（1成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室
中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地 四川 成都 611137）
（2 四川省医学科学院?四川省人民医院 四川 成都 610072）
【摘要】 目的：建立UPLC测定喘可治注射液中有效成分淫羊藿苷的方法，考察该注射液高温高湿储存条件下淫羊藿苷的含量变化。方法：采用反相超高效液相色谱法，以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）系统为流动相，流速0.3mL/min，梯度洗脱，柱温35℃，检测波长270nm，进样量5μL。结果：确定了喘可治注射液UPLC分析条件，并检测了加速储存条件下该注射液中淫羊藿苷的含量变化。结论：该UPLC分析方法准确度、精密度、重复性好，50℃和75%相对湿度储存条件下注射液中淫羊藿苷含量变化微小。
【关键词】 喘可治注射液；超高效液相色谱法（UPLC）；淫羊藿苷；稳定性
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）10-0228-02
喘可治注射液的主要成分为4种黄酮类化合物：朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C及淫羊藿苷，因注射剂对主成分含量稳定性要求严格，且2015版药典针对淫羊藿饮片主要测定淫羊藿苷含量情况，故本文就喘可治注射液中指标成分淫羊藿苷进行UPLC分析测定，以实现喘可治注射液更准确有效的质量控制。
1.仪器与试药
Ultimate 3000 U HPLC系统，PDA检测器，Thermo Fisher公司；分析天平(上海市天平仪器厂)；离心机(LC-4016)；真空干燥箱(江苏南京海汪制药机械装备有限公司)；药品稳定性试验箱(LHH-150SD)；
淫羊藿苷对照品（中国食品药品检定研究院）；喘可治注射液（国药四川医药集团有限公司）；实验用水为实验室自制重蒸水；色谱乙腈；分析纯甲酸。
2.方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Waters Acquity UPLC BEH‐C18 色谱柱（2.1 mm×150 mm,1.7μm）；流动相：乙腈（A）-水/0.1%甲酸（B）；梯度洗脱:0～10min（15%A），10～30min（15%～25% A），30～45min（25%～35% A），45～60min（35%～50% A）；柱温35℃；流速0.3mL/min；检测波长270nm；进样量5μL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取干燥的淫羊藿苷对照品2.5mg于10mL容量瓶中，乙腈-0.1％甲酸水溶液（35：65）溶解并定容至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤即得。
2.3供试品溶液的制备
精密量取喘可治注射液1ml，乙腈-0.1％甲酸水溶液(35：65)稀释至10ml，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤即得。
2.4 方法学考察
2.4.1标准曲线 以乙腈-0.1％甲酸水溶液(35：65)为溶剂，取对照品适量，配制含淫羊藿苷10、40、80、120、180、250μg/ml对照品溶液。依“2.1”项下色谱条件进样，以被测物浓度为横坐标x，被测物峰面积为纵坐标y绘制标准曲线，回归方程Y=3.53×107X+52087，r=0.9998。结果表明，淫羊藿苷在0.01～0.25mg/mL浓度范围内线性关系良好。见图1。
图1 淫羊藿苷标准曲线
2.4.2精密度考察 取“2.4.1”项下0.05mg/mL对照品溶液，连续进样5次，以峰面积计算精密度，RSD为0.08%，表明仪器精密度良好。
2.4.3准确度考察 取同一0.05mg/mL对照品溶液，挥干溶剂后加入等量0.05 mg/mL淫羊藿苷对照品溶液，溶解，0.45μm微孔滤膜过滤，进样测定峰面积，计算回收率。见表。
2.4.4重复性考察 取同一0.05mg/mL标准品溶液，连续进样5次，测定含量，得RSD小于1.1%，表明重复性良好。
2.4.5稳定性考察取 同一0.05mg/mL标准品溶液，分别在0、2、4、6、8、12小时进样测定淫羊藿苷含量，得RSD为1.3%，表明该成分在12小时内稳定。
2.5 淫羊藿苷含量测定
取药品稳定性试验箱中50℃、75%相对湿度条件下储存7日的5个批次喘可治注射液，依“2.3”项下方法制备供试品溶液，测定淫羊藿苷含量。
2.6 实验结果
5批次高温高湿储存的喘可治注射液中淫羊藿苷含量分别为99.8%、100.2%、99.3%、99.0%、99.2%，平均含量为99.5%，RSD为0.49%。说明该注射液中淫羊藿苷成分在相对较高的温度和湿度下储存，稳定性良好。
3.讨论
本文建立了UPLC测定喘可治注射液中有效成分淫羊藿苷的方法，以乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相，流速0.3mL/min，梯度洗脱。柱温35℃，检测波长270nm，进样量5μL。试验表明该分析方法精准确度和重复性好，可有效检测淫羊藿苷的含量变化。同时考察该注射液在50℃、相对湿度75%条件下储存7日淫羊藿苷的含量变化，结果表明注射液中淫羊藿苷含量高于标示量的99.5%，说明其耐热耐湿性良好。
【参考文献】
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[4]CFDA标准颁布件[S]．标准号：WS3-839-(Z-164)-2004(Z)-2012．
基金：四川省人民医院院基金2015QN05
论文作者:陈换飞,邹静,白兰,彭婷,张梅
论文发表刊物:《医药前沿》2018年4月第10期
论文发表时间:2018/3/29
标签：注射液论文; 淫羊藿论文; 含量论文; 溶液论文; 甲酸论文; 水溶液论文; 滤膜论文; 《医药前沿》2018年4月第10期论文;