孟村回族自治县医院 病理科 061000
摘要 目的 探究Her-2、p53、Ki-67在结直肠腺癌组织中的表达及其临床病理特征，为结直肠腺癌患者的预后评估研究提供数据支持。方法 本次研究对象选取我院2014年1月至2018年1月经手术切除的结直肠腺癌标本84例，采用免疫组化法测定患者组织内Her-2、p53和Ki-67的表达，并将其与临床病理学特征进行相关性分析。结果 （1）Her-2在不同浸润深度、淋巴结转移及改良Dukes分期组中表达中差异显著差异（P<0.01），p53在肿瘤大小、不同分化程度及淋巴结转移组中的表达差异显著差异（P<0.01），Ki-67在肿瘤大小、不同浸润深度及改良Dukes分期组中呈差异显著（P<0.01）。（2）在结直肠癌患者组织中，Ki-67与p53的表达呈正相关（r=0.202，P<0.01），Her-2与p53的表达无相关性（r=0.121，P>0.05），Her-2与Ki-67的表达无相关性（r=0.126，P>0.05）。结论 免疫组化方法检测结直肠腺癌中Her-2、p53、Ki-67的表达，明确其与临床病理特征的相关性，为后期结直肠癌的诊疗与预后评估提供依据，同时为后续其靶向治疗的药物研究奠定基础。
关键词：结直肠腺癌；临床表达；免疫组化；人类表皮生长因子受体2
对当前的世界的癌症发病率进行分析可知，直肠腺癌的发病率占恶性肿瘤中的第3位，同时也是病死率极高的一种恶性肿瘤，且其发病率和死亡率均呈现逐年增加的趋势[1,2]。我们对其死亡率高的原因进行分析[3]，不难得出，肿瘤细胞的侵袭和转移是其主要的死亡原因，因此其癌症细胞的转移与侵袭进行定位和分析是控制其死亡率的一种重要措施。通过分析可知，对其原癌基因，抑癌基因及增殖细胞进行标记可以对于癌症细胞的发展进行掌握。由此可知[4,5]，p53基因作为一种抑癌基因，通过对细胞的增殖与分化进行调控而对于细胞的无限制增殖进行抑制。人类表皮生长因子受体2（Her-2）作为一种原癌基因，多发于各个癌症组织中，并已被证明其在胃癌、乳腺癌等癌症中均有阳性表达。Ki-67是当前应用度相对较高的一种增殖细胞标记，是当前肿瘤组织评估中的重要标记[6]。鉴于此，本次研究选取我院2014年1月至2018年1月经手术切除的结直肠腺癌标本84例，采用免疫组化法测定患者组织内Her-2、p53和Ki-67的表达，并将其与临床病理学特征进行相关性分析。为后期结直肠癌的诊疗与预后评估提供依据，同时为后续其靶向治疗的药物研究奠定基础。研究内容现汇报如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
本次研究对象选取我院2014年1月至2018年1月经手术切除的结直肠腺癌标本84例，纳入标准：1）病理学与内科学联合诊断后并进行手术切除的结直肠腺癌患者的组织标本；2）患者术前均未进行任何放疗与化疗。排除标准：合并有其他精神系统疾病。本研究经医院医学伦理相关部门核准，患者家属均签署知情同意书。患者的一般资料如表1所示。
表1 患者一般资料统计
1.2 试剂
DTA抗原修复液（EDTA Antigen Retrieval Solution，AMEKO，经销商：上海联硕生物科技有限公司）。抗人Her-2单克隆抗体（Anti-human HER-2 Monoclonal Antibody，产地/品牌：China/T&L，规格：TL-503，经销商：北京同立海源生物科技有限公司）。兔抗人Ki-67单克隆抗体（产品型号：A10277R，经销商：上海沪峰化工有限公司）。鼠抗人p53单克隆抗体（品牌：Abcam，经销商：上海信裕生物科技有限公司）。
1.3 方法
本次研究的所有标本均与24h内取得，并采用甲醛固定与石蜡包埋后进行切片。采用免疫组化法进行Her-2、p53及Ki-67的检测，其具体步骤均按照说明书严格操作。Her-2、p53及Ki-67分别采用DTA修复液与柠檬酸盐缓冲液进行修复抗原，分别进行5min、3min、3min的高压加热。随后在3%H2O2中滴加各自的抗体，4℃中保存过夜后进行染色与封固。阴性对照以PBS代替第一抗体，阳性对照片由试剂公司提供。
1.4 结果判定
Her-2、p53及Ki-67分别定位与细胞膜、细胞核、细胞核。其中Her-2参考2011年胃癌Her-2的检测指南进行评估。p53根据染色程度与阳性细胞数进行评分，分别为1分、2分、3分，并根据其分数加和分为（-，+，++，+++）。Ki-67根据阳性细胞数进行分级，即（-，+，++）3级。本次研究评分过程均由2名中级以上职称的病理师进行联合评估。
1.5 统计学分析
计量资料采用t检验、配对t检验、秩和检验、配对秩和检验等方法进行处理，计数资料采用χ2检验，Fisher精确检验等方法进行处理，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 Her-2、p53及Ki-67的表达
Her-2、p53及Ki-67分别定位与细胞膜、细胞核、细胞核，其阳性表达结果见图1。
AB C
图1 Her-2、p53及Ki-67的表达（A：Her-2；B：p53；C：Ki-67）
2.2 Her-2、p53及Ki-67的表达与临床病理特征的关系
本次研究结果显示，Her-2在不同浸润深度、淋巴结转移及改良Dukes分期组中表达中差异显著差异（P<0.01），p53在肿瘤大小、不同分化程度及淋巴结转移组中的表达差异显著差异（P<0.01），Ki-67在肿瘤大小、不同浸润深度及改良Dukes分期组中呈差异显著（P<0.01），具体结果见表2。
表2 结直肠腺癌Her-2、p53及Ki-67表达与临床病理特征的关系
2.3 Her-2、p53及Ki-67的相关性分析
本次研究结果显示，在结直肠癌患者组织中，Ki-67与p53的表达呈正相关（r=0.202，P<0.01），Her-2与p53的表达无相关性（r=0.121，P>0.05），Her-2与Ki-67的表达无相关性（r=0.126，P>0.05）。
3 讨论
本次研究结果显示，（1）Her-2在不同浸润深度、淋巴结转移及改良Dukes分期组中表达中差异显著差异（P<0.01），p53在肿瘤大小、不同分化程度及淋巴结转移组中的表达差异显著差异（P<0.01），Ki-67在肿瘤大小、不同浸润深度及改良Dukes分期组中呈差异显著（P<0.01）。（2）在结直肠癌患者组织中，Ki-67与p53的表达呈正相关（r=0.202，P<0.01），Her-2与p53的表达无相关性（r=0.121，P>0.05），Her-2与Ki-67的表达无相关性（r=0.126，P>0.05）。
综上所述，免疫组化方法检测结直肠腺癌中Her-2、p53、Ki-67的表达，明确其与临床病理特征的相关性，为后期结直肠癌的诊疗与预后评估提供依据，同时为后续其靶向治疗的药物研究奠定基础。
参考文献
[1]夏志秀, 王昌亮, 韩彦槊,等. FKBP51在结直肠癌与正常组织中的表达差异及与临床病理特征的关系[J]. 中国医师杂志, 2017, 19(3):362-366.
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论文作者:秦卫忠
论文发表刊物:《世界复合医学》2018年第04期
论文发表时间:2018/6/15
标签：直肠论文; 腺癌论文; 差异论文; 相关性论文; 病理论文; 组织论文; 患者论文; 《世界复合医学》2018年第04期论文;