山东省威海市立医院 264200
【摘 要】目的：分析非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR、K-Ras和BRAF基因突变的分子病理检测情况。方法：于本院2014年10月--2016年10月收治的非小细胞肺癌患者中，随机选取100例作为样本，观察其肿瘤组织中EGFR、K-Ras和BRAF基因突变情况。结果：非小细胞肺癌患者EGFR基因突变率85%、K-Ras基因突变率2%、BRAF基因突变率1%。结论：非小细胞肺癌患者EGFR基因突变率高，临床应加以重视。
【关键词】非小细胞肺癌；EGFR；K-Ras；BRAF；分子病理检测
前言：随着环境以及人民饮食结构等的改变，肺癌发病率逐年上升，对人类健康造成了极大的威胁，找到肺癌发病的分子病理学基础，是提高患者治疗有效率、改善预后的关键[1]。本文于本院2015年10月--2016年10月收治的非小细胞肺癌患者中，随机选取52例作为样本，对非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR、K-Ras和BRAF基因突变的分子病理检测结果进行了分析：
1 资料与方法
1.1 一般资料
于本院2014年10月--2016年10月收治的非小细胞肺癌患者中，随机选取100例作为样本，患者临床资料如下：性别：男性50例、女性50例。年龄：34--71岁，平均年龄（56.47±2.88）岁。
患者均确诊为非小细胞肺癌，且自愿参与研究。
1.2 方法
1.2.1 仪器与试剂
（1）FFDE样本DNA分离试剂盒。（2）核酸蛋白质浓度测量仪。（3）Mx3000P实时荧光定量PCR仪。
1.2.2 DNA提取方法
（1）显微镜下标记肿瘤区域，并切片。（2）采用FFDE样本DNA分离试剂盒提取DNA。（3）DNA浓度稀释至2--5ml/L备用。
1.2.3 PCR扩增方法
（1）PCR反应体系：2×Taq。（2）灭菌去离子水19μ。（3）94℃预变性5min。（4）72℃延伸5min。（5）灭菌去离子水为阴性对照。
1.3 观察指标
观察100例患者EGFR基因突变情况。
观察EGFR基因各外显子内双重突变情况。
观察100例患者K-Ras以及BRAF基因突变情况。
1.4 统计学方法
采用统计学软件 SPSS 19.0对数据进行处理，分析非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR、K-Ras和BRAF基因突变情况。
2 结果
2.1 100例患者EGFR基因突变情况
100例患者共85例患者检测到EGFR基因突变，具体情况如表1：
表1 100例患者EGFR基因突变情况
2.3 100例患者K-Ras以及BRAF基因突变情况
100例患者中，共2例检测出存在K-Ras基因突变，其中1例为G12C点突变。检测出BRAF基因V600E点突变者共1例。
3 讨论
3.1 EGFR
EGFR为酪氨酸激酶Ⅰ型受体家族成员之一，与配体结合，容易出现构象变化，促使自身二聚环结构发生改变，最终使细胞的增值以及凋亡等过程得以实现[2]。本文研究发现，非小细胞肺癌患者EGFR基因突变率85%、其中外显子18突变率11.76%、外显子19突变率47.06%、外显子20突变率10.59%、外显子21突变率30.59%。对比可发现，外显子19与外显子21突变率较高。
3.2 K-Ras
K-Ras基因，为Ras基因家族中的成员之一，研究显示，该基因的突变，与肿瘤的发生以及进展，具有显著联系[3]。与其他基因相比，Ras基因第4外显子在拼接方式方面存在一定差异，因此突变较容易发生[4]。健康人群，K-Ras蛋白可通过GDP/GTP转化，促使下游信号通路得以被调控，非小细胞肺癌患者，K-Ras基因突变后，调控机制出现异常，导致肿瘤细胞的生长与增殖等得以实现[5]。本文研究发现，K-Ras基因突变率2%，与国外研究基本相同。
3.3BRAF
BRAF基因，为RAF基因家族中的一员，机体中，BRAF蛋白与K-Ras蛋白，均具有调整信号通路的作用，如患者受遗传以及后天致癌基因的影响，导致BRAF基因发生突变，基因的调节作用便无法凸显，促使肿瘤进展，导致疾病恶化。本文研究发现，非小细胞肺癌患者，BRAF基因突变率1%。
结论：
非小细胞肺癌患者EGFR基因突变率高，临床应加以重视。
参考文献：
[1]宋业颖，许春伟，吴永芳，班怡，张博，李晓兵. 非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR、K-Ras和BRAF基因突变的分子病理检测分析[J]. 解放军医药杂志，2015，04：16-19.
[2]徐建平，赵洁婷，叶伟，朱东波，孙晓，宋蓉蓉，许春伟，陈燕坪. 非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR和KRAS基因突变的 分子病理检测分析[J]. 临床与病理杂志，2016，10：1658-1664.
[3]韩义明，饶兰，丁莉，郑杰，杨婉，沈金花，邹先进. 非小细胞肺癌中BRAF V600、EGFR基因突变与临床病理特征的关系[J]. 临床与实验病理学杂志，2017，04：375-378.
[4]郑军，谢贵元，李姣，罗佳娣，文秋元，范松青. 非小细胞肺癌EGFR基因突变的临床意义研究[J]. 中国肿瘤临床，2014，14：904-907.
[5]张阳，潘振奎，张星，徐菲，张力. 非小细胞肺癌患者K-RAS基因突变的研究[J]. 中国肺癌杂志，2010，06：602-606.
基金项目：上海市静安区“十、百、千”人才培养计划资助项目
论文作者:陈玉,许进秀
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2017年3月第6期
论文发表时间:2017/7/18
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