钟子安１、２ 肖劲松１通讯作者 葛北海１ 刘 丽１
１．武汉大学中南医院 湖北 武汉 ４３００７１;２．襄阳市中心医院襄阳 湖北 襄阳 ４４４１１７
【摘要】 目的 通过观察石榴汁对慢性脑低灌注大鼠的认知行为的影响,探讨石榴汁对慢性脑低灌注大鼠认知行为的作用.方法 采用２VO 方法制备慢性脑低灌注模型,用Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆能力.结果 榴汁组逃离潜伏期时间显著少于２VO 组(P＜０．０５);其目标象限时间(８．９５０±２．３７１s) 显著增加(P＜０．０５).结论 榴汁可能改善慢性脑低灌注大鼠的认知行为能力. 【关键词】 石榴汁;慢性脑低灌注;认知障碍; 【中图分类号】R２８５．５【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－１４９５－０１
慢性脑低灌注(chroniccerebralhypoperfusion,CCH)是神经系统疾病中常见的一种慢性缺血性病理改变,致使脑组织长期处于低灌注状态,神经元慢性缺血缺氧,最后导致脑组织不可逆性损伤.石榴汁(pomegranatejuice)富含各种多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎、降脂、抗动脉粥样硬化等多种功能[１].其对慢性脑低灌注大鼠认知行为的影响还未明了.本文拟探讨石榴汁对慢性脑低灌注状态下大鼠的认知行为的作用.１ 材料与方法
１．１ 材料 健康Wistar雄性大鼠４０只,SPF级,购于湖北省疾病预防控制中心,体重２００－２５０g,放置中南医院动物房饲养.购买陕西临潼质好红酸石榴, 经清洗、消毒、榨取、离心和低温真空浓缩器缓慢蒸发制备石榴汁,石榴汁中多酚类物质含量２．４－４．８mg/ml. １．２ 方法１．２．１ 慢性脑低灌注大鼠模型的制备(２VO 模型) 随机分成３组,石榴汁组、２VO 组和假手术组,分别是１６只、１６只、８只.术后３天和灌胃过程中共死亡１７只,死亡率为４２．５％.最后石榴汁组８只,２VO 组７只,假手术组８只.１．２．２ 给药方法 术后１周开始给予药物干预,石榴汁组每天给予２ml石榴汁灌胃;２VO 组与假手术组每天给予２ml糖水灌胃(蔗糖２５０mg,果糖２０mg,葡萄糖２０mg);均于下午进行;共７周.１．２．３ Morris水迷宫空间认知行为学检测 术后第８周,对３组大鼠进行Morri水迷宫的空间学习和记忆能力试验.定位航行实验(placenavigation) 需连续训练５天,观察和记录大鼠潜伏期时间(escapelatency).空间探索试验用于检测大鼠对原平台的空间记忆能力.定位航行实验结束后,间隔１天,去掉水池里的平台,观察并记录大鼠在３０秒内在原先放置平台的第１象限游泳时间,每只大鼠进行４次检测,每次间隔时间l小时.
１．３ 统计方法 数据统计方面,潜伏期时间用均数±标准差表示,双因素方差分析,采用F检验组间比较.目标象限游泳时间用均数±标准差表示,用单因素方差分析,两两比较采用T检验.当P＜０．０５时,具有统计学意义.２ 结果２．１ Morris水迷宫逃离潜伏期试验结果 ３组大鼠的组内平均潜伏期有显著性差异(F４,１００＝５６．０３,P＜０．０１);第４、５天,２VO 组潜伏期时间显著多于假手术组,差异具有显著性(P ＜ ０．０１),而石榴汁组潜伏期时间显著少于２VO 组, 差异具有显著性(P＜０．０５).结果见表１.表１ 石榴汁对慢性脑低灌注大鼠逃离潜伏期的影响(Mean±SD,s)
?:与２VO 组比较,P＜０．０５.３ 讨论２VO 模型常用于慢性脑低灌注损伤研究,永久性结扎双侧颈总动脉后脑组织缺血效果明显,大脑皮质、海马、脑白质和视觉系统最容易受到破坏,皮质与海马的脑血流量减少最为明显,减少达６０－７０％.NiJW[２]研究发现２VO 大鼠海马皮层、CAl区和白质进展性神经元损害和导致认知功能下降.在本研究中,２VO 组大鼠平均潜伏期时间显著多于假手术组,而目标象限游泳时间显著少于假手术组;这说明慢性脑低灌注过程认知功能下降.
石榴汁的多酚类物质含量十分丰富,包括没食子鞣质(gallotannins)、逆没食子酸鞣质(ellagitannin)、鞣花酸(ellagicacid)和花青苷类(anthocyanins),多酚类中又以酚酸与黄酮类化合物为主[３].TurkG[４]研究表明石榴汁是一种纯天然的良好抗氧化物质,石榴汁中的抗氧化活性物质为多酚类化合物,能抗氧化应激作用和清除过氧化氢、过单氧、羟自由基、过氧亚硝酸盐等活性氧自由基,保护脂质过氧化性损伤.Seeram NP[５]等在人大饮用含有逆没食子酸鞣质的石榴汁后血浆中的鞣花酸活性的研究表明,石榴汁有抗氧化效应,对心脑血管病可能有防治作用.在本实验中,石榴汁组较２VO 组的逃离潜伏期时间显著缩短(P＜０．０５),游泳时间在目标象限上显著增加(P＜０．０５);说明石榴汁灌胃的大鼠学认知功能得到提高. 综上所述,石榴汁可以改善慢性脑低灌注大鼠学习认知能力,值得临床上进一步探讨.
参考文献[１] Tranum Kaur,Effectsofgreenteaextractonlearning,memory,behaviorandacetylcholinesteraseactivityinyoungandoldmalerats．J．[ BrainandCognition,(２００８)２５–３０． ２] NiJW．MatsumotokLiHB,etal．NeuronaldamageanddecreaseofcenＧtralacetylcholine levelfollowing permanent occlusion of bilateral[ commoncarotidarteriesinrat．BrainRes,１９９５,６７３:２９０－２９６． ３] SoobratteeMA,NeergheenVS,Luximon－RammaA,AruomaOI,BahorunT．２００５．PhenolicsaspotentialantioxidanttherapeuticaＧ[ gents:mechanismandactions．MutationRes５７９:２００–１３． ４] TurkG ,SonmezM,Aydin M,etal．EffectsofpomegranatejuiceconＧsumptiononspermquality,spermatogeniccelldensity,antioxidantacＧtivityandtestosteronelevelinmalerats,ClinicalNutrition ,２００８(２７)[ ２８９－２９６． ５] NavindraP．Seeram ,RupoLee,DavidHeber,Bioavailabilityofellagicacidinhumanplasmaafterconsumptionofellagitanninsfrom pomeＧgranate(PunicagranatumL．)juice,ClinicaChimicaActa３４８(２００４)６３－６８．
论文作者:钟子安１、２ 肖劲松１通讯作者 葛北海１ 刘丽１
论文发表刊物:《中国综合临床》2015年12月供稿
论文发表时间:2016/3/14
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