邓杰
(贵港市覃塘区人民医院;广西贵港537121)
[摘要] 目的是探讨ABO血型亚型红细胞吸收弱放散强的血清学特点,为亚型鉴定提供有力的依据。方法 应用吸收放散试验来检验ABO亚型红细胞和正常ABO血型红细胞吸收相对应的-A抗体或-B抗体(同时做正常“O”型红细作对照),检测吸收前和吸收后血清抗体效价来作对比后分析结果。结果 亚型红细胞和相对应的血清抗体反应时其特点是吸收抗体的能力比较弱,放散出来的抗体很强;正常红细胞的的反应刚好相反:吸收很强,放散出来的抗体很弱;O型红细胞作为对照,不吸收也没有放散。结论 吸收弱放散强作为亚型的一个重要特点之一,在遇到正反定型不相符的疑难血型定型时,这一特点能为亚型的鉴定提供了有力的依据,正确的血型鉴定,确保临床输血安全。
[关键词] ABO血型;亚型红细胞;吸收放散试验;吸收弱放散强;输血安全
ABO血型亚型是由ABO基因变异形成的,其抗原的结构、功能、形态、活性与抗原的位点数和正常ABO血型抗原存在着一定的差异。ABO亚型具有遗传的基础,并且有明确的血清学特点[[]]。一般A基因变异形成A亚型,B基因变异形成B亚型,O基因不表达糖基转移酶活性,所以O基因的变异只能形成新的O等位基因。由于ABO亚型抗原结构、功能、形态、活性与抗原位点数的改变,导致其吸收弱放散强这一血清学特点,现在本文用A亚型、B亚型、A亚B型、AB亚型一共26例亚型做吸收放散试验后血清效价的对比来分析这一特点。
1 资料与方法
1.1 临床资料
26例亚型是2016年1月-2019年6月我院输血科做血型鉴定中检测出来的,受检者年龄在3-65岁,其中女性11例,男性15例。26例亚型中A亚型5例,占19.3%。B亚型19例,占73.1%。A亚B型1例,占3.8%。AB亚型1例,占3.8%。
1.2 方法
1.2.1 标化人源血清 为了更好地进行研究,各项实验平行进行,在选用抗-A、抗-B血清时我们选用尽可能高效价的不规则抗体筛查阴性的人源血清,并将其效价标化为:效价32,凝集强度()的血清略用。
1.2.2 吸收放散试验 取受检者红细胞1ml用生理盐水洗三次,去掉第三次盐水洗液后加入与压积红细胞等量的标化后相对应的抗血清(抗-A或抗-B血清),混匀后放置4℃冰箱吸收1小时。取出吸收后的标本马上离心,吸出吸收后的血清并检测其效价。然后用冷盐水洗压积红细胞3-6次,直到洗液相应抗血清的效价为0时,取洗净的压积红细胞,加半量的生理盐水混匀,于56℃水浴箱中轻摇1分钟放散9分钟,取出马上离心,吸取上清液250ul于试管中,加4%相应的标准红细胞50ul,混匀放置4℃冰箱15分钟,离心观察结果。
2 实验结果
3 讨论
在实验过程中,吸收后的血清因为被稀释,因此其效价会有所下降,此时O型红细胞作对照能体现出来,实验成功与否,也从O型红细胞的对照实验中体现。
目前出现的A亚型有A1、A2、A3、Ax、Ael、Am、Ah、Ah孟买、Aint、Aend、Afinn、Abantu和Ay等,它们可以AB型的形式出现(AxB),A亚B型广义上算是A亚型[[]];常见的B亚型主要有B3、Bx、Bm、Bel、B(A)、AB亚型等;对于ABO亚型的鉴定,目前仍广范地用血清学方法,B亚型的分型和血清学鉴定一般参照A亚型的分型和血清学实验特点。一般认为B亚型在西方人要少于A亚型,而中国人的B亚型频率却高于A亚型,从我们所做的血型鉴定中也发现了这一点 。
吸收放散试验所用的抗体最好是不含不规则抗体的人源血清,因为市售单克隆抗体针对与其反应的抗原范围比较窄,当血型抗原基因表位上只要有一个功能基因或分子不同、位置差别和立体构象变化,就有可能不被单克隆血清抗体识别[[]]。所以单克隆抗体并不能保证与所有的ABO亚型抗原反应;同时市售的单克隆抗体效价高,也容易出现非特异性的吸附作用。在做实验时,应用尽可能多的放散液和浓度为4%的50ul相应的红细胞在4℃冰箱15分钟进行反应。为了便于研究,放散液的用量我们固定为250ul。
ABO血型亚型是由ABO基因变异形成的,其抗原的位点数和正常ABO血型抗原位点数存在一定的差异,一般亚型抗原的位点数在不同的程度上比正常ABO血型抗原少。正常ABO血型红细胞上的抗原由于年龄、妊娠、疾病等影响也有可能减弱,但其抗原的结构、功能、形态、活性还是正常的,在吸收放散试验中,其与正常ABO血型抗原一样具有吸收强放散弱的特征,和ABO亚型抗原吸收放散试验结果相反,并且疾病引起的抗原减弱,在病情痊愈后其血型会恢复正常。
ABO血型准确鉴定极其重要,是保证输血安全的一个重要前提。ABO亚型由于A或B红细胞上的抗原位点减少,与相应的抗体反应弱产生较弱的凝集,甚至不发生凝集,所以常错误判定为O型,造成血型的鉴定错误。作为献血者时,如果把A亚型(弱A)或B亚型(弱B)输给O型受者时,会引起溶血性输血反应;作为受血者时,将A型红细胞输给A亚型或将B型红细胞输给B亚型,这样有可使受血者在输血后产-A抗体或-B抗体。ABO亚型受血者在没有同型血的情况下原则上应输O型洗涤红细胞和AB型血浆。要准确的鉴定出ABO亚型,就要掌握其特点,再根据其特点做相应的实验。由于亚型具有遗传性,当怀疑ABO亚型时,我们还要做家系调查。
[1]向东,ABO亚型的检测,中国输血杂志[J],2010,23(8);577-580
[2]韩蕊,刘裔军,张明娟,A亚型的血型鉴定与安全输血[J],中国卫生检验杂志,2015,25(14):2446-2448.
[3]陈阳,王慧,李革飞等,Bx亚型血型鉴定1例[J],中国输血杂志2009,22(8);677-678.
论文作者:邓杰
论文发表刊物:《医师在线》2019年6月12期
论文发表时间:2019/9/23
标签:亚型论文; 红细胞论文; 抗原论文; 血型论文; 血清论文; 抗体论文; 鉴定论文; 《医师在线》2019年6月12期论文;