【摘要】目的：探讨化学发光法检测乙肝病毒血清标志物与荧光定量PCR检测HBV-DNA结果的相关性。方法：采用化学发光法检测732例患者乙肝病毒的血清标志物（HBV-M）,同时用荧光定量PCR检测其HBV-DNA的含量，观察分析检测结果的相关性。结果：HBsAg（+）、HBeAg（+）、HBcAb（+）组血清HBV-DNA检出率为67.4%，平均含量2.49E+07IU/ml；HBsAg（+）、HBeAb（+）、HBcAb（+）组血清HBV-DNA检出率为52.1%，平均含量5.15E+06IU/ml；HBsAg（+）、HBcAb（+）组血清HBV-DNA检出率为10.8%，平均含量1.32E+04IU/ml。结论：HBV-DNA水平和HBVM的表现模式存在关联，大三阳患者的标本HBV-DNA值较小三阳组与HBsAg（+）、HBcAb（+）组的标本更高，说明HBeAg（+）与HBV-DNA含量密切相关，HBeAb（+）、HBcAb（+）乙肝病毒复制并非完全停止，只是其复制水平明显降低。荧光定量PCR检测HBV-DNA含量可表达HBV感染和病毒复制水平。
【关键词】乙肝血清标志物HBV-DNA乙肝
【中图分类号】R512.6+2 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）14-0061-01
我国属乙型病毒性肝炎（乙肝）高流行区，一般人群HBsAg阳性率为7.2%[1]。乙肝病毒血清标志物（HBV-M）检测是目前诊断乙型肝炎最常用的指标，但不能直接反应HBV在患者体内的复制情况，也不能作为判断患者是否具有传染性的直接证据。荧光定量PCR检测HBV-DNA是目前衡量乙肝感染性的最精确的指标[2]，也是指导临床用药的最佳依据。为了探讨乙肝两对半与HBV-DNA两者之间的关系，本文对732例患者检测结果进行分析。
1.材料与方法
1.1 标本来源
732例标本来自2017年3月—2017年4月来我院就诊检测HBV-M，并同时做HBV-DNA检测的患者。其中男568例，女164例，年龄20～85周岁，平均55.3岁。
1.2 仪器与试剂
所用仪器有科华DP1000核酸提取仪，ABI7500核酸扩增仪，雅培i2000SR。HBV-DNA定量检测试剂盒由上海科华生物工程有限公司提供。HBV血清5项标志物检测（免疫发光法）使用雅培原装试剂。
1.3 方法
HBV-M采用化学发光微粒子免疫检测法，HBV-DNA采用磁珠/PCR-荧光探针法，所有步骤严格按照试剂和仪器说明书操作。
1.4 统计学
处理数据采用SPSS21.0统计学软件进行处理。HBV-DNA含量正常参考值<50IU/ml，≥50IU/ml判断为阳性。
2.结果
732例患者根据HBV-M结果分为9组。大三阳病人HBV-DNA的检出率为67.4%，小三阳病人的HBV-DNA检出率为52.1%，明显高于其他组（见表）。
表 各HBV-M表现模式及其HBV-DNA定量结果
3.讨论
HBV感染病原学诊断现多采用化学发光法检测血清标本中的HBV抗原及抗体，该法简单易行，能基本满足临床诊断需要，但由于个体反应的差异，不同的人在感染HBV后会出现不同的免疫应答，从而得到不同的乙肝血清标志物模式。乙肝血清标志物模式不能直接反映患者体内病毒的复制水平及传染程度，不能提示其与乙型肝炎的发生和发展过程之间的联系，特别是在要求准确判断血清有无感染的情况，如：器官移植、怀孕、输血、医务人员的锐器伤等，其检测结果难以达到要求。而我国是乙型肝炎的高发地区，早发现早治疗是控制我国乙肝病毒传染的最好办法。此次研究通过分析乙肝患者血清HBV-M和HBV-DNA含量的关系，有利于我们发现乙肝血清标志物和病毒含量的关系。
此次研究通过对732例乙肝患者血清标本同步进行HBV-M检测后进行分组，然后对各组进行HBV-DNA含量检测，共检测出HBV-DNA阳性标本268例，总检出率为36.6%。其中有132例“大三阳”标本，其HBV-DNA阳性检出率为67.4%，平均HBV-DNA含量为2.49E+07IU/ml，明显高于其他组；HBeAg(+)组的HBV-DNA检出率和HBV-DNA的含量明显高于HBeAg(-)组，显示HBV复制与HBeAg存在明显关系[3]，也可认为HBeAg(+)是HBV高度传染性的指标，应引起医师和患者的高度重视。但乙肝患者HBeAg(+)病例有部分HBV-DNA为阴性，这可能是HBV基因的S区发生有意义的点突变、插入或缺失突变[4]，也可能是患者体内HBV-DNA的复制水平已经很低，在此之前表达的HBeAg尚未完全降解，仍然处于较低的水平。在“小三阳”患者中，HBV-DNA阳性检出率为52.1%，平均HBV-DNA含量为5.15E+06IU/ml，这一结果表明HBeAg转阴，仍有部分患者存在HBV活动性复制，这可能与HBV发生前C区基因突变或机体发生特异性免疫耐受有关，这一突变阻止了前C区序列的表达，因而妨碍了HBeAg的分泌，但病毒本身复制不受影响，造成了HBeAg（-）的HBV感染，而C基因的变异区段基本上都是T、B识别的抗原显性表位，因而能影响宿主清除体内的HBV。HBsAg（+）、HBcAb（+）组HBV-DNA阳性率10.8%，HBV-DNA平均含量为1.32E+04IU/ml，提示该组病毒复制情况不容忽视。
本文的研究结果显示，患者血清HBV-DNA的阳性率与HBV-M存在的状态相关。因而联合应用HBV-M和HBV-DNA定量检测有助于乙肝的早期诊断、疗效检测和预后判断。
【参考文献】
[1]倪语星，尚红.临床微生物学检验[M].第五版.北京：人民卫生出版社，2012：358.
[2]钱东林.乙型HBVDNA荧光定量检测与血清标志物结果相关性[J].临床合理用药，2009，2(24)：13-14.
[3]张代春.乙型肝炎病毒血清学标志物与乙肝DNA相关性探讨[J].临床和实验医学杂志，2008，7（11）：82-83.
[4]何印蕾.乙肝患者血清前S1抗原检测及临床价值[J].右江医学，2005，33(2)：154-155.
论文作者:陈思佳
论文发表刊物:《心理医生》2017年14期
论文发表时间:2017/8/7
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