张丽娜何奇
（吉林敖东洮南药业股份有限公司１３７１００）
【摘要】目的：为柴胡的质量评价提供一个指标，从而为以多指标质量评价体系提供依据。方法：采用蒽酮－硫酸比色法，分别测定可溶性多糖和粗多糖的含量。结果：葡萄糖数与吸光度线性良好，Ｒ２＝０９９９３；平均回收率为１０１５５４％，ＲＳＤ＝１７８％。不同产地柴胡多糖河北含量最高，依次是陕西、吉林、安徽。结论：蒽酮－硫酸比色法简便、易行，适合柴胡多糖的含量测定，以控制其质量。
【关键词】：柴胡；不同产地；多糖
【中图分类号】Ｒ２ 【文献标号】Ａ 【文章编号】２０９５－７１６５（２０１５）０７－０４２２－０２
多糖是柴胡有效化学成分之一，是一种良好的免疫调节剂［１］ ，柴胡多搪２Ⅱｃ显示很强的抗溃疡活性［２］。不同产地，相同成分含量也不等。下面通过实验测定不同产地多糖含量的差异。
１ 材料与仪器
１１ 样品来源
（１）吉林（２）安徽（３）河北（４）陕西注：均由吉林农业大学李伟老师鉴定为柴胡。
１２ 仪器
（１）ＵＶ２４０１型可见分光光度计；（２）ＳＢ－３２００型超声波清洗器；（３ＸＳ２０５型电子天平；（４）ＨＨ－６数显恒温水浴锅；（５）ＹＢ－ＩＡ真空干燥箱
１３ 试剂
蒽酮、葡萄糖、浓硫酸、盐酸、无水乙醇等，均为分析纯
２ 实验方法［３］与结果
２１ 多糖类物质提取
可溶性多糖的提取精密称取柴胡粉末１０００ｇ，每个样品都称取三份，分别置１００ｍＬ三角瓶中，加８０％ＥｔｏＨ４５ｍＬ，浸泡３０ｍｉｎ，超声３０ｍｉｎ，静置过滤，重复提取１次，过滤（保存滤渣），两次滤液置１００ｍＬ容量瓶中，以８０％ＥｔｏＨ定容至刻度。
粗多糖的提取将２１中的滤渣晾干，加２％的盐酸４５ｍＬ，置水浴中提取４５ｍｉｎ，放冷，滤过到１００ｍＬ容量瓶中，再提取１次，过滤，洗涤滤纸，以２％盐酸定容至刻度。
２２ 显色剂（蒽酮－硫酸）的制备
取９８％的浓硫酸７６ｍＬ，稀释成ｌ００ｍＬ溶液；精密称取蒽酮０１０００ｇ，置１００ｍＬ容量瓶中，加入上述配制的硫酸溶液至刻度并摇匀，冷却至室温，备用。
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２３ 标准曲线的制备
２３１ 试液的制备葡萄糖标准液：将葡萄糖于６０℃烘１ｈ，逐渐升温至１０５℃至恒重。精密称取１０５５ｍｇ，置１００ｍＬ容量瓶中，用水溶解并至刻度，取６支试管，分别加葡萄糖标准液００ｍＬ、０２ｍＬ、０４ｍＬ、０６ｍＬ、０８ｍＬ、１０ｍＬ，再分次加入水１０ｍＬ、０８ｍＬ、０６ｍＬ、０４ｍＬ、０２ｍＬ、００ｍＬ，各管分别再加入５０ｍＬ的显色剂，于６２０ｎｍ处测定吸光度。
２３２ 标准曲线的绘制各管的吸收度依据浓度顺序分别为０００００、０１４９８、０３０２３、０４５６３、０６１０８、０７３８７。以葡萄糖数为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。得到回归方程为ｙ＝０７４７２ｘ＋０００２７，线性Ｒ２＝０９９９３。
２４ 样品液的制备与测定
２４１ 可溶性多糖的测定取提取液２５ｍＬ，置２５ｍＬ容量瓶中，用８０％乙醇定至刻度。取１０ｍＬ提取液加入试管中，再加显色剂５０ｍＬ。另取一支试管加８０％ＥｔｏＨ，再加显色剂５０ｍＬ，作为空白。置水浴中１０ｍｉｎ，放至室温。于６２０ｎｍ处测定数据，各地柴胡中可溶性多糖平均含量如下：吉林３１２％；安徽３８３％；河北９６４％；陕西３１４％。
２４２ 粗多糖的测定取提取液２５ｍＬ，置２５ｍＬ容量瓶中，用２％盐酸定至刻度，取１０ｍＬ提取液加入试管中，再加显色剂５０ｍＬ，另取一支试管加２％盐酸１０ｍＬ，再加入显色剂５０ｍＬ，作空白实验，置水浴中加热１０ｍｉｎ，放至室温，于６２０ｎｍ处测定数据，各地柴胡中粗多糖平均含量如下：
吉林８２４％；安徽６５２％；河北１０１８％；陕西８６７％。
２４３ 总多糖含量根据可溶性多糖含量和粗多糖含量，计算总多糖的含量，各地柴胡中总多糖含量如下：吉林１１３６％；安徽１０３５％；河北１９８２％；陕西１１８１％。
２５ 回收率实验
精密称取已知可溶性多糖含量的柴胡（吉林）０５ｇ，５份，置锥形瓶中，分别加入２７５３ｍｇ／ｍＬ的葡萄糖对照品溶液２ｍＬ，按前面样品处理法提取，并按样品测定项操作，计算可溶性多糖含量和回收率。第一份回收率１０３９８％；第二份回收率１０１５７％；第三份回收率１００９６％；第四份回收率１０２２４％；第五份回收率９９０２％。平均回收率１０１５５４％ ＲＳＤ＝１７８％。精密称取已知粗多糖含量的柴胡（吉林）０５ｇ，５份，置锥形瓶中，分别加入２７５３ｍｇ／ｍＬ的葡萄糖对照品溶液２ｍＬ，按前面样品处理法提取，并按样品测定项操作，计算粗多糖含量和回收率。第一份回收率１０４９２％；第二份回收率１０
１３２％；第三份回收率１００９９％；第四份回收率１０２４９％；第五份回收率９８９６％。平均回收率１０１７３６％ ＲＳＤ＝２１５％。
３结论
（１）不同产地柴胡的总多糖含量不同，河北的含量最高，依次是陕西、吉林、安徽，含量依次为：１９８２％、１１８１％、１
１３６％、１０３５％。
（２）多糖含量的多少是评价其质量的一个指标，同时应通过多糖含量结合黄酮类化合物含量来评价药材质量，以多指标综合评价其质量。
（３）从回收率和相对标准偏差可看出，采用蒽酮－硫酸比色法测柴胡中的多糖含量，方法简便、易行，适合柴胡多糖的含量测定，以控制其质量。
参考文献
［１］ 张亮，胡海宝南柴胡多搪分离与组成的初步研究［Ｊ］中草药，２（Ｘ）０，３１（９）：６４７－６４８
［２］ 张永文．柴胡果胶多糖的结构与药理活性研究进展［Ｊ］．国外医学中医中药分册，１９９６，１８（４）：２０－２３
［３］ 王斌朝鲜淫羊藿化学成分研究［Ｍ］．吉林农业大学硕士学位论文，２００７
论文作者:张丽娜何奇
论文发表刊物:《医师在线》2015年4月第7期供稿
论文发表时间:2015-6-25
标签：多糖论文; 柴胡论文; 回收率论文; 含量论文; 吉林论文; 可溶性论文; 葡萄糖论文; 《医师在线》2015年4月第7期供稿论文;