重庆沙坪坝区中医院, 重庆 400030
【摘要】目的:分析中药配伍对麻杏薏甘汤中苦杏仁苷含量的影响。方法:应用L8(27)正交设计方法,通过HPLC法测定麻杏薏甘汤当中,苦杏仁苷的含量。结果:在中药的配伍中,麻黄以及甘草等对麻杏薏甘汤当中苦杏仁苷的含量影响存在有明显的差异(P<0.05)。薏苡仁对于苦杏仁苷的含量影响效果不明显(P>0.05)。结论:中药配伍中甘草可降低麻杏薏甘汤的苦杏仁苷含量、麻黄能提高麻杏薏甘汤的苦杏仁苷含量,麻黄以及甘草配伍符合组方原则。
【关键词】中药配伍;麻杏薏甘汤;苦杏仁苷含量;影响
麻杏薏甘汤是一张著名的组方,其主要是包括了炙甘草、麻黄、薏苡仁以及杏仁等中草药,该方的主要功效是解表通经、除湿祛寒等,在应用于风湿痹症治疗上有较好的效果。在组方的臣药杏仁当中,主要的功效成分为苦杏仁苷,该成分具抗高氧诱导的肺损伤、免疫抑制、抗肾间质纤维、抗肺纤维化化以及抗动脉粥样硬化等功效。本研究主要以分析中药配伍对麻杏薏甘汤中苦杏仁苷含量的影响。
1基本材料
1.1主要药品及试剂
炙甘草、薏苡仁、杏仁、麻黄等中草药均产自四川中医药大学的中药饮片厂。其中苦杏仁苷对照品由中国药品生物制品检定所提供。水为实验室自制重蒸水,乙腈(色谱纯)以及其他试剂则(分析纯)。麻杏薏甘汤组方取薏苡仁78g、杏仁25g、炙甘草以及麻黄各39g。取3倍组方量的药材进行浸泡60min,并加入10倍量的水加热2h后进行提取,重复进行加热提取各2次。去滤液合并之后减压进行浓缩,于50℃环境下将滤液浓缩到1.26g/ml。再对浓缩液进行减压干燥持续24h,取干燥物研磨过100目筛获得麻杏薏甘汤的提取物。
1.2主要仪器
电热恒温干燥器;HS2000型色谱数据工作站;TG328A型分析天平以及Waters高效液相色谱仪(包括515型高压泵、2487型紫外检测器)。
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2方法
2.1苦杏仁苷含量的测定
2.1.1色谱条件设置
流动相取水:乙腈比例89:11;波长设置210nm;进样量以每次10μL;流速控制为1.0ml/min;UitimateC18液相色谱柱取250mm*4.6mm,5μm;柱温控制为25℃。
2.1.2对照溶液的制备
精密称取4.0mg苦杏仁苷对照品加入到流动相中,分别通过稀释、溶解并摇匀。获得苦杏仁苷含量200μg/ml的对照品溶液。
2.1.3样品溶液的制备
精密称取33.2mg麻杏薏甘汤的提取物并加入到10ml容量瓶中,流动相中溶解后通过超声进行30min处理,后对溶液进行定容并摇匀。经0.45μm微孔滤膜过滤后取得滤液为样品溶液。
2.1.4阴性溶液的制备
称取麻杏薏甘汤组方中炙甘草、薏苡仁以及麻黄,按照上述麻杏薏甘汤的提取物制备方法制备获得阴性溶液。
2.1.5考察方法
(1)专属性
依照上述色谱条件设置(2.1.1)对本方法的专属性进行测定,苦杏仁苷保留16.4min,在测定的过程当中,阴性溶液的杂质不产生干扰现象。
(2)线性关系
精密吸取对照溶液0.05、0.5、1.0、2.0以及4.0ml,分别置于各容量瓶当中稀释、定容并摇匀。精密吸取稀释液10μL后注入到液相色谱仪当中进行测定,测定过程对峰面值进行记录,对记录结果进行线性回归分析,以峰面积作为纵坐标(Y),以对照溶液的浓度作为横坐标(X)。线性结果显示于1.0~80.0μg/ml范围,苦杏仁苷的线性关系较为良好。
(3)精密度的测定
精密吸取10μL对照溶液,依照上述色谱条件设置(2.1.1)进行精密度考察,以结果显示,苦杏仁苷的日间精密度1.23%(n=5)、日内1.16%(n=5),表示研究应用的仪器精密度较好。
(4)回收率的测定
精密称取15.95mg麻杏薏甘汤提取物,其中含苦杏仁苷6.56mg/g,加入对照品,依照上述色谱条件设置(2.1.1)进行回收率的测定。结果显示回收率在1.000~1.028之间,平均回收率1.0185,RSD=80%。
(5)样品稳定性的测定
精密吸取10μL对照品溶液,依照上述色谱条件设置(2.1.1)测定样品稳定性。分别0~24h内每隔2h进样1次。峰面积的记录结果显示,样品的RSD<0.86%,显示在24h内样品有良好稳定性。
(6)L8(27)正交设计
正交试验选择薏苡仁、炙甘草、麻黄3个因素,水平试验以用药以及不用药2种因素,分析因素间存在的交互作用。结果显示,麻黄+杏仁>麻黄+薏苡仁+杏仁>麻黄+炙甘草+杏仁>杏仁>炙甘草+薏苡仁+麻黄+杏仁>杏仁+薏苡仁>杏仁+炙甘草>薏苡仁+杏仁+炙甘草。在薏苡仁+杏仁+炙甘草配伍当中,苦杏仁苷的含量占杏仁配伍组方74.1%,麻黄+杏仁配伍中苦杏仁苷的含量相比较高,接近杏仁配伍组方1.4倍。
3讨论
中医药的领域当中用药的主要优势在于中药配伍,研究中药的配伍规律是当前中药配伍理论的发展与传承的一个有效途径。本研究主要是应用了L8(27)正交设计方法,通过HPLC法测定麻杏薏甘汤当中,苦杏仁苷的含量。
麻杏薏甘汤作为一张由张仲景所提出的著名、古老的组方,其中包含的成分有炙甘草、薏苡仁、杏仁、麻黄。在麻杏薏甘汤臣药杏仁当中,苦杏仁苷是其关键的一种功效成分,在将苦杏仁苷分解后得到的氢氰酸可对人体的中枢神经系统起到较为明显的抑制效果,而一旦若氢氰酸的分解过量,则易是人体发生中毒现象。研究的结果显示,在中药的配伍中,麻黄以及甘草等对麻杏薏甘汤当中苦杏仁苷的含量影响存在有明显的差异(P<0.05)。薏苡仁对于苦杏仁苷的含量影响效果不明显(P>0.05)。不同的配伍组方当中,麻杏薏甘汤当中苦杏仁苷的含量高低顺序为:麻黄+杏仁>麻黄+薏苡仁+杏仁>麻黄+炙甘草+杏仁>杏仁>炙甘草+薏苡仁+麻黄+杏仁>杏仁+薏苡仁>杏仁+炙甘草>薏苡仁+杏仁+炙甘草。在薏苡仁+杏仁+炙甘草配伍中,苦杏仁苷的含量占杏仁配伍组方74.1%,麻黄+杏仁配伍中苦杏仁苷的含量相比较高,接近杏仁配伍组方1.4倍。试验的结果表明在麻杏薏甘汤组方当中苦杏仁苷的含量相对较低,其组方的设置符合中医学当中君、臣、左、史等传统的配伍理论。在臣药的配方当中,应用杏仁与麻黄进行配伍,可起到平喘、止咳功效,而应用薏苡仁则能可以使苦杏仁苷的含量降低,另外,炙甘草则有一种调和药性的作用,该方配伍毒性作用极大减弱,药效较佳。
综上所述,中药配伍中甘草可降低麻杏薏甘汤的苦杏仁苷含量、麻黄能提高麻杏薏甘汤的苦杏仁苷含量,麻黄以及甘草配伍符合组方原则。
论文作者:宋富明
论文发表刊物:《中国医学人文》2018年第6期
论文发表时间:2018/8/8
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