284.
论文作者:谭君
论文发表刊物: 《医师在线》2018年9月18期
论文发表时间:2019/3/17
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