张丽勇
（白城医学高等专科学校 吉林白城 137000）
【关键词】关键词：泌尿功能；调节；实验；改革
【中图分类号】R3 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）18-0133-02
肾泌尿功能的调节实验是生理学基本动物实验，通过多年实践研究对部分实验步骤进行改进，并对各实验项目进行解析。并介绍各实验步骤的注意事项。主要介绍本实验的实验目的、实验原理、实验对象、实验器材与药品、实验方法和步骤，重点详细介绍并解析了各实验项目。
1.实验目的、原理、对象、器材与药品
1.1实验目的
通过对麻醉动物进行输尿管插管术，收集并记录尿流量，进而观察在不同作用下的尿量变化。其目的在于学习动物尿液的收集和记录方法，了解影响尿液生成的因素，并分析其作用机制。
1.2实验原理
尿生成的过程包括肾小球的滤过，肾小管和集合管的重吸收，肾小管和集合管的分泌、排泄过程。凡影响上述过程的因素，都可能影响尿的生成从而影响尿量。
1.3实验对象
狗。
1.4实验器材与药品
狗手术台、哺乳动物手术器械、注射器（1ml、2ml、5ml、10ml）、多色丝线、纱布、Pclab-UE微机化生理实验教学系统、压力换能器、动脉插管、尿糖试纸、生理盐水、20%乌拉坦、25%葡萄糖注射液、6%柠檬酸钠生理盐水溶液。1：10000去甲肾上腺素、速尿。
2.实验方法和步骤
2.1狗的麻醉和固定
麻醉药物用20%乌拉坦，按照3.5ml/kg用量静脉注射。
狗属哺乳纲、食肉目、犬科。其嗅觉、视觉、听觉均很灵敏，神经系统、血液系统、消化系统、循环系统都很发达，与人类相似，是目前应用最多的大动物。常用于上述各系统的实验研究。
狗很凶恶，为避免其咬人，实验前首先要绑住狗嘴。
驯服的狗一般无需使用器械，方法是：接近狗时态度要温和，可从侧面靠近，轻轻抚摸其颈背部皮毛然后用固定带迅速从下颚绕到上颚打一个结，再绕回下颚打第二个结，最后引至颈部打第三个结，并多打一个活结以备解脱。注意捆绑时动作要轻巧、迅速，松紧要适宜。
未经驯服或较凶恶的狗可先用特制的狗头夹夹住狗的颈部，将狗按倒在地，之后再用固定带绑住其嘴，方法同上。
将狗驯服按住后，可行麻醉。麻醉首选前肢内侧头静脉，先剪去注射部位的被毛，用橡皮管扎紧静脉近心端（或他人用手压迫近心端）使血管充盈，左手握住注射肢体，绷紧局部皮肤，右手持针自远心端刺入血管，待有回血后，松开橡皮管（或压迫的手），缓慢注入药液，及时用医用胶布固定注射针头。也可选用后肢小隐静脉，但血管易滚动，不易穿刺。静脉麻醉起效快，无明显兴奋期，常先给予麻醉药总量的1/3，速度可稍快以求动物能快速、顺利地度过兴奋期，后2/3药物剂量的给药速度宜慢，且需边注射边观察动物生命体征的变化，当确定已达到麻醉效果，即可停止给药，不必将剩余的麻醉药全部推入，以免麻醉过深。待麻醉后，立即注射针头的一端注射器卸掉，并与输液管相连，保持静脉通路，以备给药。待狗麻醉后再移去狗头夹，解掉绑嘴，置于狗实验台上，用狗头固定器固定好头部。
四肢固定方法：先用绳子缚扎在踝关节的上部，后肢左右分开，前肢平放于躯干两侧背后交叉，将绳子的另一端系在手术台两侧的钩子上。
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2.2手术过程
2.2.1气管插管 气管位于颈部正中部位，被皮下组织和肌肉覆盖。剪去颈部的毛，沿颈部正中切开5～7cm皮肤切口，用止血钳沿气管中线插入，并向前后两端扩张创口，钝性分离气管前肌肉，暴露气管。也可用两食指沿中缝拉开肌肉，即可见气管。分离甲状软骨以下气管，在甲状软骨下0.5～1.0cm处两软骨环之间，用手术刀将气管前段横向剪开（约占气管壁1/2～2/3）；再向远心端做一个小纵行切口，使呈倒“T”形；检查切口无出血，即可将气管插管插入肺的方向，结扎、固定。注意进行气管插管的过程要迅速，以免因麻醉造成呼吸道分泌物增加而导致动物窒息。
2.2.2分离左侧颈总动脉进行颈动脉插管（测血压）并连接Pclab-UE微机化生理实验教学系统的压力换能器 颈总动脉位于气管两侧，被肌肉所覆盖。分离时用止血钳钝性分离肌肉，在气管后下方找到左侧颈总动脉，颈总动脉是粉红色大血管，手触之有搏动感。也可用两食指沿缝拉开肌肉，找到左侧颈总动脉。细心剥开鞘膜，沿血管走形方向分离出左侧颈总动脉，分离长度约4厘米，在其下穿2条线备用。
用一条线将分离出的颈总动脉远心端结扎；用动脉夹将颈总动脉近心端夹住；在结扎处与动脉夹之间，穿入备用线。在靠近结扎处的稍下方用眼科剪剪一个与血管呈45度角的向心切口（切口大小约为直径的一半），将动脉插管（管内充满1%的肝素生理盐水，并与压力换能器相连）由切口向心脏方向插入动脉内，用另一条备用线结扎、固定。注意结扎动脉插管的线一定要系紧，以防血液由此溢出。打开动脉夹，在电脑上即可显示正常血压变化曲线。
2.2.3输尿管插管 在耻骨联合上方，沿腹白线切开腹部，暴露出膀胱，在其底部找出两侧的输尿管，仔细分离，结扎两侧输尿管的膀胱内口，用眼科手术剪剪开一小口，向肾脏方向进行输尿管插管。用充满生理盐水的导尿管(蘸少许液体石蜡)从剪开的小口插管，插入3cm左右，见有尿液滴出即可。结扎固定后收集尿液。双侧导尿管口下接量筒。
2.2.4手术完成后，让动物安静5分钟，调整各记录装置，观察尿液量作为正常对照。
2.3实验观察
2.3.1记录正常尿量。记录每分钟尿液的滴数。
2.3.2自静脉大量迅速注射38℃生理盐水，观察血压和尿量的变化。
尿量增多。原因一：抗利尿激素分泌和释放减少。静注大量生理盐水，循环血量和心输出量增加，血压升高，分别对左心房和胸腔大静脉壁上的容量感受器和颈动脉窦、主动脉弓压力感受器的刺激增强，经迷走神经传入中枢的冲动增加，反射性抑制抗利尿激素的分泌和释放，集合管对水的通透性下降，水的重吸收减少，尿量增多。原因二：肾小球虑过率增加。①静脉注射大量生理盐水，肾血浆流量增加，血浆胶体渗透压下降速率和有效滤过压升高速率减慢，产生滤过作用的毛细血管长度以及肾小球滤过率增加，尿量增加。②静脉注射大量生理盐水，血浆胶体渗透压下降，有效滤过压升高，肾小球滤过率增加，尿量增加。
2.3.3先收集尿液2滴进行尿糖定性试验作为对照，然后自静脉注射20%葡萄糖溶液（1.5ml/kg）。观察血压和尿量的变化。并取尿液2滴做尿糖定性实验。
尿量增加。静注大量20%葡萄糖溶液，血糖过高，超过近端小管的重吸收能力，部分葡萄糖不能被重吸收，留在小管液中，提高了小管液的渗透压，对抗水的重吸收，水的重吸收减少，尿量增加。出现糖尿。
2.3.4自静脉注射0.6%的酚红注射液静脉注射6mg/ml酚红溶液1ml，用盛有10%NaOH液的培养皿接取尿液。当尿液中酚红排出时，遇NaOH液即呈现红色。记录开始注射至尿中出现酚红所需时间。正常是15分钟。酚红是一种对人体无害的染料，静脉注入人体后，除约20%由肝脏清除外，绝大部分由肾脏清除（94%由肾小管分泌排泄，6%经过肾小球滤过）。待测尿样经碱处理呈红色，与标准对比便可求出其排泄的百分率。正常情况下15分钟应被排泄出来。
2.3.5由静脉注入1：10000去甲肾上腺素0.1ml/kg,观察血压和尿量的变化。
尿量减少。去甲肾上腺素与血管的α1受体结合，血管收缩。皮肤粘膜血管收缩最明显，其次是肾脏血管。肾血管收缩，肾血流量减少，肾小球毛细血管血压降低，有效率过压下降，肾小球滤过率降低，尿量减少。
2.3.6自静脉注入速尿注射液5mg／kg。观察血压和尿量的变化。
尿量增加。速尿能与髓袢升支粗段的Na+、2Cl-、K+的同向转运体上的Cl-结合点相结合，抑制Na+、2Cl-、K+的同向转运，使小管液中NaCl和K+的含量增加，渗透压升高，阻碍水的重吸收，导致利尿。
论文作者:张丽勇
论文发表刊物:《心理医生》2015年18期供稿
论文发表时间:2016/5/12
标签：动脉论文; 尿液论文; 生理盐水论文; 气管论文; 肾小球论文; 血管论文; 静脉论文; 《心理医生》2015年18期供稿论文;