（湖南省长沙市妇幼保健院 湖南长沙 410006）
摘要：目的 探讨在高危型人乳头瘤病毒检验中运用实时荧光PCR法的诊断价值。方法 对妇科90例宫颈病变患者（2017年1月到2018年11月间）实施研究，对所有患者均进行实时荧光PCR法和第二代杂交式捕获法检测高危型人乳头瘤病毒感染状况，分析总结不同方式的诊断效果。结果 实时荧光PCR法对高危型HPV感染的诊断敏感性、准确率显著高于第二代杂交式捕获法（P<0.05）。实时荧光PCR法对慢性宫颈炎及鳞状上皮病变患者高危型HPV-DNA检测阳性率显著高于第二代杂交式捕获法（P<0.05）。两种方式诊断符合率为82.2%。结论 高危型人乳头瘤病毒检验中运用实时荧光PCR法诊断效果良好。
关键词：高危型人乳头瘤病毒；实时荧光PCR法；诊断；宫颈病变
人乳头瘤病毒（HPV）感染是妇科较为常见感染性疾病。研究发现多数宫颈癌前病变和宫颈癌患者存在HPV感染，且HPV分型较多，其中高危型HPV也是引起宫颈癌前病变和宫颈癌的重要诱因，加强高危型HPV感染的早期筛查和治疗在宫颈癌前病变和宫颈癌防治中具有重要意义[1]。以往临床多通过第二代杂交式捕获法检测HPV感染，实时荧光PCR法是目前HPV感染检测新技术，为明确该技术的诊断效果，本研究对妇科90例宫颈病变患者（2017年1月到2018年11月间）采取了实时荧光PCR法和第二代杂交式捕获法两种方式检测高危型HPV感染状况，现行报道：
1 资料与方法
1.1 一般资料
在2017年1月到2018年11月间进行病例筛选，选期间妇科90例宫颈病变患者实施研究，患者年龄22～72岁，平均年龄45.6岁（s=11.5）；病理类型：慢性宫颈炎及鳞状上皮病变35例，CINⅠ24例，CINⅡ18例，CINⅢ 8例，宫颈癌5例。
纳入病例：实施实验室检查、病理检查确诊为宫颈病变者；一般资料完整、意识清晰者；自愿配合检查且签署知情同意书者。排除病例：其他感染性疾病、妇科疾病者；其他系统及组织严重病变者；孕期及哺乳期者；精神障碍者。
1.2 方法
患者均实施实时荧光PCR法和第二代杂交式捕获法检测高危型HPV感染状况。实时荧光PCR法：所有高危型HPV核酸检测试剂盒均由中新科炬生物技术有限公司提供，检测时采集患者宫颈脱落细胞，并将细胞保存在保存液中，将样本pH调节到7.4，加入反应液混匀，并进行PCR扩增，其余操作过程严格参照使用说明书进行，当循环阈值＜37时诊断为高危型HPVDNA阳性。第二代杂交式捕获法：采集宫颈脱落细胞，并将细胞保存在保存液中，使用RNA探针对样本进行杂交处理，并与特异性抗体结合，测定信号发光强度，了解HPV负荷量，若＞1.0pg/ml则为高危型HPV-DNA阳性。
1.3 观察指标
将病理检查作为金标准，①分析总结不同方式对患者高危型HPV感染的诊断效果。②分析不同方式对不同宫颈病变患者高危型HPV感染的检测结果。③分析不同方式检测高危型HPV感染的符合率状况。
1.4 数据统计
用SPSS20.0软件处理，用n（%）表示计数资料，?2检验，P＜0.05表示存在统计学意义。
2 结果
2.1 不同方式对患者高危型HPV感染的诊断效果分析
90例患者实施病理检查检出高危型HPV感染77例，感染率为85.6%。实时荧光PCR法对高危型HPV感染的诊断敏感性、准确率显著高于第二代杂交式捕获法（P<0.05），见下表1。
3 讨论
宫颈癌是目前威胁女性生命安全的重要恶性肿瘤疾病，治疗难度大，致死率高，如何提升宫颈癌的防治效果是社会关注的重点问题。而高危型HPV致癌能力较强，其也是引起宫颈癌变的重要诱因，因此加强对高危型HPV感染的早期筛查和治疗对宫颈癌防治具有重要意义。目前HPV感染诊断方式较多，常用方式为薄层液基细胞学技术、巴氏涂片检查，但检测过程中影响因素较多，极易出现漏诊；实施血清学检查时可了解HPV当前及既往感染状况，但缺乏明确诊断[2]。第二代杂交式捕获法主要通过将抗体捕获信号、发放信号放大后进行诊断，该诊断方式运用效果良好，但检测过程操作复杂，诊断费用较高，周期较长，临床运用受限。实时荧光PCR法是HPV感染检测的新技术，该检测技术操作简单，诊断费用降低，且诊断周期短，可快速获得检测结果[3-4]。本研究中两种方式诊断符合率为82.2%，符合率较高。但实时荧光PCR法对高危型HPV感染的诊断敏感性90.9%、准确率90.0%显著高于第二代杂交式捕获法75.3%.74.4%，实时荧光PCR法对慢性宫颈炎及鳞状上皮病变患者高危型HPV-DNA检测阳性率显著高于第二代杂交式捕获法，说明实施实时荧光PCR法诊断效果更好，且其诊断优势主要体现在对慢性宫颈炎及鳞状上皮病变的诊断，实施实时荧光PCR法检测时通过荧光信号检测反应物，且在每次循环中可获得扩增数据，且产物分析在封闭管内实施，可减少污染因素，因此诊断效果更好，准确率更高。
综上所述，高危型人乳头瘤病毒检验中运用实时荧光PCR法诊断效果良好，误诊、漏诊少，且操作简便、诊断费用较低，值得推广。
参考文献
[1]古旭东，薛春玲，汪云霞，等.实时荧光PCR法在高危型人乳头瘤病毒检验中的诊断价值研究[J].现代诊断与治疗，2016，27（15）：2889-2890.
[2]邹丽敏，高卫亚，杜忠祥等.实时荧光PCR法在高危型人乳头瘤病毒检测中的应用[J].中外女性健康研究，2017，24（23）：3-4，36.
[3]卢立红.实时荧光PCR在高危型人乳头瘤病毒检验中的诊断价值分析[J].中国卫生标准管理，2016，7（24）：140-141.
[4]于彩洁.实时PCR检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值分析[J].心理医生，2017，23（26）：70-71.
论文作者:石亮程
论文发表刊物:《航空军医》2019年2期
论文发表时间:2019/5/15
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