姚兵[1]2000年在《大鼠消化道GnRH受体的研究》文中研究说明促性腺激素释放激素(GnRH)是一种含十个氨基酸的肽类激素，首先从哺乳动物的下丘脑中分离得到，被认为是性腺激素从脑垂体释放的生理调节因子，它由下丘脑神经内分泌细胞合成，以脉冲方式分泌，经下丘脑-垂体-门脉循环进入垂体前叶。在垂体前叶内，GnRH作用于促性腺激素分泌细胞特异性的GnRH受体，通过受体的介导，刺激LH和FSH的分泌，从而调节性腺内配子形成和激素功能。最近的研究发现GnRH及其受体可存在于下丘脑-脑垂体外，如：性腺(卵巢、睾丸、乳腺、前列腺和胎盘等)、肾上腺皮质中，对这些组织和器官的正常功能起调节作用。同时它们还存在于一些性腺轴起源的肿瘤及非性腺轴起源的肿瘤如：卵巢癌、肺癌、胰腺癌、结肠癌等细胞上，对这些肿瘤细胞的生长起调控作用。 我们先前的研究发现GnRH存在于大鼠的胃、肠、胰系统，GnRH mRNA也存在于上述器官。说明大鼠消化道能自身合成GnRH。同时，免疫组织化学染色发现大鼠颌下腺和胰脏有GnRH受体免疫反应性。说明它们是GnRH的靶器官。那么，大鼠消化道是否有GnRH受体的存在，消化系统GnRH受体的基因序列如何，GnRH对消化系统有何功能意义，均未见报道。所以我们在先前研究的基础上，采用免疫组织化学、原位杂交、RT-PCR、基因克隆测序及ELISA技术研究了GnRH受体、GnRH受体mRNA在大鼠消化道中的定位，
姚兵, 黄威权, 孙岚[2]1999年在《大鼠消化道促性腺激素释放激素受体的免疫组织化学研究》文中提出目的探讨大鼠消化道是否存在ＧｎＲＨ受体及其定位。方法采用兔抗ＧｎＲＨ抗独特型抗体的免疫组织化学ＡＢＣ法。结果胃底腺壁细胞、胃小凹上皮细胞及肌间神经丛的副交感神经节细胞呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。三段小肠绒毛上皮细胞、潘氏细胞、十二指肠腺上皮细胞以及小肠肌间神经丛副交感神经节细胞，均呈较强的ＧｎＲＨ受体免疫反应性。在盲肠、结肠和直肠，粘膜上皮细胞、肠腺上皮细胞及肌间神经丛呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。阳性物质均分布在胞质内，胞核呈阴性。结论大鼠消化道广泛分布有ＧｎＲＨ受体，其分布模式与先前ＧｎＲＨ及ＧｎＲＨ－ｍＲＮＡ的相类似。说明胃肠道的一些细胞分泌的ＧｎＲＨ可能以自分泌或旁分泌的方式参与消化功能的调节。
刘晓宁[3]2004年在《GnRH对大鼠消化道内分泌细胞功能影响的研究》文中研究说明经典的神经内分泌理论认为促性腺激素释放激素(Gonadtropin-releaing hormone，GnRH)是作为生殖系统的一种关键性神经调节物质，以脉冲方式分泌，通过垂体门脉系作用于垂体前叶促性腺激素细胞，刺激卵泡刺激素(follicle stimulating hormone，FSH)和黄体生成素(luteinizing hormone.LH)分泌，这两种激素再刺激卵巢和睾丸分别合成并分泌相应的甾体类性腺激素，从而形成调控生殖器官发育和配子生成的下丘脑-垂体-性腺轴系，调节生殖系统的功能。随后，人们发现GnRH同样广泛存在于外周神经组织，内分泌器官和生殖器官。 我们先前的研究发现，消化道系统既能表达GnRH又能表达GnRH受体。GnRH对胃底腺的壁细胞及平滑肌细胞的功能均起明显的调节作用。但是GnRH对胃肠内分泌细胞的功能是否有调节作用未见报道。消化道内存在多种激素，使得消化道成为体内最大的内 第四军医大学硕士学位论文分泌器官。目前发现多种消化激素既可在消化道内表达又可在多种神经内分泌细胞中表达。本项研究主要研究了消化道内一种新发现的激素GnRH与其他激素的相互作用。通过给大鼠胃腔直接注射GnRH类似物阿拉瑞林(GnRll一A)从而模拟外分泌产生的GnRH，并以免疫组织化学、HPLC一ECD和酶联免疫分析等方法对阿拉瑞林刺激后胃及十二指肠内胃泌素、生长抑素和5一HT免疫反应细胞，血清中胃泌素、生长抑素和5一HT含量进行检测。利用梯度浓度的GnRH类似物对离体的胃窦，十二指肠组织进行体外组织块孵育，收集培养上清液。检测不同浓度阿拉瑞林对消化激素分泌的影响。结果发现:[1〕注射GnRH一A后，肠腔内GnRH类似物能队显增加胃肠壁胃泌素阳性细胞的密度及胃液、血液中胃泌素的含量，说明GnRH对消化道胃泌素的合成及分泌有明显的促进作用。〔2」注射GllRI通一A后，肠腔内GnRH类似物能明显降低胃肠壁生长抑素阳性细胞的密度及血液、胃液中生长抑素的含量，说明G:RH对消化道生长抑素的合成及分泌具有明显的抑制作用:仁3口注射GnRH一A后，胃及十二指肠内5一HT免疫反应阳性细胞密度显著增多，但血清中5一HT含量显著减少。由此表明外分泌的GnRH对于5一HT的释放起明显抑制作用，但对5一HT的合成可能不产主影响。阵」GnRH类似物在10·”m。!/L一10一smol/L之间对大鼠体外十二指肠中胃泌素产生浓度依赖性促进作用，而对生长抑素则是浓度依赖性抑制作用，但在10一smol/L一10一smol/L之间对胃泌素为浓度依赖性抑制作用，对生长抑素为浓度依赖性促进作用。GnRH一A在体外对胃组织的胃泌素、生长抑素的分泌均不起作用。 综上所述，我们认为胃腔内的Gn尺H类似物可能首先和壁细胞上GnRE受体结合，直接抑制壁细胞胃酸的分泌，由于胃酸分泌减少反馈性地刺激胃泌素细胞，促进其合成及分泌胃泌素，胃酸分泌减少同时也反馈性的抑制生长抑素的释放，反馈性地抑制胃肠壁内EC细胞分泌5一HT。GnRH类似物对大鼠十二指肠体外孵育中胃泌 第四军医大学硕士学位论文素、生长抑素是双向调节作用。除此作用外，胃泌素、生长抑素之间还存在着相互调节作用，这可能是GnRH类似物以外分泌的形式直接作用于十二指肠胃泌素、生长抑素细胞的结果。EC细胞是否会有GnRH受体，GnR壬1能否直接抑制5一HT的分泌，是否还存在其它机制，有待进一步研究。
高彬, 姬秋和, 黄威权[4]2004年在《大鼠消化道促性腺激素释放激素受体和胰高血糖素的免疫组织化学》文中进行了进一步梳理目的 :观察大鼠胃肠道胰高血糖素免疫反应阳性细胞 (EG细胞 )分布情况及大鼠回肠促性腺激素释放激素(GnRH)受体和高血糖素的共存关系。方法 :免疫组化SABC法。结果 :EG细胞散在分布于大鼠回肠和结肠的腺上皮细胞间 ,阳性物质分布于细胞质。大鼠胃、十二指肠、空肠未见EG细胞分布。回肠邻片免疫染色结果显示EG细胞呈GnRH受体免疫反应阳性。结论 :大鼠胃肠道内只有回肠和结肠存在胰高血糖素细胞。回肠内的胰高血糖素细胞可能存在GnRH受体 ,GnRH可能以自分泌或旁分泌的方式对肠道内EG细胞所分泌的胰高血糖素进行调节。
姚兵, 黄威权, 蒲若蕾, 孙岚, 张荣庆[5]2000年在《大鼠消化道促性腺激素释放激素受体mRNA的原位杂交研究》文中认为目的 探讨大鼠消化道是否存在 Gn RH受体 m RNA及其定位。 方法 用原位杂交组织化学法。 结果 胃底腺壁细胞、胃小凹上皮细胞可检测到较强的 Gn RH受体 m RNA杂交信号。3段小肠绒毛上皮细胞、小肠腺细胞可检测到较强的 Gn RH受体 m RNA杂交信号。盲肠、结肠和直肠的粘膜上皮细胞、肠腺上皮细胞也能检测到 Gn RH受体 m RNA杂交信号。信号物质均分布在胞质内 ,胞核呈阴性。 结论 大鼠消化道能合成 Gn RH受体。Gn RH也是一种胃肠激素 ,它由消化系统自身合成 ,又作用于胃肠道参与胃肠功能的调节
谢菲[6]2008年在《大鼠肝细胞GnRH受体的表达及其影响的研究》文中研究指明许多研究已经证明促性腺激素释放激素及其受体存在于下丘脑-垂体轴以外的器官和组织,例如胎盘滋养层细胞、前列腺、胰腺及一些肿瘤组织中[1.2.3]。Chegini等[4]首次证明了子宫平滑肌细胞上存在GnRH及其受体的mRNA。我们先前的研究也报道了胃肠胰系统能自身合成GnRH[5],而且证实胃肠胰系统及甲状腺均含有GnRH受体免疫反应阳性物质[6.7]。GnRH在下丘脑-脑垂体轴外生成的同时,其亦发挥生物学效应,Gurrie等[8]发现GnRH可以使胎盘滋养层细胞内[Ca2+]明显升高,进而参与细胞内的信号传递过程。Tache等[9]发现脑室及静脉注射GnRH类似物后,胃液的pH值升高,其作用机制可能是GnRH类似物通过抑制迷走神经而发挥间接的调节作用。近年来在临床上观察到药理剂量的GnRH类似物可导致糖代谢紊乱,但其发生机制尚不明确,有人认为可能与使用GnRH类似物时机体的性激素改变有关;GnRH对葡萄糖代谢是否存在直接作用未见报道。肝脏是物质代谢的主要器官,同时胃肠胰系统能自身合成GnRH,因此,肝脏细胞是否存在GnRH受体,GnRH是否在GnRH受体介导下对肝糖代谢产生影响是值得关注的问题。研究方法:取大鼠肝脏组织制成切片,运用免疫组织化学SABC法和原位杂交技术,观察大鼠肝脏细胞是否存在GnRH受体;用原代培养法培养大鼠肝细胞,GnRH受体免疫组化、糖原染色比较不同浓度葡萄糖培养液对GnRH受体表达的影响。研究结果:(1):大鼠肝细胞呈GnRH受体免疫反应阳性,阳性反应物质分布在细胞的细胞膜和细胞浆中,细胞核呈阴性反应。一个肝小叶内,靠近中央静脉的肝细胞,其GnRH受体免疫反应较强,着色较深,远离中央静脉的肝细胞,其GnRH受体的免疫反应较弱,着色较浅。(2):大鼠肝细胞GnRH受体的mRNA杂交信号物质呈深棕色,背景不着色,反差明显。信号物质分布于细胞质,细胞核未检测到GnRH受体mRNA杂交信号,呈阴性反应。一个肝小叶内,靠近中央静脉的肝细胞,其GnRH受体mRNA杂交信号较强,着色较深,远离中央静脉的肝细胞,其GnRH受体mRNA杂交信号较弱,着色较浅。(3):用SABC免疫组织化学染色法分别对葡萄糖浓度1g/L、葡萄糖浓度2g/L培养液培养的大鼠肝细胞行GnRH受体的免疫组织化学染色;镜下观察两种葡萄糖浓度培养液培养条件下GnRH受体的表达,用图像分析软件对其进行光密度值分析,结果显示正常葡萄糖浓度(1g/L)培养时肝细胞GnRH受体的表达强度明显高于高糖培养液(2g/L)中肝细胞的表达(P<0.01)。结论:(1)大鼠肝细胞呈GnRH受体免疫反应阳性,又有GnRH受体mRNA杂交信号,说明大鼠肝脏在转录和翻译水平能自身合成GnRH受体,同时此部位GnRH受体的分布具有中央静脉旁肝细胞增多的特点。(2)GnRH受体的表达强度与细胞外液葡萄糖浓度有关,表现为正常葡萄糖浓度培养时肝细胞GnRH受体表达强度明显高于高糖浓度培养,说明高浓度葡萄糖使肝细胞GnRH受体表达下调,提示肠胰系统产生的GnRH可能通过其在肝细胞上的受体调节糖代谢。
方之平, 潘黔生[7]2004年在《GnRH及其受体在2种真骨鱼消化系统中存在的免疫细胞化学证据》文中认为用链霉亲和素-生物素化过氧化物酶复合物(streptavidinbiotin peroxidasecomplex,SABC)免疫细胞化学方法,使用促性腺激素释放激素(gonadotropin releasinghormone,GnRH),促性腺激素释放激素受体(gonadotropin releasinghormonereceptor,GnRHR)2种抗血清对黄颡鱼(Pelteobagrusfulvidraco)和鲇(Silurusasotus)的食道、贲门、胃底、幽门、前肠、中肠、后肠和胰中的免疫活性内分泌细胞进行了定位。结果表明:在鲇的食道、胃、肠、肠固有膜、肠肌间神经丛、胰腺和胰岛中均存在着GnRH和GnRHR免疫活性阳性反应;黄颡鱼消化系统中除了在食道和胰岛中未见GnRH和GnRHR的免疫活性阳性反应外,其他部位均有阳性反应,而且GnRH和GnRHR分泌细胞的分布模式相类似。说明胃肠道中GnRH分泌细胞可能以自分泌或旁分泌方式参与消化功能的调节。本研究首次证实在鱼类的消化系统中存在着GnRH及其受体的免疫活性内分泌细胞,可为GnRH功能的多样性等研究领域提供新的形态学依据。
尚丽丽, 冯碧云, 叶海辉, 黄辉洋, 李少菁[8]2011年在《雄性三疣梭子蟹神经器官GnRH受体的免疫组织化学研究》文中进行了进一步梳理采用MaxVisionTM免疫组织化学方法,以兔抗人GnRH受体的多克隆抗体,对雄性三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的神经器官(视神经节、脑神经节和胸神经团)进行免疫组织化学定位.结果显示:GnRH受体的免疫阳性物质在雄性三疣梭子蟹视神经节、脑神经节和胸神经团的多个部位都有较为广泛的存在,定位在神经细胞的细胞质和神经髓质中,不同神经器官GnRH受体的免疫阳性强度有一定的差异.三疣梭子蟹神经器官存在GnRH受体的免疫阳性物质,为GnRH参与其神经调节作用提供了形态学依据.
宋聪颖[9]2011年在《孕酮、干扰素τ对牛子宫内膜细胞GnRH信号传递依赖通路基因表达的影响》文中研究指明促性腺激素释放激素(gonadotropin-rel easing hormone, GnRH)是生殖过程中最重要的激素,由下丘脑合成并以脉冲方式释放,诱导促性腺激素——促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的合成和分泌。GnRH信号传递主要依赖三个信号通路：环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)信号通路,肌醇磷脂(phosphoinositide)信号通路,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)信号通路。以荷斯坦奶牛子宫为材料,用组织块法在体外培养子宫内膜细胞。采用实时荧光定量PCR研究孕酮和干扰素T对子宫内膜细胞中GnRH信号传递依赖通路基因mRNA表达的影响。结果如下：利用组织块法成功培养出奶牛子宫内膜细胞,包括腺上皮细胞和间质细胞,细胞传代可正常生长,且以间质细胞为主。孕酮和干扰素τ对荷斯坦奶牛子宫内膜细胞的GnRH信号传递依赖通路基因mRNA的表达具有调节作用。孕酮和干扰素τ对Gs mRNA表达起到抑制作用,对照组表达量极显著的高于三个处理组(P<0.01)。孕酮和干扰素τ对AC mRNA表达起促进作用,四个处理组中,孕酮处理组AC mRNA表达量最高,且显著高于对照组表达量(P<0.05)。孕酮和干扰素τ对PKA mRNA表达起促进作用,孕酮和干扰素τ处理组PKA mRNA表达量最高,极显著的高于对照组(P<0.01)。孕酮和干扰素τ对CREB mRNA表达都起促进作用,干扰素τ处理组CREB mRNA表达量最高。干扰素τ处理组和孕酮和干扰素τ处理组的CREB mRNA表达量极显著的高于对照组(P<0.01)。孕酮对Gq/11 mRNA表达有显著的促进作用(P<0.05),而干扰素τ对Gq/11 mRNA表达有显著的抑制作用(P<0.05)。孕酮和干扰素τ对PLCβmRNA表达起促进作用,干扰素τ处理组PLCβmRNA表达量最高。干扰素τ处理组PLCβmRNA表达量要极显著的高于对照组(P<0.01),孕酮处理组和孕酮和干扰素处理组表达量显著高于对照组(P<0.05)。孕酮和干扰素τ对IP3R mRNA表达起促进作用,干扰素τ显著的促进牛子宫内膜细胞IP3R mRNA表达(P<0.05)。孕酮和干扰素τ对CaM mRNA表达起促进作用,干扰素τ处理组CaM mRNA表达量最高,极显著高于对照组(P<0.01)。孕酮处理组CaM mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05)。孕酮和干扰素τ对MEKK mRNA表达起促进作用,干扰素τ处理组MEKK mRNA表达量最高,极显著高于对照组(P<0.01)。干扰素τ对MKK3/6 mRNA表达起促进作用,孕酮对MKK3/6 mRNA表达没有影响。孕酮和干扰素τ对p38MAPK mRNA表达起促进作用,干扰素τ处理组p38MAPK mRNA表达量最高,其次是孕酮处理组。四个处理组之间,p38MAPK mRNA表达量差异不显著(P>0.05)。
尚丽丽, 冯碧云, 黄辉洋, 叶海辉, 李少菁[10]2010年在《利用免疫组化方法初步鉴定雌性三疣梭子蟹视神经节GnRH受体》文中研究表明为了研究促性腺激素释放激素(GnRH)受体在甲壳动物视神经节中的存在及分布情况,采用MaxVisionTM免疫组织化学方法,以兔抗人GnRH受体的多克隆抗体,对不同发育期雌性三疣梭子蟹的视神经节进行了免疫组织化学定位。结果显示,GnRH受体的免疫阳性物质在视神经节的多个部位,视神经层、视外髓、视内髓、视端髓及X器中都有较为广泛的存在,在视外髓、视内髓与X器处的神经分泌细胞中尤为明显。不同发育期的雌性三疣梭子蟹视神经节GnRH受体的免疫阳性分布位置相似,免疫阳性强度存在一定的差异。三疣梭子蟹视神经节存在的GnRH受体免疫阳性物质,为GnRH参与视神经节调节作用提供了形态学依据。
参考文献：
[1]. 大鼠消化道GnRH受体的研究[D]. 姚兵. 第四军医大学. 2000
[2]. 大鼠消化道促性腺激素释放激素受体的免疫组织化学研究[J]. 姚兵, 黄威权, 孙岚. 解剖学报. 1999
[3]. GnRH对大鼠消化道内分泌细胞功能影响的研究[D]. 刘晓宁. 第四军医大学. 2004
[4]. 大鼠消化道促性腺激素释放激素受体和胰高血糖素的免疫组织化学[J]. 高彬, 姬秋和, 黄威权. 解剖学杂志. 2004
[5]. 大鼠消化道促性腺激素释放激素受体mRNA的原位杂交研究[J]. 姚兵, 黄威权, 蒲若蕾, 孙岚, 张荣庆. 解剖学报. 2000
[6]. 大鼠肝细胞GnRH受体的表达及其影响的研究[D]. 谢菲. 第四军医大学. 2008
[7]. GnRH及其受体在2种真骨鱼消化系统中存在的免疫细胞化学证据[J]. 方之平, 潘黔生. 水产学报. 2004
[8]. 雄性三疣梭子蟹神经器官GnRH受体的免疫组织化学研究[J]. 尚丽丽, 冯碧云, 叶海辉, 黄辉洋, 李少菁. 厦门大学学报(自然科学版). 2011
[9]. 孕酮、干扰素τ对牛子宫内膜细胞GnRH信号传递依赖通路基因表达的影响[D]. 宋聪颖. 四川农业大学. 2011
[10]. 利用免疫组化方法初步鉴定雌性三疣梭子蟹视神经节GnRH受体[J]. 尚丽丽, 冯碧云, 黄辉洋, 叶海辉, 李少菁. 水产学报. 2010
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