(郫都区中医医院检验科；四川成都 611731)
【摘要】 目的 探讨血清半乳甘露聚糖( galactomannan，GM) 试验对侵袭性肺曲霉菌感染的诊断价值。方法 应用ELISA方法检测165位疑诊肺曲霉菌感染的患者的血清半乳甘露聚糖。并对检测结果进行统计学分析，绘制ROC（receiver operating characteristic curve）曲线，评价GM试验的运用价值。结果 GM试验以0.5为诊断界值，敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为69.05%，85.37%，61.70%，88.98%。ROC曲线下面积为0.792，最佳诊断界值为0.39。结论 GM试验是侵袭性曲霉菌感染早期诊断简单、快速、准确的方法。
【关键词】 半乳甘露聚糖 侵袭性肺曲霉菌感染 早期诊断
The Value of Serum Galactomannan Test in The Diagnosis of Invasive Pulmonary Aspergillus Infection ZHANY Yan. Department of Clinical Laboratory , Pixian Hospital of traditional Chinese Medicine, chengdu 611731,china
【Abstract】 Objective To investigate the diagnostic value of serum Galactomannan(GM) test in the diagnosis of invasive pulmonary Aspergillus infection.?Methods Application of ELISA method for serum GM test in 165 patients with suspected pulmonary aspergillosis. The test results were statistically analyzed?, Drawing ROC (receiver operating characteristic curve) curve, estimating Diagnostic value of GM test?. Results GM test with 0.5 as diagnostic value?, Sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value were?69.05%，85.37%，61.70%，88.98%. The area under the curve (AUC) of the ROC curve is?0.792, The best diagnostic boundary value is 0.39. Conclusion GM test is an early and rapid method for the diagnosis of invasive Aspergillus infection.
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2019）06-0027-02
曲霉菌广泛存在于自然界中，多为寄生菌，是引起侵袭性真菌疾病的主要病原菌，血清半乳甘露聚糖(GM)是曲霉细胞璧上的一种多糖抗原，由甘露聚糖和呋喃半乳糖侧链组成，呋喃半乳糖具有抗原性，使其成为可检测的抗原物质而运用于临床。
侵袭性肺部真菌感染，是真菌对气管支气管和肺部的侵犯，引起气道粘膜炎症和肺部炎症肉芽肿，严重者引起坏死性肺炎，甚至血行播散到其他部位。随着广谱抗菌药物、细胞毒性药物、免疫抑制剂、糖皮质激素的广泛应用，器官移植、放疗、免疫系统疾病、恶性肿瘤、糖尿病和尿毒症等的增加，侵袭性肺部真菌感染有上升趋势，病死率高达55%-80%[1]。其中曲霉属是临床常见感染肺部的真菌之一，近20年来，已经成为免疫抑制患者及其他危重病患者肺部感染的主要死亡原因之一〔2〕。深部真菌感染诊断的“金标准”为组织病理学检查，是确定感染的直接证据，但其需进行侵入性操作，常给患者带来痛苦，不易耐受〔3〕。实验室检测手段采样更容易，但涂片检查阳性率低、培养消耗时长、不能准确及时的为临床提供诊断、治疗依据。如何简单、快速、准确的提供侵袭性肺曲霉菌感染的诊断依据，在疾病的早期治疗、降低死亡率中显得尤为重要。多项研究证实，GM试验作为一种新的非培养快速诊断方法，对侵袭性曲霉菌感染的早期诊断及疗效观察具有重要的参考价值。本研究对具有侵袭性肺部真菌感染高危因素的患者进行GM试验检测，将检测结果及临床特征进行分析，评价GM试验对侵袭性肺部真菌感染的诊断价值。
1资料与方法
1.1 研究对象
收集2018年1月－2018年12月在我院肺病科住院的165位疑似肺曲霉菌感染患者。其中男92 例，女73 例，年龄20-86岁。诊断参考中华医学会呼吸病学分会2012年“肺真菌病诊断和治疗专家共识”规定的诊断标准。确诊：至少符合1项宿主因素，肺部感染的1项主要或2项次要临床特征及下列1项微生物学（(1)气管内吸引物或合格痰标本直接镜检发现菌丝，且培养连续≥2次分离到同种曲霉属真菌；(2)支气管肺泡灌洗液(BALF)经直接镜检发现菌丝，曲霉属真菌培养阳性。）或组织病理学依据。临床诊断：至少符合1项宿主因素，肺部感染的1项主要或2项次要临床特征及1项微生物学检查依据。拟诊：至少符合1项宿主因素，肺部感染的1项主要或2项次要临床特征。参照标准将研究对象分别划分为确定诊断组1列、临床诊断组26例、拟诊组15例、排除诊断组123例。
1.2 研究方法
1.2.1样本
采集患者静脉血于无菌干燥管真空内，静止半小时后，3000rpm离心10-15min，分离血清保存在密闭的试管中。48小时内检测的样本放置2-8℃冷藏，48小时内不能检测的样本放置于-20℃冻存，避免反复冻融。
1.2.2方法
GM抗原测定采用酶联免疫吸附试验，试剂采用Bio-Rad 公司产品，具有良好的敏感性和特异性〔4〕。检测仪器为Bio-Rad 公司的自动定量酶标仪( Bio － Rad Model 680)。检测样本时同时进行质控检测，保证结果有效性。试验结果用血清系数I表示，I = 样本OD 值/cut-off 质控OD 值平均值。实验血清系数I ＜0.5，结果判为阴性; 实验血清系数I ＞ 0.5，结果判为阳性。
1.3 统计分析
按照试剂说明书，GM 试验以0.5为诊断界值，将GM 试验≥0.5定为阳性。以感染组、非感染组、阳性组及阴性组作四格表分析。敏感度= 真阳性数/( 真阳性数 + 假阴性数) ; 特异度= 真阴性数/( 真阴性数 + 假阳性数) ; 阳性预测值= 真阳性数/（真阳性数 + 假阳性数）; 阴性预测值= 真阴性数/（真阴性数 + 假阴性数）。根据检测数据和诊断结果运用SPSS 21.0绘制ROC曲线。
2 结果
2.1 GM试验的敏感性与特异性
以临床诊断侵袭性肺曲霉菌感染组为真阳性, 非侵袭性真菌感染组为真阴性，作四格表(表1)。最终确诊病例为42例，其中GM 实验阳性有29例；非感染组为123例，其中18例GM试验为阳性, 故本GM 实验敏感性为69.05%, 特异性为85.37%, 阳性预测值61.70%, 阴性预测值88.98%。
3 讨论
侵袭性肺曲霉感染是临床上常见的一种肺部侵袭性真菌病，主要表现为侵犯血管，引起病变部位的栓塞、出血及坏死，以及非特异性炎症、化脓性改变或肉芽肿形成，常发生于免疫功能严重受损的患者，例如血液系统恶性肿瘤、造血干细胞移植和器官移植的患者等［5］。侵袭性肺曲霉感染病情十分凶险，死亡率很高。文献报道骨髓移植患者一旦发生侵袭性肺曲霉感染，死亡率高达 70%［6］。侵袭性肺曲霉菌感染的治疗依赖早期的诊断和早期用药,但其临床表现不一，缺乏特征性，如咳嗽、咳痰、咯血和体征减退等，通常在有基础疾病患者身上发生，容易被掩盖。病理组织活检取材难度高难，患者痛苦；样本培养所需时间长；胸部CT特异性不高，时间相对滞后，都给给早期诊断和治疗带来了困难，很多患者死亡后经尸检才能发现感染了曲霉菌。由此，传统检查手段容易造成肺曲霉菌感染的漏诊和误诊，导致治疗不及时，从而增加其死亡率。北京协和医院1953 ～ 1993年3447例尸检结果显示, 深部真菌感染率由1.5%上升至5.6%[7] 。发现深部真菌感染85例，其中生前明确真菌感染诊断者仅5例，占5.9％，漏诊率高达94.1％。因此，需要寻找一种简便、快速、敏感性及特异性均高的诊断方法来早期判断是否存在侵袭性肺部曲霉菌感染。
半乳甘露聚糖（GM）作为第一个用于侵袭性曲霉菌病的抗原[8]，是曲霉菌特有的细胞壁多糖成分，菌丝生长时，半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原，主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。作为一种非侵入性检查手段，GM试验在恶性血液疾病及血干细胞移植的患者中有着良好的敏感性及特异性。GM释放量与菌量成正比，可以反映感染程度。动态观察GM水平变化趋势，能有效判断治疗效果〔9〕。
本次研究中，通过检测不同临床分组患者中的血清半乳甘露聚糖，来观察本实验室运用酶联免疫方法检测GM的有效性和实用性。结果表明 GM 实验的敏感性为69.05%, 特异性为85.37%。其结果与既往报道有一定差别, 可能与预防抗真菌药物使GM量减少, 造成结果假阴性。同样，使用某些药物也可出现假阳性, 在部分食物中也可检测出来,因其可通过受损的肠道黏膜进入血中,也提高了检测的假阳性率〔10〕。因此，对检测结果应结合临床症状做具体分析。
综上所述，应用酶联免疫方法检测血清GM抗原诊断IA操作简单、快速，具有较好的敏感性和特异性。可用于临床早期诊断侵袭性曲霉菌感染。
参考文献:
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作者简介： 王华丽（1989），女，四川成都，医学学士，初级检验师，医学检验，18381015769,861803954@qq.com
论文作者:王华丽
论文发表刊物:《医师在线》2019年3月6期
论文发表时间:2019/5/15
标签：曲霉论文; 阳性论文; 真菌论文; 肺部论文; 阴性论文; 聚糖论文; 血清论文; 《医师在线》2019年3月6期论文;