（湖南省浏阳市人民医院 410300）
摘要：目的 对宫颈内皮瘤变诊断中p16、Ki-67的应用价值进行探讨。方法 选择我院2017年6月至2018年5月间收治的宫颈上皮瘤变患者90例作为实验组研究对象，其中包括CINⅠ30例、CINⅡ30例、CINⅢ30例，选择同期于我院健康体检者30例作为常规组研究对象，应用免疫组化技术测定并比较宫颈组织中p16、Ki-67表达。结果 实验组患者宫颈上皮内瘤变组织p16、Ki-67阳性率均显著高于常规组（P<0.05）。同时随着宫颈上皮内瘤变等级增加p16、Ki-67逐渐上升，不同等级见差异显著（P<0.05）。结论 p16、Ki-67表达和宫颈上皮瘤变发生、发展存在密切关系，依据两者联合检测结果可进行CIN分级。
关键词：p16；Ki-67；宫颈上皮瘤变；免疫组化
[Abstract] objective：to explore the application value of p16 and ki-67 in the diagnosis of cervical endothelial neoplasia.Methods：from June 2017 to May 2018 treated 90 patients with cervical epithelial neoplasia as experimental subjects，including CIN Ⅰ 30 cases，CIN Ⅱ 30 cases，CIN Ⅲ 30 cases，choose the same period in our hospital as a regular group of 30 cases of healthy physical examination were the research object，the application of immunohistochemical technique to determine and compare the expression of p16 and Ki - 67 in the cervical tissue.Results：the positive rate of p16 and ki-67 in the cervical intraepithelial neoplasia of the experimental group was significantly higher than that of the conventional group（P<0.05）.At the same time，p16 and ki-67 gradually increased with the increase of the grade of cervical intraepithelial neoplasia（P<0.05）.Conclusion：the expression of p16 and ki-67 is closely related to the occurrence and development of cervical epithelial neoplasia.
[Keywords] p16；Ki - 67.Cervical epithelial neoplasia；immunohistochemical
宫颈上皮瘤变是指正常子宫经磷状上皮发展为癌的过程，为临床常见疾病，会严重影响患者健康和生活质量，并威胁患者生命安全。临床中为降低宫颈癌变，需要对宫颈上皮瘤变积极开展诊断和治疗。p16、Ki-67为客观癌基因，可作用宫颈上皮瘤变的生物学标志，其能够直接作用于细胞周期，参与细胞增殖、分类、肿瘤生成[1]。为进一步明确宫颈上皮内瘤变诊断中p16、Ki-67的意义，本研究选择我院收治的宫颈上皮内瘤变患者90例及正常宫颈组织者30例作为观察研究对象，应用免疫组化技术为其测定p16、Ki-67，现报告如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选择我院2017年6月至2018年5月间收治的宫颈上皮内瘤变患者90例作为实验组对象，患者均经病理诊断、宫颈活检确诊为宫颈上皮内瘤变。患者年龄范围19~85岁，平均（46.7±3.2）岁；其中CINⅠ30例、CINⅡ30例、CINⅢ30例。选择同期于我院体检的正常宫颈组织（磷状上皮基本症状，轻微炎症）人群30例子作为常规组对象，年龄范围20~83岁，平均（46.5±3.4）岁。试剂包括Ki-67鼠抗人单克隆抗体、p16鼠抗人单克隆抗体、SP试剂盒。
1.2方法
为宫颈上皮内瘤变患者和正常宫颈组织者开展免疫组化测定。用10%甲醛固定所有标本组织，常规石蜡包埋并连续切片，行SP免疫组化染色、HE染色，在光镜下观察，操作严格依据SP试剂盒说明书进行，以已知阳性片为阳性对照，PBS代替一抗为阴性对照。
1.3判定标准
（1）p16阳性判定：p16在细胞质、细胞核中阳性表达，棕褐色、淡黄色、棕黄色颗粒为阳性信号。阴性（-）：阳性细胞数低于5%，单个细胞染色；弱阳性（+）：阳性细胞数5%~24%，散的细胞团染色；中度阳性（++）：阳性细胞数25%~50%，片状细胞染色；强阳性（+++）：阳性细胞数超过50%，弥散细胞染色。（2）Ki-67阳性判定：Ki-67在细胞核中阳性表达，光镜下高倍视野4区200个细胞，棕黄色颗粒（或细胞质、细胞核均为棕黄色）。阴性（-）：未着色；弱表达（+）：染色阳性细胞低于10%；中度阳性（++）：染色阳性细胞10%~30%；强阳性（+++）：染色阳性细胞超过30%。
1.4统计学处理
本次研究所得数据使用SPSS19.0统计学软件分析，计量资料行t检验，计数资料行χ2检验，P<0.05表示有统计学意义。
2结果
2.1 p16在两组宫颈组织中表达对比
实验组患者宫颈上皮内瘤变组织p16阳性率均显著高于常规组（P<0.05）。同时随着宫颈上皮内瘤变等级增加p16逐渐上升，不同等级间差异显著（P<0.05）。见表1。
3讨论
近年来我国宫颈癌发病率逐渐增加，该疾病由宫颈上皮内瘤变发展导致，所以对宫颈上皮内瘤变进行筛查，并在此基础上进行有效治疗，可降低宫颈癌的发生率。同时临床中会依据宫颈上皮内瘤变具体级别采用不同治疗方案，在很多主客观因素影响下，临床中经常产生片面或不准确诊断结果，这对于疾病治疗和预后是非常不利的，因此，需要对准确性高、安全有效的诊断方法进行探索[2]。
p16为多肿瘤抑制因子，存在于人染色体9p21中，能直接参与调控细胞周期素，对细胞形成进行抑制，最终实现对细胞增殖的有效控制[3]。临床研究显示，Ki-67、p16、p53蛋白表达和宫颈上皮内瘤变关系密切，上述三项指标会随着CIN级别上升而增加，在宫颈上皮内瘤变诊断和分级中，p16、Ki-67联合检测具有重要的临床价值。本研究中，实验组患者宫颈上皮内瘤变组织p16阳性率均显著高于常规组（P<0.05）。同时随着宫颈上皮内瘤变等级增加p16逐渐上升，不同等级间差异显著（P<0.05）。可见，p16蛋白阳性表达随着CIN级别升高而增加，这与已有研究[4]结果一致。
Ki-67为细胞增殖相关核抗原，表达于增殖其细胞的细胞核中，是反映细胞增殖活动的有效指标，并且是肿瘤细胞增殖的可靠标记。Ki-67广泛存在于人体增生细胞核中，肿瘤细胞增生活性能够通过其表达高低反映出来，并且肿瘤恶性程度越高表达越高。本研究中，实验组患者宫颈上皮内瘤变组织Ki-67阳性率均显著高于常规组（P<0.05）。同时随着宫颈上皮内瘤变等级增加Ki-67逐渐上升，不同等级间差异显著（P<0.05）。提示Ki-67阳性表达和CIN分级存在正相关关系，与已有研究[5]结论一致。
综上所述，p16、Ki-67表达和宫颈上皮瘤变发生、发展存在密切关系，依据两者联合检测结果可进行CIN分级。
参考文献
[1]汪勤，解正新，张卫琴.p16、p53和Ki-67蛋白在宫颈上皮内瘤变中的表达及意义[J].临床与实验病理学杂志，2013，29（5）：551-553.
[2]史健，郑军生，尹方.宫颈上皮内瘤变p16、p53、Ki-67的表达与高危型HPV感染及其临床意义[J].南方医科大学学报，2017，27（4）：515-517.
[3]张燕，王一，王建华.p16、Ki-67在440例宫颈病变中的表达及其病理诊断价值[J].诊断病理学杂志，2013，20（3）：171-175.
[4]田琦，盂刚.p16、ki-67在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变组织中的表达及临床意义[J].中国老年学杂志，2016，31（17）：3378-3379.
[5]刘彤，崔莉，许丽娟.p16、Ki-67蛋白表达及HPV检测在宫颈上皮内瘤变中的诊断意义[J].诊断病理学杂志，2017，16（5）：343-345.
论文作者:陈大礼 李曼妮
论文发表刊物:《航空军医》2018年14期
论文发表时间:2018/10/24
标签：宫颈论文; 阳性论文; 细胞论文; 实验组论文; 患者论文; 细胞核论文; 组织论文; 《航空军医》2018年14期论文;