马晓玉
彭州市中医医院 四川 彭州 ６１１９００
【摘要】 目的 对比研究续断煮散颗粒与传统饮片在不同煎煮时间点的煎煮效率.方法 采用HPLC测定不同时间点续断煮散颗粒与饮片水煎液中川续断皂苷VI的含量,同时测定不同煎煮时间点水煎液的干膏收率,用综合加权评分法对煎煮效率进行评价,并绘制煎煮曲线.结果 在不同煎煮时间点时续断煮散颗粒的煎出效率均高于其传统饮片的煎出效率,差异均有极显著性(P＜０．０１).结论 与传统饮片相比,煮散颗粒在一定程度上具有更高的煎煮质量. 【关键词】 续断;煮散颗粒;川续断皂苷VI;干膏收率【中图分类号】R２８４．２【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－０９２５－０２
续断为川续断科植物川续断(DipsacusasperWall．exHenry)的干燥根,其味苦、性微温,归肝、肾经,具有补肝肾、续折伤、安胎、止崩漏等功效[１],临床上常用于腰背酸痛,损筋折骨,胎动漏红,血崩下血,以及痈疽疮肿、带下、遗精[２].续断的主要有效成分有皂苷、生物碱、挥发油、多糖及其它生物活性成分[３].中药煮散是指将中药饮片粉碎成颗粒与水共同煎煮后,去渣取汁制成的液体剂型,它保持了传统汤剂的煎煮过程和疗效,能够很好的适应病情需要、随证加减,具有传统汤剂吸收快、疗效高的优点[４－５].续断煮散颗粒根据中药煮散机理[６]而研制,本试验选用川续断皂苷VI和干膏收率为评价指标,比较续断传统饮片与煮散颗粒的煎煮质量及有效成分的溶出[７－８],为煮散颗粒的质量标准研究提供参考. １ 材料HPＧ１１００高效液相色谱仪(紫外检测器、在线脱气装置、自动进样器、二极管阵列检测器、四元梯度泵,美国惠普公司);AgilentChemStation色谱工作站(美国Agilent公司);HypersilBDS色谱柱(１５０mm×４．６mm,５μm,大连依利特分析仪器有限公司);BP２１１D电子分析天平(德国赛多利斯公司);XFB－４００B小型中药粉碎机(吉首市中诚制药机械制造公司);超声清洗器(AS１０２００,天津奥特赛恩斯仪器有限公司). 川续断皂苷VI对照品(批号:１１０７２４－２００５１３,
中国药品生物制品检定所,纯_______度为９３．５％),续断饮片(批号１１０７２９２,四川新荷花中药饮片股份有限公司,产地四川),续断煮散颗粒(实验室自制).乙腈为色谱纯;水为超纯水(实验室自制); 其他试剂均为分析纯. ２ 方法２．１ 供试品溶液制备 分别取８份同一批号的续断传统饮片,每份精密称定５g,每份都用１０倍量水在相同环境中浸泡３０min后,从其中随机取４份进行煎煮,分别在煮沸后５min、１０min、２０min、３０inm 时进行滤过,最后把滤液分别定容至２００ml,备用.剩下的４份样品根据同样的方法分别在煮沸后３０min时进行滤过,各自收集滤液备用,再向每份滤渣中加入１０倍量水,分别在煮沸后５min、１０min、２０min、３０min时进行滤过,最后合并两次滤液,再定容至２００ml,备用.精密吸取上述溶液各２ml于２５ml棕色量瓶中,用甲醇定容,摇匀,经０．４５um 微孔滤膜过滤后的续滤液作为供试品溶液.用同样方法来制备续断煮散颗粒的供试品溶液. ２．２ 测定川续断皂苷VI含量
２．２．１ 色谱条件 色谱柱:HypersilBDSC１８(５μm,４．６mm×１５０mm);流动相: 乙腈－水为３０:７０(体积分数);流速:１．０mL??min－１;柱温:２５℃;进样量２０μl;检测波长为２１２nm;理论塔板数按川续断皂苷VI峰计算应不低于３０００.２．２．２ 溶液制备 对照品溶液的制备精密称取适量的川续断皂苷VI对照品,加甲醇制得对照品溶液浓度为０．２７２３mg??mL－１. 阴性供试品溶液的制备 取不含续断的阴性样品按２．１项下方法制备缺续断阴性样品,作为阴性供试品溶液.２．２．３ 专属性试验 精密吸取上述对照品溶液、阴性供试品溶液和供试品溶液各２０μl,照２．２．１项下的色谱条件进样.结果表明,供试品中川续断皂苷VI色谱峰与相邻色谱峰分离度﹥１．５,理论塔板数按川续断皂苷VI峰计算不低于３０００, 阴性对照在川续断皂苷VI保留时间处无干扰峰出现.２．２．４ 精密度试验 取川续断皂苷VI对照品溶液２０ul连续进样６次,结果得到川续断皂苷VI对照品峰面积均值为６０６．１,RSD＝０．７０％,表明仪器精密度良好.２．２．５ 稳定性试验 精密吸取同一份供试品溶液,按照２．２．１项下相应色谱条件,分别于制样后０h、２h、４h、６h、８h、１０h进样２０μl,记录峰面积,计算含量,结果样品中川续断皂苷VI峰面积均值为５１０．８,RSD＝０．６０％,表明供试品溶液在１０h内稳定.
２．２．６ 重复性试验 对同一批样品溶液,按照２．１项下相应方法分别制备供试品溶液６份,精密吸取各供试品溶液２０ul,按上述相应色谱条件测定,记录峰面积, 计算得到川续断皂苷VI含量均值为１．４３７mg??mL－１,RSD＝１．５５％,表明该方法重复性良好.２．２．７ 加样回收率试验 精密量取已得含量的样品制备溶液１ml(川续断皂苷VI含量为１．４３７mg??mL－１)于２５ml的棕色量瓶中,共６份,分别精密加入川续断皂苷VI对照品溶液(０．５１８mg??mL－１)３ml,按照２．１项下相应方法制备供试品溶液,按２．２．１项下相应色谱条件测定,通过计算,得出川续断皂苷VI的加样回收率平均值为９９．２６％,回收率在９５％~１０５％之间,RSD＝２．８２％,表明该方法的加样回收率较好.２．２．８ 样品含量测定 分别精密吸取２．２．２项下制备的川续断皂苷VI对照品溶液、２．１项下制备的续断煮散颗粒和传统饮片的供试品溶液各２０ul进样,按２．２．１ 项下色谱条件测定.对照品及样品的色谱图如图１所示.
４ 讨论本研究在试验中,煎煮时间主要考察续断煮散颗粒与传统饮片的煎煮时间, 分别测定煮沸后５min、１０min、２０min、３０min、３０＋５min、３０＋１０min、３０＋２０min、３０＋３０min时水煎液的干膏收率和川续断皂苷VI含量,两者综合评分,同时绘制煎出曲线.从图２可知,续断煮散颗粒和传统饮片水煎液在３０＋１０min后,曲线趋向平衡,说明煎煮３０＋１０min时,水煎液干膏收率和川续断皂苷VI含量已达最大值.研究显示,续断煮散颗粒煎出效率明显高于其传统饮片,在一定程度上表明了煮散颗粒在提高饮片利用率和减少煎煮时间方面具有很大的优势[９]. 对中药煮散的研究,结合现代微粉碎技术和中药制剂的工艺和技术是必要的.
临床上中药饮片是以多味药物成方制剂为主,对中药煮散的研究目前多围绕单味药物的有效成分煎出率及粒度、提取时间等问题进行研究,对成方制剂的基础研究很少.中药材粉碎后,在外观鉴别方面有一定的难度,怎样进行质量鉴定,需要相应的试验研究.本研究主要评价指标仍显单一,还应更加深入地在中药现代饮片和传统饮片的药理药效方面进行研究,同时在质量控制方面,参考国内一些先进技术[１０]进行研究.
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论文作者:马晓玉
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年12月供稿
论文发表时间:2016/3/9
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