关键词：CAF细胞、药效对比、诱导细胞凋亡、MPSSS、GQP、lentinan
一、背景介绍和治疗思路原理
CAF细胞：促进癌变细胞生长的成纤维细胞，有助于癌细胞发生、生长、血管形成。还会产生一些细胞因子抑制肿瘤的免疫应答。在文献《Awaking immunity》中也提到，成纤维细胞的去除不改变肿瘤浸润性T细胞数量或亚型，而确实可以导致干扰素（IFN-）和肿瘤坏死因子的激活和分泌，可见该细胞的作用原理。
香菇多糖：香菇的主要有效成分，是一种宿主免疫增强剂，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等作用，通过抑制精氨酸酶活性和通过激活p38和ERK的去磷酸化来抑制精氨酸酶活性和TNFR2的表达而诱导MSC2细胞的分化并损害其免疫抑制功能，作用于CAF细胞就显示为抑制CAF细胞介导的免疫抑制。
枸杞多糖：一种生物活性物质，具有促进T、B、CTL、NK和巨噬细胞等免疫功能，促进IL-2、IL-3和TNFβ等细胞因子产生，有调节免疫、延缓衰老多种功效，可制药。
治疗思路原理：利用有效药物（如上述香菇多糖）损害CAF细胞的免疫抑制功能，处理后的CAF功能减弱，免疫应答便可以正常进行，肿瘤细胞可被自身免疫系统清除，即免疫激活，由此达到肿瘤治疗的目的。
二、实验设计和目的
实验目的：在了解香菇多糖治疗肿瘤的原理和相关背景知识的情况下，进行实验对比三种多糖，分别是lentinan、MPSSS、GQP，对CAF细胞的作用以及对正常免疫细胞的伤害程度，并综合分析三者药效，进行进一步的讨论。
实验设计：
1. 材料与仪器：lentinan、MPSSS、GQP、CAF细胞悬液、MTT染料、酶联免疫检测仪、流式细胞仪、12孔板、96孔板、三联药物、PBS缓冲液、DMEM、RPMI-1640培养基、胰酶。
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2. 实验方法
1）细胞提取及培养，提取、培养小鼠脾细胞及骨髓细胞。2）CAF细胞培养3）MTT实验
4）凋亡检测实验
三、结果及分析结论
结果
1. 小鼠脾细胞MTT检测结果
Lentinan作用组的脾细胞检测结果明显低于对照组和另外两组实验结果，GQP与对照组持平，MPSSS作用的脾细胞检测结果高于对照组和GQP作用组。说明Lentinan 杀死了大量脾细胞；MPSSS、GQP并无明显抑制作用;MPSSS一定程度促进脾细胞的生长,GPQ无明显促进作用。
2. 小鼠骨髓细胞MTT检测结果
Lentinan作用组的骨髓细胞检测结果明显低于对照组和另外两组实验结果，MPSSS与对照组持平，GQP作用的骨髓细胞检测结果高于对照组和MPSSS作用组。说明Lentinan 杀死了大量骨髓细胞；MPSSS、GQP无明显抑制作用；GQP有一定促进骨髓细胞生长的作用,MPSSS无明显促进作用。
3. CAF细胞凋亡检测实验结果
lentinan作用的结果显示CAF细胞早期凋亡较其他两种多糖处理组与对照组明显增多。GQP、MPSSS作用组的CAF细胞早期凋亡并不突出。说明lentinan有明显杀死CAF的药效，疗效显著；MPSSS有一定药效，并不显著。枸杞有一定药效，与MPSSS效果相仿，疗效不显著。
分析结论
根据实验结果分析，Lentinan具有良好的诱导CAF细胞凋亡的能力，药效显著，但同时对免疫细胞也有较强的损害作用。MPSSS、GQP诱导CAF细胞凋亡的作用均远低于lentinan，但仍具有一定药效，且对免疫细胞没有强烈杀伤作用，还具有一定的促进生长的作用。但究竟哪种多糖是相对而言最佳药剂，还要进行进一步研究、实验和统计学分析。
四、讨论
思考一：MPSSS和GQP并没有强烈诱导CAF细胞凋亡的效应，猜测MPSSS、GQP可能让CAF细胞功能改变，失去免疫抑制效应从而促进免疫应答，益于肿瘤免疫治疗。但该猜测需要进一步做实验验证与分析。
思考二：经查询，关于研究GQP是否抑制CAF细胞的文献较少，此文章里的数据可作为参考。
参考文献
[1]《MPSSS impairs the immunosuppressive function of cancer-associated fibroblasts via the TLR4-NF-κB pathway》PMID: 30992392 PMCID: PMC6509060 DOI: 10.1042/BSR20182171
[2]《Awakening immunity》DOI：10.1126 / science.1198345
论文作者:周烜
论文发表刊物:《中国医学人文》2019年11期
论文发表时间:2019/12/4
标签：细胞论文; 免疫论文; 作用论文; 多糖论文; 肿瘤论文; 药效论文; 抑制论文; 《中国医学人文》2019年11期论文;