戚玉杨 吴光启 刘红 张飞 吕芳
(南京鼓楼医院集团宿迁市人民医院血液科 江苏 宿迁 223800)
【摘要】 目的：探讨染色体检测在骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes MDS）分型及预后中的意义。方法：分析37例骨髓增生异常综合征患者的染色体核型与疾病分型、免疫表型、国际预后积分的关系。采用直接免疫荧光标记法标记经流式细胞仪测定，依据MDS的WHO分型方案、染色体核型以及系统（IPSS）将MDS患者划分为RA/RARS/RCMD 组、RAEB I/RAEBII组；染色体良好组、染色体不良组；中危I组、中危II组、高危组。结果：①染色体良好组，RA/RARS/RCMD14例，RAEBI/RAEBII 8例；染色体不良组中，RA/RARS/RCMD 4例，RAEBI/RAEBII 11例。②染色体良好组：部分患者CD34、CD117表达阳性；染色体不良组中，所有患者CD34、CD117均表达阳性，并且CD34、CD117的阳性表达率均较染色体良好组高。③ 染色体良好组平均国际预后积分较染色体不良组低。结论：染色体核型检测有助于MDS 的分型、预后判断。
【关键词】 染色体；骨髓增生异常综合征
【中图分类号】R394 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）28-0028-02
Expression and significance of CD34，CD117 on bone marrow mononuclear cells of myelodysplastic syndromes
Qi Yuyang, Wu Guangqi, Liu Hong, Zhang Fei, Lv Fang. Nanjing gulou Hospital Group, Suqian People's Hospital, Jiangsu Province, Suqian 223800, China
【Abstract】Objective To explore the expression and significance of CD34，CD117 on bone marrow mononuclear cells of myelodysplastic syndromes（MDS）. Methods Direct immunofluorescence staining were used by means of Flow cytometry. 37patients with MDS were divided into RA/RARS/RCMD subgroup，RAEB I/RAEB II subgroup；favorable chromosomal subgroup，poor chromosomal subgroup； intermediate-risk I subgroup，intermediate-risk II subgroup，high-risk subgroup respectively according to World Health Organization classification, cytogenetic abnormalities and International Prognostic Scoring System （IPSS）. Results ① CD34 and CD117 were positive respectively in 11of 19 patients with RA/RARS/RCMD, all cases in RAEB I/RAEB II expressed CD34 and CD117; increased expression of CD34 and CD117 was MDS grade-related. ②favorable chromosomal subgroup, 14/22 patients were positive for CD34，CD117，all cases in poor chromosomes expressed CD34 and CD117; there was a direct relationship between phenotytic density and poor cytogenetic risk factor. ③CD34 and CD117 expression was present respectively in intermediate-risk I（9/17patients）, intermediate-risk II（11/11）and high-risk subgroup（9/9）; the phenotypic intensity also was correlated with IPSS scores. Conclusions Detection of CD34，CD117 may be a useful tool for subtyping and predicting the prognosis of MDS.
【Key words】Myelodysplastic; Syndromes;CD34; CD117
研究表明骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）患者骨髓细胞免疫表型在整个疾病过程中呈现出紊乱及异常表达,其中某些抗原分子的表达对疾病诊断、分型、预后具有重要价值。我们对MDS患者骨髓单个核细胞CD34、CD117的表达进行了初步探讨，现报道如下：
1.病例与方法
1.1 一般资料
37例患者均为我科2005年11月-2015年01月初诊的MDS患者，男29例，女8例，发病时平均年龄49.6（18-79）岁, 所有患者均符合MDS 的WHO方案诊断标准[1]，并据此分为RA/RARS/RCMD 组、RAEBI/RAEBII组。
1.2 方法
1.2.1染色体检测：取肝素抗凝骨髓5ml,采用直接法、24小时培养法和同步法制备染色体，采用R带或G带技术显带，描述核型。依据IPSS 预后积分标准，将MDS患者染色体核型区分如下：（1）染色体良好组 ，包括正常核型、-Y、5q-、20q-, （2）染色体不良核型组，包括复杂异常（≥3种异常）、7号染色体异常，（3）染色体中间核型组，除上述两类以外的其它核型异常。
1.2.2抗原检测：取肝素抗凝骨髓2-3ml,常规分离单个核细胞，采用单标或双标直接免疫荧光标记法标记细胞表面分化抗原，运用三色流式细胞仪做活细胞荧光检测,阳性病例的判断标准：抗原阳性细胞≧20%。
1.2.3 IPSS预后积分及危险度分组[2]：依据骨髓原始细胞百分比、骨髓 造血细胞染色体核型和外周血细胞减少系列数进行积分，危险度分组：低危：0分，中危I：0.5-1分，中危II：1.5-2.0分，高危：≥2.5分。
1.3 统计学处理
所有统计数据利用SPSS 12软件完成，阳性表达率以均数±标准差表示（x-±s），样本间的表达及阳性表达率差异的比较分别采用Fisher确切概率法、秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 染色体良好组RA/RARS/RCMD16例，RAEB I/RAEB II 7例；染色体不良组RA/RARS/RCMD4例，RAEB I/RAEB II 12例。疾病不同亚型在两组之间出现的比例差异具有显著性（P﹤0.05）。
2.2 染色体良好组15例（15/23）患者CD34表达阳性，14例（14/23）患者CD117表达阳性，CD34阳性表达率48.79±23.37%（20%～85%），CD117阳性表达率52.89±26.88%（20%～96%）；染色体不良组所有患者CD34、CD117均表达阳性，CD34阳性表达率 75.31±16.68%（52%～94%），CD117阳性表达率72.01±17.45%（44.1%～96%）。染色体良好组CD34、CD117阳性表达及阳性表达率均较染色体不良组低（P均﹤0.05）。
2.3 染色体良好组无高危患者，平均IPSS预后积分0.89。所有高危患者均在染色体不良组，平均IPSS预后积分2.5。染色体良好组平均IPSS预后积分低于染色体不良组。（P﹤0.05）
3.讨论
有关MDS患者骨髓单个核细胞的免疫表型研究，目前认为免疫表型异常不仅与MDS 的形态学诊断、FAB分型具有良好一致性，而且随着疾病恶性程度的进展,一些特定细胞表面抗原的表达范围及强度亦随之改变[3]。Pirruccello等[4]发现MDS不同亚型间骨髓单个核细胞CD34、CD117表达存在明显差异，其中RA/RCMD亚型约50%存在表达，而RAEB则100%存在异常表达；在CD34、CD117表达出现由弱到强变化的同时，往往伴随着异常遗传学的出现、疾病由RA/RCMD向RAEB的进展、IPSS 预后积分的递增，因此作者提出CD34、CD117表达与否、表达强度高低代表疾病的不同阶段，与疾病进展预后相关，Ogata等[5]的报道与之类似。
我们在对37例MDS患者的骨髓单个核细胞CD34、CD117表达进行分析后发现，CD34、CD117在MDS各亚型、不同染色体核型、预后积分分组间存在明显差异，即随着疾病由RA/RARS/RCMD向RAEB进展，CD34、CD117表达及阳性表达率差异亦出现由低到高的变化，并且这一改变与患者的染色体核型异常、IPSS积分等预后指标相关，CD34、CD117阳性表达率高，提示疾病预后不良。基于上述分析，我们认为了解MDS患者的CD34、CD117表达异常有助于疾病分型、判断预后，对决定临床治疗方案具有重要意义。
本文采用流式细胞仪对CD34、CD117在MDS的不同亚型、染色体核型、IPSS预后积分分组等方面的表达进行了初步分析，然由于本组病例数较少，未能区分出CD34、CD117在染色体中间组、IPSS低危组的表达，进一步扩大病例数的临床研究可能会得到结果。
【参考文献】
[1]Bennett JM. World Health Organization classification of the acute leukemias and myelodysplastic syndrome.[J] Int J Hematol, 2000,72(2):131-133.
[2]Greenberg P,Cox C,LeBeau MM,et al.International scoring system for evaluating prognosis in myelodysplastic syndromes[J]. Blood. 1997;89(6):2079-2088.
[3]Maynadie M,Picard F, Husson B,et al.Immunophenotypic clustering of myelodysplastic syndromes[J].Blood,2002, 100(17): 2349-2356.
[4]Pirruccello SJ, Young KH,Aoun P.Myeloblast phenotypic changes in myelodysplasia.CD34 and CD117 expression abnormalities are common[J].Am J Clin Pathol. 2006 Jun;125(6):884-94.
[5]Ogata K, Nakamura K, Yokose N, et al. Clinical significance of phenotypic features of blasts in patients with myelodysplastic syndromes [J]. Blood, 2002, 100(12): 3887- 3896.
论文作者:戚玉杨,吴光启,刘红,张飞,吕芳
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第28期供稿
论文发表时间:2015/11/27
标签：染色体论文; 核型论文; 阳性论文; 患者论文; 骨髓论文; 细胞论文; 异常论文; 《医药前沿》2015年第28期供稿论文;