湖南省岳阳市中心血站 414000
[摘要] 目的 通过酶免联合核酸检测技术对2015年-2018年岳阳地区无偿献血人群检测结果进行统计分析，讨论利用两种血液筛查检测技术如何缩短病毒检测“窗口期”。 方法 对岳阳地区2015-2018年177052例无偿献血者的血液先进行酶免检测，无反应性血液标本174471例再进行核酸检测，并对结果进行分析。结果 在岳阳地区采供血总量逐年递增的情况下，2015-2018年度无偿献血酶免检测177052例，检出总阳性率为3%，酶免检测不同年度差异比较除抗-HIV无统计学意义外其四项均有统计学意义。而核酸检测174471例，检出HBV/HCV/HIV总阳性率0.05%，低于其他实验室阳性率[1][2]（这是由于本实验室先进行酶免初复两次检测后，无反应性标本再进行核酸检测），核酸检测不同年度比较差异P>0.05无统计学意义。 结论 岳阳地区无偿献血人群酶免检测阳性率较高是ALT和HBsAg两项，总阳性率达到了1.54%和0.64%,这说明了HBV感染是该地区输血传播疾病主要残余风险。而核酸检测技术能有效的缩短病毒检测的“窗口期”，最大限度防止经血液传播疾病，保障临床用血的安全。
关键词：酶免检测技术；核酸检测技术；窗口期；阳性率（不合格率）
Analysis of the results of enzymatic immunoassay combined with nucleic acid detection in volunteer blood donors in Yueyang area
Liu Feng, Sun Ang, Wu Xiaojin, Huang Zhixiang
Yueyang central blood station Clinical laboratory (414,000)
[Abstract] Objective To analyze the results of blood donors in Yueyang area from 2015 to 2018 by enzyme immunoassay combined with nucleic acid detection, and discuss how to shorten the window period of virus detection by using two blood screening techniques. Methods Enzyme immunoassay was performed in 177052 blood donors from 2015 to 2018 in Yueyang area, and nucleic acid was detected in 174471 unresponsive blood samples, and the results were analyzed. Results In the case of increasing total blood collection and supply year by year in Yueyang area, 177052 cases of unpaid blood donation were detected by enzyme immunoassay from 2015 to 2018, the total positive rate was 3%. The difference of enzyme immunoassay in different years was statistically significant except for anti-HIV. The total positive rate of HBV/HCV/HIV was 0.05% in 174471 cases detected by nucleic acid test, which was lower than that in other laboratories [1] [2] (this was due to the first two enzymatic immunity tests in our laboratory, and then nucleic acid test in non-reactive samples). There was no significant difference in nucleic acid test between different years (P > 0.05). Conclusion The positive rates of ALT and HBsAg in unpaid blood donors in Yueyang area are higher, and the total positive rates are 1.54% and 0.64%. This shows that HBV infection is the main residual risk of transfusion-transmitted diseases in Yueyang area. Nucleic acid detection technology can effectively shorten the "window period" of virus detection, maximize the prevention of blood-borne diseases, and ensure the safety of clinical blood use.
Key words: enzyme immunoassay technology; nucleic acid detection technology; window period; positive rate (unqualified rate)
《中华人民共和国献血法》的立法宗旨是“保证临床用血需要和安全，保障献血者和用血者身体健康”[7]，自《献血法》颁布以来，岳阳市献血办经过多方努力，通过建立无偿献血宣传长效机制，严格按照相关规定做好献血前的征询工作，并采用灵敏、快速和严格的献血前初筛试验。并按照《关于做好血站核酸检测工作的通知》的要求，我站2014年10月全面实施核酸检测项目（NAT），并于2015年开始全覆盖无偿献血者样本，两种检测技术（ELISA和NAT）的开展有效的控制了经输血传播的疾病。本文通过对岳阳地区2015-2018年无偿献血者酶免检测和核酸检测阳性结果进行统计学分析，了解核酸检测技术能否有效的缩短病毒检测的“窗口期”，大幅度降低临床用血感染病毒风险，进一步保障临床用血的安全。现将具体分析结果报告如下。
1材料与方法
1.1资料
2015-2018年岳阳市中心血站无偿献血者相关资料：按照年度献血人数、检测方法和检测项目进行结果为阳性的进行统计。
1.2方法
采用SPSS统计软件进行数据分析，数据阳性率比较采用X2检验，当P<0.05为差异具有统计学意义。
1.3仪器与试剂
仪器：酶免检测用仪器：深圳爱康公司的AE288和AE200全自动酶标仪，上海科华生物工程股份有限公司卓越1200生化仪。核酸检测用仪器：Micralab STAR全自动加样仪(瑞士哈密顿公司)，核酸扩增荧光检测仪（美国ABI公司），高速冷冻离心机（湘仪公司）。试剂：酶免检测用试剂：ALT检测试剂由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供，HBsAg检测试剂由北京万泰生物药业股份有限公司和英科新创（厦门）科技有限公司提供，抗-HCV检测试剂由上海科华生物工程股份有限公司和英科新创（厦门）科技有限公司提供，抗-HIV由北京万泰生物药业股份有限公司和英科新创（厦门）科技有限公司提供、抗-TP由英科新创（厦门）科技有限公司和上海科华生物工程股份有限公司提供。核酸检测用试剂：HBV/HCV/HIV核酸联合检测试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供，以上所用试剂符合国家批准检定合格试剂，均在有效期内使用。
1.4检测方法
2015-2018年无偿献血血液标本均使用两套生化分析仪和酶免全自动分析仪进行初复两次检测，经过酶免方法检测为阴性结果（S/CO＜0.7)和ALT小于50U的标本，再进行核酸检测，采用科华核酸血液筛查系统对以上标本进行8人份混检（HBV/HCV/HIV核酸联合检测）。混检阳性结果POOL进行拆分检测，结果分析由系统软件自动判定。
2 结果
2.1 2015-2018年岳阳地区无偿献血者血液酶免检测技术检测结果（表1）
对岳阳地区2015-2018年无偿献血者ALT、HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP各项血液检测项目按年度进行分类并统计学分析，除抗-HIV(P>0.05)无统计学意义外其四项（P<0.05）均有统计学意义，见表1。
2.2 2015-2018年岳阳地区无偿献血者血液NAT检测结果（表2）
对岳阳地区2015-2018年无偿献血者HBV/HCV/HIV核酸联合检测，不合格数按年度进行分类并进行了统计学分析，四年阳性率比较均无统计学意义，见表2。
3 讨论
根据表1统计数据显示，岳阳地区2015-208年无偿献血人数呈逐年递增趋势，年度血液检测阳性率由高到低排列为ALT>HBsAg>抗-HCV>抗-TP>抗-HIV，该阳性率与其它地区基本一致[2][3][4]，本地区HBV感染是该地区输血传播疾病主要残余风险。分年度统计比较除抗-HIV(P>0.05)无统计学意义外其它四项均有统计学意义。2017年出现总阳性率升高，分析升高原因可能与献血前筛查力度不够有关。
根据表2统计数据显示，对2015-2018年岳阳地区无偿献血者标本177052例进行了酶免检测后，无反应性标本174471例再进行核酸检测，阳性结果达到0.05%，年度之间统计无统计学意义，此结果低于湖南省衡阳市0.278%[5]、九江地区0.197%和佛山的0.25%[6]，这种情况的出现与本实验室的检测方法：ALT和酶免检测阴性结果再进行核酸检测，不进行平行检测有关。2015-2018年核酸检测有反应性93例中HBV DNA 93例，其他两项未发现有反应性标本，以上结果可以看出有两部分HBV酶免无法检测出来，一是HBV浓度低无法检出，二是正处于病毒感染“窗口期”和隐匿性感染肝炎病毒，但是核酸检测技术正好能够对这部分漏检乙肝病毒进行筛查。说明核酸技术能够有效缩短病毒检测“窗口期”，是一项血液筛查有效补充试验。以上结论显示HBV感染是岳阳地区主要输血传播疾病主要残余风险，这与酶免检测HBV阳性结果率0.64%为四个检测项目最高的结论一致，为主要输血转播疾病。
综合上述，输血安全是血液工作者永远面临的挑战，经血传播疾病的“窗口期”又是这个挑战中的难点，解决难点当务之急就是如何有效的缩短“窗口期”， 能够有效的缩短血液检测项目的“窗口期”，对ELISA方法漏检的具有感染性的标本，核酸检测方法能够检测出来，酶免联合核酸检测技术的运用，相当构筑了两道牢固的血液安全屏障，最大限度的防止传染病经血传播，确保临床用血安全。
[1] 邓雪莲,安万新,梁晓华等.大连市血液中心血清学检测与核酸检测并行的效果观察[J].中国输血杂志,2012,25(1):38-40.
[2] 林诗雅,王淏,李仲平等.2015年广州地区无偿献血者核酸和ELISA检测结果分析[J].临床输血与检验,2017,19(2):137-141.DOI:10.3969/j.issn.1671-2587.2017.02.013.
[3] 闫玉刚,杨立辉,丁静等.核酸检测与酶免检测在宁夏地区无偿献血者血液筛查中的应用[J].现代养生（下半月版）,2017,(4):32-35.
[4] 严凤好,钟展华,李雪群等.HBsAg、抗-HCV、抗-HIV酶免阴性及单试剂反应性献血者核酸检测结果分析[J].临床输学与检验,2017,19(4):379-381,385.
[5] 王湘屏，郭建波，段荣等.衡阳地区无偿献血者核酸检测结果分析[J].临床输血与检验，2018，20（6）：563-565.
[6] 林俊填，刘知华，何其通等.佛山地区无偿献血人群酶免联合核酸检测结果分析[J].临床输血与检验，2018，20（6）：569-571.
[7] 王珑德，张春生.中华人民共和国献血法释义.北京：法律出版社，1988.1
论文作者:刘锋,孙昂,吴晓晋,黄志翔,刘锋
论文发表刊物:《中国结合医学》2019年第08期
论文发表时间:2019/9/24
标签：核酸论文; 岳阳论文; 地区论文; 统计学论文; 血液论文; 无偿献血论文; 试剂论文; 《中国结合医学》2019年第08期论文;