刘志伟 周明德
【摘 要】 目的 探讨三种不同稀释液对电化学发光法检测孕酮的影响。方法 在我院产科门诊随机选取80份血清标本，分别与生理盐水、儿童混合血清和孕酮专用稀释液等体积1：1混合，然后用德国罗氏诊断有限公司生产的E601型号电化学发光仪器检测孕妇的原倍血清标本和各组混合后的血清标本。结果 A组与B组比较有显著性差异（T=3.1356，P<0.001）；A组分别与C组、D组比较均无显著性差异（T=0.5514、0.2078，P>0.05）；C组和D组比较也无显著性差异（T=0.2541，P>0.05）。结论 生理盐水不适合做检测孕酮的稀释液，但是儿童混合血清和专用稀释液均可以作为电化学发光检测孕酮的可靠稀释液；而且可以用儿童混合血清代替孕酮稀释液。
【关键词】 孕酮； 生理盐水； 儿童混合血清； 孕酮稀释液； 电化学发光法
Effects of three different dilutions of the electrochemiluminescence assay progesterone. Liu Zhiwei Zhou Mingde. Luohu District, Shenzhen City, MCH Laboratory
【Abstract】 Objective To investigate the effect of three different dilutions of the electrochemiluminescence assay progesterone. Method Randomly selected 80 serum samples in our hospital maternity clinic, Respectively versus saline, children mixing serum and progesterone special diluent an equal volume of 1: 1 mix，Then detect former times serum samples for pregnant women and serum samples in each group after mixing , with Germany Roche Diagnostics Limited production of E601 model electrochemiluminescence instrument. Result There was a significant difference between group A and group B（T=3.1356，P<0.001）; Group A and group C, groups D were no significant difference（T=0.5514、0.2078，P>0.05）; Group C and group D no significant difference（T=0.2541，P>0.05）. conclusion Saline is not suitable for checking progesterone dilution, but children mixing serum and special diluent can be used as a reliable dilution of electrochemiluminescence assay progesterone; And can use children mixing serum instead of progesterone dilution.
【Key words】 Progesterone; Saline; Children mixing serum; Progesterone dilution; Electrochemiluminescence method
孕酮又称为黄体酮，可缩写为P，主要是由卵巢黄体产生，而在妊娠期间主要由胎盘产生，其含量随孕周而增加，可达正常人的10～100倍，孕酮在雌激素协调下，促进受精卵在宫内的着床并维持妊娠顺利进行[1]，但当黄体生成障碍、多囊卵巢综合征、异位妊娠、先兆流产、胎儿发育迟缓、死胎等疾病时孕酮会减低；而糖尿病孕妇、葡萄胎、先天性17-α羟化酶缺乏症、先天性肾上腺增生、及脂质性卵巢瘤等疾病均可引起孕酮的增高[2]。当样本的孕酮浓度超过仪器和试剂相应的检测范围时就必须使用样本稀释液。因此：准确快速检测孕酮对以上疾病的鉴别诊断有很大的临床辅助意义，本文探讨三种不同稀释液对电化学发光法检测孕酮的影响。现报道如下：
材料与方法
1.对象
随机选取2015年6月-2015年10月来我院产科门诊就诊的80名孕妇，年龄介于23-37岁；同时随机选取到我院儿童保健科体检的学龄前儿童，均为男性。
2.试剂与仪器
孕酮稀释液和检测试剂均由罗氏诊断产品（上海）有限公司提供的原装配套试剂；生理盐水由东芝市普济药业有限公司生产，批准文号为国药准字H20065566；在我院体检的学龄前儿童，随机提取肝功能正常的血清标本，所选标本均无黄疸、无溶血和无脂血，混合后制成儿童混合血清备用。检测仪器是德国罗氏E601电化学发光分析仪。
3.方法
3.1标本的制备
抽取孕妇的静脉血3ml，自行凝集后分离血清待检；然后分别与生理盐水、儿童混合血清、孕酮稀释液等体积1：1混合待检，所有操作均严格按照试剂说明书和仪器操作规程进行操作。
3.2 标本的检测
用仪器检测孕妇的原倍血清标本，所得结果作为A组（对照组）；用仪器检测孕妇血清标本与生理盐水以等体积1：1混合后的血清标本，所得结果作为B组；用仪器检测孕妇血清标本与儿童混合血清以等体积1：1混合后的血清标本，所得结果作为C组；用仪器检测孕妇血清标本与孕酮稀释液以等体积1：1混合后的血清标本，所得结果作为D组。
3.3 仪器的维护保养
仪器每日均做好保养，测试期间，吸样时无气泡或凝块等异常情况发生，仪器未有异常的报警信号，每日都用原厂配套的质控品做质控，保证质控在控，并且保证标本和质控的检测为同一批次的试剂。
4.统计学方法
所测数据以均数±标准差（X±S）表示，组间比较采用两样本T检验，P<0.05为具有统计学意义。
结 果
仪器分别检测A组为孕妇的原倍血清标本、B组孕妇血清标本为与生理盐水以等体积1：1混合后的血清标本、C组为孕妇血清标本与儿童混合血清以等体积1：1混合后的血清标本和D组为孕妇血清标本与孕酮稀释液以等体积1：1混合后的血清标本，各组均是80例标本，检测结果分别是28.92±10.39 ng/ml、40.29±13.85ng/ml、26.89±9.03 ng/ml和27.97±9.29 ng/ml；其中A组与B组比较有显著性差异（T=3.1356，P<0.001）；A组分别与C组、D组比较均无显著性差异（T=0.5514、0.2078，P>0.05）；C组和D组比较也无显著性差异（T=0.2541，P>0.05）。结果如表1所示。
讨 论
血清孕酮在临床实践的过程中属于医学检测的一项重要内容[3]，目前临床检测血清孕酮的方法有很多，如磁微粒发光法、酶联免疫法、化学发光法和电化学发光法等，我院采用的是德国罗氏诊断有限公司生产的电化学发光仪器，型号为E601是目前较为先进的仪器，采用竞争法原理，根据检测下限和最大标准曲线定义得出仪器的检测范围是0.030-60.0 ng/ml，孕酮检测试剂盒（电化学发光法）说明书并注明高于检测范围的血清标本，建议用低内源性的孕酮人血清稀释，孕酮检测试剂盒（电化学发光法）说明书注明稀释后的标本孕酮含量必须大于2 ng/ml。由本文结果可知：用生理盐水稀释血清标本后，所测结果明显高于原倍血清标本的所测结果，这可能是生理盐水存在的某一物质干扰了罗氏试剂的竞争反应，张硕曾报道过一例患者血清中含有的自身物质而干扰了孕酮的检测[4]。而用儿童混合血清或孕酮稀释液稀释后的血清标本所测结果与原倍血清标本的所测结果相比无明显差异（T=0.5514、0.2078，P>0.05），这是因为儿童混合血清均选自男性的学龄前儿童，而孕酮主要是由卵巢黄体和妊娠时的胎盘产生的；并且罗氏公司生产的孕酮稀释液主要成分是男性供血者血液的混合血清和防腐剂；因为这两种稀释液的介质都更接近血清，与待测血清倍比稀释时不会破坏相应的反应体系，故两者稀释后的结果更接近原倍血清所测的结果值。
由本文结果可知：用儿童混合血清稀释后血清标本与孕酮稀释液稀释的血清标本所测结果比较无明显差异（T=0.2541，P>0.05），但可以看出用孕酮稀释液稀释后的血清标本所测结果更接近原倍血清标本的所测结果，这是因为孕酮稀释液的内源性孕酮浓度小于1ng/ml(3.2mmol/l)，而我院自配的儿童混合血清出于成本的考虑，在选取男性学龄前儿童的血清标本没有去筛选出高孕酮值的标本。
因此，由本文结果可知用儿童混合血清和孕酮稀释液均可以作为电化学发光检测孕酮倍比稀释的可靠稀释液，而且若出于对成本的考虑可以用儿童混合血清代替孕酮稀释液来做倍比稀释。
参考文献
[1]李美芝.妇科内分泌学[M].北京:人民军医出版社,2001:116-117.
[2]尚红,王毓三,等.全国临床检验操作规程第四版[M].人民卫生出版社,2015年3月第一版:375-376.
[3]张映辉,钟梅.血 清β绒毛膜促性腺激素、孕酮及雌二醇检测用于早期异位妊娠诊断的价值[J].中华临床医师杂志(电子版),2011,5(23):7112- 7114.
[4]张硕,陈立秋,辛楠,等. 临床罕见血清孕酮无法检测1例[J].空军医学杂志,2015.31(2):01.
论文作者:刘志伟,周明德
论文发表刊物:《中华临床医师杂志》(电子版)2016年4月第7期
论文发表时间:2016/7/19
标签：血清论文; 稀释液论文; 标本论文; 孕酮论文; 电化学论文; 生理盐水论文; 仪器论文; 《中华临床医师杂志》(电子版)2016年4月第7期论文;