【摘要】目的：探讨非小细胞肺癌中E-钙黏蛋白、NET-1的表达及意义。 方法：采用免疫组织化学SP法，检测65例NSCLC及10例正常肺组织中E-cadherin、NET-1的表达，并探讨其意义。 结果：（1）E-cadherin在NSCLC中的阳性表达率明显低于癌旁正常肺组织（p =0.000）。NET-1在NSCLC中的阳性表达率明显高于癌旁正常肺组织（p =0.007）。（2）NET-1、E-cadherin在NSCLC中的表达差异与患者性别、年龄、病理类型无关(p >0.05)，但与NSCLC组织的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移相关（p <0.05）。结论： E-cadherin、NET-1的表达越高，NSCLC的分化程度越低，临床分期越晚，淋巴结转移几率越大，恶性程度越高，可作为临床评估非小细胞肺癌恶性程度的指标，对判断NSCLC患者预后有参考价值。
【关键词】非小细胞肺癌；NET-1；E-cadherin
Expressions and Significance of E-cadherin and NET-1 in Non-small Cell lung cancer
LI Hui Fang1，GONG Xing Chun1，SUN Hui Yuan1，Wang Qiang2. (1.Department of Pathology，2. Department of Cardiothoracic surgery，The people’s hospital of Wujin，Changzhoug，Jiangsu 213017，CHINA)
?【Abstract】Objective To explore the expressions and significance of E-cadherin and NET-1 in NSCLC. Methods SP immunohistochemical staining was used to examine the expressions of E-cadherin and NET-1 in 65 NSCLC specimens and in 10 normal lung tissues. Results (1) The positive rate of E-cadherin in lung cancer was significantly lower than those in the normal tissues. The positive rates of NET-1 in lung cancer was significantly higher than those in the normal tissue. (2) E-cadherin and NET-1 expressions were not correlated with age, sex, pathological pattern and tumor position(P>0.05)；but correlated with differential, clinical stage and lymph nodes metastasis (P<0.05)．Conclusions The more higher expressions of NET-1、E-cadherin in NSCLC, the more lower the degree of NSCLC’s differentiation, the more higher the clinical stage, the more chance to lymph node metastasis, and the more higher the malignant degree of NSCLC. NET-1 and E-cadherin may be valuable to judge the prognosis and evaluate the maglignant degree of NSCLC.
[Keywords] NSCLC; NET-1; E-cadherin
非小细胞型肺癌（Non Small Cell Lung Cancer, NSCLC）是肺癌的主要类型之一，约占肺癌总数的80-85%。E-钙黏蛋白（E-cadherin）主要介导同型细胞间的黏附反应，其表达缺失导致肿瘤易于扩散和转移。NET-1（(new EST tetraspan numbered 1，NET-1)）在细胞信号转导、调节、黏附、移动、增生和分化中均起着重要作用 [1]。我们通过检测E-cadherin、NET-1在NSCLC中的表达，探讨两者在评估NSCLC的恶性程度及预后中发挥的作用。
材料与方法
一、病例与标本 收集2010年1月-2015年12月我院手术切除的NSCLC标本65例。全部病例的诊断与临床分期明确。65例标本中男性53例，女性12例；年龄35-86岁，中位年龄60岁。随机取10例NSCLC病人正常的肺组织作为对照组，所有肺组织均作免疫组化及HE染色。
二、主要试剂 鼠抗人单克隆抗体E-cadherin，SP免疫组化检测试剂盒购自福州迈新生物技术公司，兔抗人多克隆抗体NET-1的制备由美国旧金山基因生物技术公司协助完成。
三、 免疫组织化学方法 常规脱蜡水化。组织抗原修复，DAB显色，苏木精复染，常规脱水中性树胶封片。选取已知阳性的组织切片作为阳性对照，未用一抗处理的切片作为阴性对照。
四、结果判断方法 在低倍镜×100 下寻找阳性肿瘤区域。 E-cadherin、NET-1阳性染色均定位于癌细胞的细胞质或细胞膜上，呈棕黄色颗粒，对阳性表达分别采用双评分法、半定量积分法判断。
五、统计学处理 应用SPSS13.5统计分析软件对相关数据进行统计处理。两组间比较采用双向有序列联表关联性分析，其与各临床病理特征之间的关系采用 χ2检验，其与影响生存预后的联合效应采用 Cox比例风险模型进行多因素分析。采用Spearman等级相关分析两指标间的关系。 P<0.05 视为差异有统计学意义。
结 果
一、 NSCLC组与对照组中E-cadherin、NET-1表达情况的比较。
E-cadherin、NET-1均表达于癌细胞的细胞质或细胞膜上（分别为图片1-2，图片3-4）。65例NSCLC中，E-cadherin、NET-1的阳性率分别为56.92%、81.54%；对照组中E-cadherin、NET-1的阳性率分别为100.00%、30.00%。经统计学处理，NSCLC病人中，E-cadherin、NET-1的平均秩次为34.18（=2221.5/65）、40.56（=2636.5/65），对照组病人的平均秩次为62.85（=628.5/10）、21.35（=213.5/10）。Mann-Whitney U统计量依次为76.5、158.5，Wilcoxon W统计量依次为2.222E3、213.5，两法的Z检验统计量完全一致，依次为Z= -4.036，p=0.000（双侧）、Z= -2.707 ，p=0.007（双侧）。其两组人群RD值的分布均有显著性差异。见表1
表1 E-cadherin、NET-1在NSCLC组与正常肺组织中表达的比较
二、NSCLC组织中E-cadherin、NET-1的表达与临床病理因素间的关系
NSCLC组织中E-钙黏蛋白、NET-1的表达与肿瘤的临床分期(F=20.963, p=0.000; F=5.035, p=0.028)、分化程度(F=6.235, p=0.015; F=20.843, p=0.000)及有无淋巴结转移（F=32.514, p=0.000; F=8.232, p=0.006）有显著相关（p<0.05），而与患者性别(F=0.012, p=0.915; F=0.031, p=0.862)、年龄(F=2.262, p=0.138; F=0.000, p=0.987)及病理类型(F=1.050, p=0.309; F=0.006, p=0.938)无显著相关（p>0.05）。见表2
表2 E-cadherin、NET-1的表达与NSCLC临床病理因素的关系
三、 NSCLC组织中E-钙黏蛋白、NET-1表达的相关关系
65例NSCLC组织中E-cadherin与NET-1的表达有相关性（χ2=21.8294，p <0.0001），进一步做spearman等级相关分析，结果发现两者在NSCLC中的表达呈负相关（r=0.7421，p <0.0001）。见表3
表3 E-cadherin、NET-1在NSCLC组织中表达的相互关系
讨 论
非小细胞肺癌的发生、侵袭与转移是恶性肿瘤最本质的生物学特征之一，因此对NSCLC转移和侵袭的研究具有重要的临床意义。
NET-1是由Serru等[1]于2000年在EST数据库中发现的。其在肿瘤细胞的增殖、迁移、内吞作用和诱导血管形成中起重要作用 [2]。 NET-1可以协同肿瘤生长因子促进肿瘤的生长，或识别宿主细胞以外的胞体直接刺激肿瘤细胞的增殖[3-4]。本研究发现肺癌中NET-1的表达较正常肺组织显著升高，且与肺癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移成正相关。因此NET- 1的异常表达可能是引起和维持肺癌恶性表型的原因之一。
E-cadherin的表达降低或缺失可使得肿瘤细胞易于浸润及转移[5]。本研究中显示，E-cadherin在NSCLC中的表达率（56.92%）较对照组（100.00%）明显降低，且随着肺癌恶性程度的进展及淋巴结转移的出现，其表达率均随之下降。
我们通过对65例NSCLC中NET-1、E-cadherin进行联合检测，发现两者在NSCLCL中的表达呈负相关。
综上所述，E-cadherin和NET-1两者在NSCLC中的异常表达均与肿瘤的恶性生物学行为有关，且两者密切相关，提示其可作为临床评估NSCLC患者疾病进展及预后的重要指标。
参 考 文 献
[1]Serru V，Dessen P，Boucheix C，et a1. Seqence and expressionof sevennew tetraspans[J].Biochim Biophys Acta，2000，1478(1):159-163.
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[3]Hou FQ，Lei XF，Yao JL，et al. Tetraspanin 1 is involved in survival，proliferation and carcinogenesis of pancreatic pancreatic cancer[J].Oncology Reports，2015，34(6):3068-3076.
[4] 邢娜娜，张慧慧，谢佳琪等. 敲除TSPAN1抑制人结肠癌细胞的生长和侵袭[J].医学研究杂志，2016，45(1):29-33.
[5] Yang YL，Chen MW，Xian L，et al. Prognostic and clinicopathological significance of downregulated E-cadherin expression in patients with non-small cell?lung?cancer (NSCLC): a meta-analysis [J]. PLoS One， 2014，9 (6): e99763.
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【作者单位】常州市武进人民医院，江苏 常州 天宁区永宁北路2号， 213017
【作者简介】李慧芳（1980-）女，病理科，主治医师，江苏常州人。email:lialyssa@sina.com.；Tel:0513-85579225
【通讯作者】王强，(1979-) 男，心胸外科，副主任医师，硕士，江苏常州人。主要研究方向：食管癌、肺癌的微创治疗。email:wq1588598@163.com
论文作者:李慧芳1,龚幸春1,孙慧元1,王强2通讯作者
论文发表刊物:《医师在线》2016年7月第13期
论文发表时间:2016/9/20
标签：肺癌论文; 组织论文; 细胞论文; 阳性论文; 肿瘤论文; 淋巴结论文; 程度论文; 《医师在线》2016年7月第13期论文;