（南护理职业学院 河南 安阳455000）
摘要：实验中经常需要对大鼠进行标记，1-9号的标记相对简单，单一染料即可。但在大鼠样本量较大的情况下，通常用两种不同颜色的染料对大鼠进行标记。本文中使用苦味酸溶液对样本量100内的大鼠进行标记，简单方便、辨识快捷，是一种经济有效的标记方法。
关键词：大鼠、染料、编号、标记
前言
大鼠属于哺乳纲，啮齿目，鼠科，大鼠属动物；为全年多发情性动物，繁殖力强；对外环境适应性强，成年鼠很少患病，易饲养；体型大小合适，给药容易；具有探索性，易训练，对惩罚和暗示反应敏捷；其生理及病理学特点研究广泛，因而在生物医学研究中占有重要地位。一般情况下，大鼠实验前需要标记编号分组，标记编号的方法很多，良好的标记编号方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用和辨识快捷的要求。目前常用的标记编号方法有染色法、耳孔法、烙印法、挂牌法等。此外还有针刺法、断趾编号法、剪尾编号法、被毛剪号法、笼子编号法等。通常采用染色法对大鼠进行标记编号。
染料涂染标记法在实验室最常用，很方便。染料一般有3-5%苦味酸溶液（黄），2%硝酸银溶液（咖啡色）和0.5%中性品红溶液（红色）等。标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液，在动物体的不同部位涂上斑点，以示不同号码。标记编号的原则是：先左后右，从上到下。一般把涂在左前肢上记为1号，左侧腹记为2号，左后肢记为3号，头顶记为4号，腰背部记为5号，尾基部记为6号，右前肢记为7号，右侧腰部记为8号，右后肢记为9号。若动物编号超过10或更大时，可使用上述两种不同颜色的溶液，把一种颜色作为个位数，另一种颜色作为十位数进行标记编号，最大标记至99号。但实验室通常只配备一种染料，遇到大鼠样本量较大时，单种染料无法满足标记编号需求。再者，两种染料所代表的个位数和十位数极易混淆，给实验人员辨识带来不便。因此，这里将介绍一种新的方法，使用单色染料——苦味酸溶液对99号以内的大鼠进行染色标记编号。
方法
1.苦味酸溶液的配制
苦味酸溶于乙醇，实验室一般用3%—5%苦味酸乙醇溶液，用于实验动物染色编号标记。取苦味酸3g置于100ml烧杯中，加入70%乙醇30ml，充分搅拌溶解，最后加入蒸馏水至100ml，既得3%苦味酸乙醇溶液。
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2.大鼠编号标记
大鼠1-9号和通常标记基本相同：苦味酸溶液涂斑点于大鼠左前肢记为1号，左侧腹记为2号，左后肢记为3号，头顶部记为4号，腰背部记为5号，臀部记为6号，右前肢记为7号，右侧腰部记为8号，右后肢记为9号。10号以上则为：苦味酸溶液斑点涂于大鼠左前肢+尾基部记为10号，左前肢+腹底部记为11号，左前肢+左侧腹记为12号，以此类推到19号；左侧腹+尾基部记为20号，左侧腹+左前肢+尾基部记为21号，左侧腹+腹底部记为22号，左侧腹+左后肢记为23号，以此类推到99号。总的来说，大鼠腹底部染色表示其编号十位和个位相同，而尾基部染色表明其编号十位大于个位或个位为零。比如55号苦味酸溶液涂于大鼠腰背部+腹底部，72号涂于大鼠右前肢+左侧腹+尾基部，90号涂于大鼠右后肢+尾基部。当大鼠编号十位小于个位时，十位个位分别染色即可。比如34号大鼠，苦味酸溶液涂于其左后肢+头顶部。
结果
单色苦味酸溶液编号标记法（1-99号），在不同实验室、不同实验人员之间相互交流应用，均能很好地完成大鼠1-99号的染色编号标记，简单方便、辨识快捷，工作效率随之提高。
讨论
苦味酸、2,4,6-三硝基苯酚是炸药的一种，缩写TNP、PA，纯净物室温下为略带黄色的结晶。它是苯酚的三硝基取代物，受硝基吸电子效应的影响而有很强的酸性，因其具有强烈的苦味，从而得名“苦味酸”。苦味酸乙醇溶液是实验室常备的动物编号标记染料，配制简单方便，性质稳定，从而广泛应用于实验动物染色标记编号。
实验人员曾尝试使用记号笔直接将大鼠编号写于大鼠尾根部或将写好编号的白胶布粘于大鼠尾根部，均因为大鼠的撕咬而使标号褪色或使标记物脱落，标号混乱，影响实验进程及结果。
使用苦味酸溶液对大鼠进行1-99号染色标记，存在11、22等九个十位和个位数相同的数值标记，这9个编号有一个染色斑在腹底部，实验人员查看时易与1-9号混淆，需将大鼠抓起查看腹底部标记确定。此外，染色时臀部和尾基部较为接近，需准确区分。
染色法虽然简单方便，不会给实验动物造成损伤和痛苦，但是长时间实验会使染色标记自行褪色，或由于实验动物相互嬉闹、舔毛、摩擦、换毛、粪尿和饮水浸湿被毛等原因，易造成染色标记模糊不清，因而染色法对慢性实验不适用。如果所进行慢性实验只能采取此种染色方法，则应注意不断补充和加深染色。
总的来说，单色苦味酸溶液对大鼠进行染色编号标记，简单方便、辨识快捷，是一种经济有效的大样本大鼠标记方法。
参考文献
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作者信息：赵志鑫，（1984-），男，甘肃陇南人，河南护理职业学院助讲，硕士学位，主要研究方向:肿瘤药理学。
论文作者:赵志鑫
论文发表刊物:《医师在线》2016年5月第9期
论文发表时间:2016/7/9
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