王玉琪
浙江大学医学院附属儿童医院 310052
【摘 要】目前：通过对比酶联免疫吸附法（ELASA）检测肺炎支原体抗体（MP-IgM）以及RNA恒温扩增检测肺炎支原体（MP）RNA的两种检测方法，探讨以上两种检测方法在临床肺炎支原体感染中的应用。方法：将对208例2015年6月到12月因肺炎入住我院的患儿，根据年龄分成两组：A组（0~3岁，n=128），B组（3~12岁，n=80），分别留取呼吸道分泌物进行肺炎支原体 RNA检测，抽取静脉血进行非肺炎支原体抗体IgM测定，比较以上两种检测方法的优缺点。结果：208例患中，MP-IgM阳性率34.1%（71/208），MP RNA检测结果阳性共率31.2%（65/208），两者比较差异无统计学意义（P<0.05）。结论：肺炎支原体RNA测定以及肺炎支原体抗体IgM测定均是诊断儿童肺炎支原体感染的有效指标，二者联合检测可以提高肺炎支原体临床诊断，为治疗提供了有力的依据。
【关键词】肺炎支原体；肺炎支原体抗体；酶联免疫吸附法；RNA恒温扩增
【中图分类号】R375+.2【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-05-136-01
肺炎支原体是（MP）是小儿呼吸道感染常见的病原体之一，可引起上呼吸道及下呼吸道感染，尤其是社区获得性肺炎（CAP）的重要病原[1]。目前针对肺炎支原体感染的临床实验室检测方法有很多，血清学检测是目前MP感染的常规实验室手段[1]，利用酶联免疫吸附试验，如检测持续高滴度MP-IgM或恢复期抗体滴度较急性期4倍或4倍以上变化可诊断。近年随着分子生物学技术的发展，RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT）技术应用于临床，为肺炎支原体感染的早期诊断提供了新的检测方法。本研究对2015年6月到2015年12月因“肺炎”住院的患儿，选取208例疑似肺炎支原体感染的患儿，按照年龄分组（具体如下），分别对各组每位患儿采集呼吸道分泌物及静脉血，每位患儿均送检进行肺炎支原体 RNA及肺炎支原体抗体IgM测定，现将结果报告如下。
1.资料与方法
1.1 一般资料
选择2015年6月1日~2015年12月31日在本院住院的疑似MP呼吸道感染的患儿208例，其中男性106例，女性102例，年龄1个月~13岁。根据年龄分为两组，A组（0~3岁，n=128），B组（3~12岁，n=80）。两组患者的一般资料具有可比性（P<0.05）。
1.2 仪器与试剂
7500 Real Time PCT System（Applied Biosystems）；酶标仪（BioTek Instrument.Inc.）；酶联免疫吸附法试剂盒（德国，欧蒙医学实验诊断股份公司）；肺炎支原体（MP）核酸检验试剂盒（上海仁度生物科技有限公司）。
1.3方法
用灭菌棉签采集受试者咽部样本（大于1岁患儿）或痰液（小于1岁）行肺炎支原体 RNA检测，同时采集患儿静脉全血，常规分离血清后检测肺炎支原体抗体（MP-IgM）测定。操作方法均严格按照试剂盒说明书进行。
1.4 肺炎支原体肺炎临床诊断标准：持续咳嗽，可伴有发热，白细胞计数正常或升高，X线提示两肺均匀一致改变的片状阴影或大叶性肺炎改变。
1.5 统计学处理 采用SPSS 18.0软件对所得数据进行统计分析，资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 同一患儿的肺炎支原体 RNA与肺炎支原体抗体IgM检测阳性率比较：208例患儿中，ELASA法测定血清MP-IgM阳性率29.3%（61/208），RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT）法测定痰液标本或咽拭子的MP RNA阳性率34.6%（72/208），两者比较没有统计学意义（P>0.05）。
2.2 两组内肺炎支原体RNA与肺炎支原体抗体IgM检测阳性率比较：A组中，MP RNA阳性率明显高于同组MP-IgM阳性率（P<0.01）；B组中，MP RNA与MP-IgM检测阳性率无明显差异（P>0.05）。
表1 AB两组中两种MP检测方法阳性率的比较（例）
3 讨论
肺炎支原体（MP）是引起儿童呼吸道感染，尤其是社区获得性肺炎的常见病原体之一，临床表现为干咳、发热，部分患儿可出现胸腔积液、肺纤维化，肺外损害，如皮肤、胃肠道、血液系统损害、骨关节肌肉、中枢神经系统、心血管系统等[2-4]。肺炎支原体感染症状可持续或迁延数周或数月，常可引起慢性咳嗽和反复呼吸道感染，还可能引起喘息。肺炎支原体感染患儿临床表现常不典型，常规抗生素治疗效果欠佳，因此，早期诊断对临床治疗有着重要意义。目前，多种针对肺炎支原体早期抗体IgM的检测方法，具有灵敏度高，特异性强，操作简便快速的特点，已作为早期诊断肺炎支原体感染的客观指标，广泛应用于临床，随着分子生物学的进一步发展，核酸测定技术进一步应用于肺炎支原体检测中。本研究结果显示，疑似支原体感染的208例患儿中，采用ELASA法测定血清肺炎支原体IgM阳性率29.3%，SAT法测定痰液标本或咽拭子的MP RNA阳性率34.6%，两者比较没有统计学意义（P>0.05），说明肺炎支原体RNA测定针对肺炎支原体感染具有较高的诊断准确性。
结果还显示在A、B两组内两种检测手段阳性率呈现了不同结果，A组中的肺炎支原体RNA的阳性率高于肺炎支原体IgM的检测（P<0.01），B组中两种检测方法对肺炎支原体感染阳性率检测无明显差异，可能与婴儿免疫系统发育不完善，当肺炎支原体感染后不能产生或产生效价较低的抗体而导致漏诊有关[5]，另外，核酸检测受年龄影响较小，也可能使得检测的阳性率较高。这提示我们针对呼吸道分泌物肺炎支原体RNA方法可能更适于年幼儿或者免疫损害患儿的肺炎支原体感染的早期诊断[5]。B组中，两种检测方法阳性率分别相比较无统计学意义（P>0.05），提示RNA恒温扩增技术检测MP结果稳定，在肺炎支原体感染早期诊断具有较高的灵敏度，同时操作简便，与肺炎支原体抗体IgM同时检测，可避免由于标本采集时间产生的假阴性结果，从而提高临床诊断，为临床治疗提供有力的依据。
综上所述，肺炎支原体RNA检测及肺炎支原体康抗体IgM在儿童肺炎支原体感染的临床诊断中均有较高的价值，对于年幼儿或者免疫功能缺陷的患儿，肺炎支原体RNA检测具有更高的阳性率；二者联合应用可提高检测的准确性，值得临床。
参考文献：
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[5]Kim NH，Lee JA，Eun BW，et a1．Comparison of poly-merase chain reaction and the indirect particle agglutination antibody test for the diagnosis of Mycoplasma pneu—moniae pneumonia in children during two outbreaks[J]．Pediatr Infect Dis J，2007，26（10）：897-903．
论文作者:王玉琪
论文发表刊物:《系统医学》2016年第5期
论文发表时间:2016/5/26
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