祝凯捷 孟宪军
(徐州市红十字中心血站 江苏 徐州 221006)
【摘要】 目的：分析无偿献血者HIV抗体阳性率并进行流调，为严防输血传播HIV提供有效措施。方法：标本检测采用ELISA法，选择两种不同厂家HIV抗体诊断试剂，有反应性标本送检市CDC艾滋病确认实验室进行确认。结果：2010～2014年度共检测433204份标本，其中有反应性标本435份，经确认46例均为HIV-1抗体阳性，其阳性率为万分之1.06。46例病毒感染者男性占44例，40%来至于2次以上自愿的固定的无偿献血者队伍，从学生、职员、工人、农民等职业中均有感染，以性传播为主。结论：无偿献血者中有HIV感染者，用ELISA法检测存在一定假阳性,需进一步提高诊断试剂性能质量，严格筛查；加强艾滋病感染者流调分析，有针对性的采取干预措施，减少艾滋病输血传播，确保血液安全。
【关键词】 无偿献血人群；HIV抗体；流调；ELISA法；WB法
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）20-0358-03
近年来随着艾滋病知识广泛宣传普及，特别是对传播途径宣传力度加大，人人对艾滋病知识有了较深的认识。其中通过血液传播如污染针头、输血（指输含有HIV血液）等是传播途径之一，因此每个献血者在献血前要自觉对照献血标准进行自我排除，不符合献血标准的能主动退出，从低危人群中募集血源，现将近五年来无偿献血者HIV抗体检测结果报告如下。
1.材料与方法
1.1 标本来源
检测标本为我市无偿献血者，2010～2014年度 共计433204份，各年度标本数量见表1。
1.2 试剂
1.2.1筛查试剂：血站艾滋病筛查实验室选用两种国产试剂，生产厂家分别用A、B表示。HIV-1/2抗体均采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）。确认实验室使用复检试剂：荷兰生物梅里埃中国有限公司生产的第三代HIV-1/2抗体诊断试剂盒（Vironostika HIV UniForm Ⅱ Plus O）。
1.2.2确认试剂：MP生物医学亚太有限公司生产的HIV-1/2型抗体免疫印迹诊断试剂盒（Genelabs HIV BLOT 2.2），上述试剂均经国家食品药品监督管理局注册批准，批批检合格，并在有效期内使用。
1.3 检测程序与判断标准
1.3.1检测程序
1.3.1.1血站艾滋病筛查实验室：严格按照卫生部血站基本标准选择两种不同的试剂，采用 MicroLab FAME24/20型全自动酶免分析仪进行检测[1]，每份标本均严格按照试剂说明书进行初检和复检并由不同人操作，初、复检只要有一/两家试剂HIV抗体有反应性或可疑者均用原试剂再进行重复检测，即做双孔复测，如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，则报告HIV抗体待复查，该血液作不合格处理。对有反应性标本均送检市CDC艾滋病确认实验室进行确认。
1.3.1.2确认实验室：初筛选用法国生物梅里埃HIV-1/2抗体诊断试剂盒，有反应性或可疑样本，则进行确认试验，即免疫印迹试验（WB法）[2、3]。
1.3.2判断标准[2]
确认实验结果判定：WB试验结果判定原则是依据《全国艾滋病检测技术规范》（2009年修订版）结合试剂盒说明书的要求综合判定。
1.3.2.1 HIV-1抗体阳性
同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性：①至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现，或至少1条env带和p24带同时出现；②符合试剂盒提供的阳性判定标准。
1.3.2.2 HIV-2抗体阳性
同时符合以下二条标准，即出现至少2条env带（gp36和gp140/ gp105），和试剂盒提供的阳性判定标准，可判为HIV-2抗体阳性。
1.3.2.3 HIV抗体不确定
出现HIV抗体特异带，但不足以判定阳性。报告HIV抗体不确定（±），对抗体不确定4周后复检。
1.3.2.4 HIV抗体阴性
无HIV抗体特异带出现。
1.4 主要仪器
TECAN RSP/8全自动加样器（瑞士）；STAR全自动加样器（瑞士），MicroLab FAME24/20型全自动酶免分析仪（瑞士），均经过定期维护和校验，全自动蛋白印迹仪（美国medTEC），生物安全柜Hfsafe-1200(上海)。
2.结果
2.1 2010～2014年度共检测433204份标本，筛查HIV抗体有反应性标本435份，HIV抗体待复查率为1.00‰。其中A试剂221份，B 试剂278份，两种筛查试剂均呈反应性标本70份，两种试剂检测结果一致性为14.71％[（221+278-435）/435]，两种试剂检测HIV抗体结果见表1。
2.3 46例艾滋病感染者流调结果见表3。
3.讨论
结果表明，2010至2014年度HIV感染者总阳性率为万分之1.06（46/433204），与南京市献血人群HIV感染者接近，阳性率0.01%[4]，低于一般人群阳性率0.03%[5]，抗体不确定3例，过4周后经复检均阴性。从10至12年度确证HIV感染者逐年增加,13年度虽有所下降，可能存在偶然性，总的趋势来说是增加的，结果见表2。无偿献血者中有HIV感染者，因此应严格按照卫生部献血者健康检查要求加强体检，从源头做起。不安全的血液会危害患者的生命与健康，具有高危行为的献血者不应献血，如静脉药瘾史、男男性行为或具有经血传播疾病（艾滋病、丙型肝炎、乙型肝炎、梅毒等）风险的。具有高危行为者故意献血的，献血者捐献具有传染性的血液会给受血者带来危险的，应承担对受血者的道德责任。根据《中华人民共和国传染病防治法》第77条、《艾滋病防治条例》第38条和第62条规定，高危献血者故意献血，造成传染病传播、流行的，依法承担民事责任；构成犯罪的，依法追究刑事责任[6]。体检人员应加强对献血者的问诊和体检并告知献血者，特别是对有不良行为献血者（如静注吸毒人群IVDU、商业性行为者CWN）要有一定洞察力，使每个献血者自觉对照献血标准进行自我排除，主动退出献血，劝阻有高危行为者献血，从而确保血源来自于低危或无危行为献血人群（Low or no risk blood donors），减少输血潜在传播的风险，保证用血安全。从表1结果可以看出，国产HIV抗体酶联免疫诊断试剂存在差异,10～14年度试剂A共检测出HIV抗体待复查221例，试剂B检测出278例，合计检测出435例，不合格率为1.00‰，两种筛查试剂都呈反应性标本70例，确认阳性46例，这46例中两种筛查试剂都具有反应性，S/CO值为6.21～71.09，国产试剂特异性(specificity)、总符合率(efficiency)等存在差异，尽管目前HIV感染诊断的金标准是抗体检测，但也存在假阳性过高现象[7]。因此严格按照卫生部标准选择特异性强、敏感性高的初、复检试剂，从而避免出现假阳性，同时减少假阴性结果的出现。
在46例确认艾滋病感染者均为HIV-1抗体阳性，其中3例合并HCV抗体阳性，3例合并TP抗体阳性，表明艾滋病病毒的感染和丙肝病毒、梅毒的感染存在着一定的联系[8]。合并丙肝抗体阳性一是由于IVDU共用注射器，经过血液传播，有报道吸毒人群丙肝抗体显著高于其他高危人群（如同性恋者、多个性伴侣者等），因为丙肝传播途径主要通过血液传播。二是可能由于机体感染艾滋病病毒后会造成机体免疫缺陷，主要侵犯CD4+ T淋巴细胞，造成机体抗感染能力下降，很容易造成丙肝病毒的机会感染,有报道[9]丙型肝炎特异性T细胞免疫反应障碍与HIV病毒共感染者体内丙型肝炎病毒的复发有关, 因此艾滋病病毒携带者已成为丙肝病毒感染的易感人群。而梅毒感染和艾滋病病毒感染有着相同的传播途径，均通过性传播感染，同时阳性也就不言而喻。上述结论对于我们日常血液筛查工作有一定的借鉴作用，可以相互印证。46例艾滋病感染者男性44例，占95.65%；年龄18～30岁35例，占76.00%；学历中高中～专科33例，占72.00%；未婚中居多；从学生、公司职员、工人、农民、个体等职业中均有感染；首次献血者居多占60.00%,2次以上献血占40.00%；传播途径以性传播为主，占87.00%。这些数据表明了献血人群中艾滋病病毒感染以18～30岁年轻人为主，男性远远高于女性，文化水平高中、中专居多，已经从城市蔓延到农村，从高危人群向一般人群扩散，性传播是主要的传播途径，包括同性和异性传播，多次献血者血液仍存在很大的风险。因此应加强艾滋病知识宣传和教育，特别对农民、学生，年轻人，中等文化水平的人群等，提高艾滋病防治知识知晓率，是预防和控制艾滋病向一般人群扩散的关键措施。
值得关注的是在HIV感染者中，40%来自于2次以上自愿的固定的无偿献血者队伍，因此应科学管理血源，从低危人群中募集血源，加强问诊，加强检测；进一步提高诊断试剂性能质量，选择敏感性高、特异性好的诊断试剂；加强艾滋病感染者流调分析，有针对性的采取干预措施；了解与一些疾病的相互关联等，规范操作，加强质量控制和管理，才能最大限度地提高检验质量，进而确保血液质量，减少艾滋病的输血传播。
【参考文献】
[1] Matter L,Germann D.Detetion of human immunodeficiency virus type 1 antibodies by a new automated microparticle enzyme immunoassay for HIV types 1 and 2.J Clin.Microbiol,1995,33:2338.
[2] 全国艾滋病检测技术规范 National Guideline for Detection of HIV/AIDS (2009年修订版）.2009.09.
[3] Weber B,Hess G,Enzensberger R,et al.Multicenter evalution of the novel ABN western blot (immunoblot) system in comparison with an enzyme-linked immunosorbent assay and a different western blot.J Clin. Microbiol,1992,30:691.
[4] 吴蕾，何成涛，马贵明.2006-2011年南京市无偿献血者HIV感染的调查分析[J].中国医药导报，2012，9（23）：114-115.
[5] 雷娜，彭志行，还锡萍等.江苏省AIDS疫情估计和预测分析研究[J].中华预防医学杂志，2010，44（11）：1012-1017.
[6] 献血者健康检查要求.中华人民共和国国家标准.GB 18467-2011.
[7] 秦国天.用非特异性反应标本选择抗-HIV试剂. 中国输血杂志，2005，18（3）：229.
[8] 余桂华，刘琼芬，张要全等.HIV感染献血者并发感染HBV、HCV及梅毒调查分析[J].临床血液学杂志，2014，27（4）：331-332.
[9] Kim AY,Schulze zur Wiesch J,Kuntzen T,Timm J,Kaufmann DE,et al.(2006)Impaired hepatitis C virus-specific T cell responses and recurrent hepatitis C virus in HIV coinfection.PloS Med,3(12):e492 doi:10.1371/journal.pmed.0030492. http://www.qiji.cn/eprint/abs/3350.html.
论文作者:祝凯捷,孟宪军
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第20期供稿
论文发表时间:2015/10/9
标签：抗体论文; 试剂论文; 阳性论文; 标本论文; 献血者论文; 艾滋病论文; 两种论文; 《医药前沿》2015年第20期供稿论文;