周燃 张晓 李想 李容波 朱素梅 马晓云 粟敏（通讯作者）
长沙医学院，基础医学院 长沙 410000
【摘 要】目的 探讨辣椒素（Capsaicin，CAP）对PM2.5所致小鼠肺损伤的影响。方法 通过鼻腔滴注大气颗粒物PM2.5悬液的方法建立PM2.5致肺损伤小鼠模型，以不同浓度辣椒素溶液灌胃建立辣椒素干预组模型，实验分为空白对照组、肺损伤模型组、低浓度辣椒素溶液干预组、中浓度辣椒素溶液干预组、高浓度辣椒素溶液干预组。通过比色法测定小鼠肺组织匀浆中SOD、GSH-PX、MAD水平，严格按照试剂盒说明书操作；在光镜下观察各组小鼠肺组织病理学改变。实验数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果 比色法测定实验各组肺组织匀浆中SOD、GSH-PX、MAD含量示：与空白对照组比较，肺损伤模型组小鼠SOD、GSH-PX活力明显降低（P<0.05）；与肺损伤模型组相比，CAP干预组SOD、GSH-PX活力明显升高（P<0.05）；与空白对照组相比，肺损伤模型组小鼠肺组织MDA水平明显升高（P<0.05）；与肺损伤模型组相比，CAP干预组小鼠MDA水平明显降低（p<0.05）
【关键词】辣椒素；PM2.5；小鼠肺组织的影响
大气污染是目前广受重视的环境问题，PM2.5细颗粒物可直接入侵呼吸系统，造成气道和肺内的炎症反应及慢性损伤，并能够诱发和加重多种疾病[1]。2012年联合国环境规划署公布的《全球环境展望5》指出，每年有70人死于因臭氧导致的呼吸系统疾病，并且有近200万过早死亡的病例与颗粒物污染有关[2]。大量研究表明，辣椒素受体感受器电位香草酸受体1（TRPV1）是一种非选择性阳离子通道，在炎症和疼痛等病理生理学过程中具有一定的作用，活化TRPV1受体后，胞外Ca2+内流，促进有抑炎作用的神经肽如生长抑素的释放，从而在一些疾病中发挥抑炎作用[3]。本研究通过对大气颗粒物PM2.5致肺损伤模型小鼠肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性及丙二醛（MDA）的测定，进一步探究PM2.5对呼吸系统损伤的机制，及辣椒素对其肺组织抗氧化系统的影响，以期为辣椒素防治大气污染所致呼吸系统疾病提供实验依据。
1.材料与方法
1.1材料
1.1.1 试剂
辣椒素（Capsaicin，CAP）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（Malondiache，MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）试剂盒购自南京建成生物工程研究所
1.1.2 动物
SPE级ICR小鼠50只，雄性，体质量18~25g，由长沙医学院动物中心提供。
1.2 方法
1.2.1 动物实验
随后按每组8只随机分为6组，分别为正常组，模型组，低剂量辣椒素干预组，中剂量辣椒素干预组，高剂量辣椒素干预组。各组具体操作如下：
空白对照组：分别于建模的第8天，第14天，第20天，第26天经鼻腔滴入0.9%的生理盐水20ul/只。自建模之日起，每日经口灌服0.9%的生理盐水0.2ml/只/d，连灌服3周。
模型组：分别于建模的第8天，第14天，第20天，第26天经鼻腔滴入配制的PM2.5悬液40mg/kg.bw，按每只小鼠约30mg体重，约1.2mg（20ul）/只。自建立模型之日起，每日经口灌服0.9%生理盐水0.2ml/只/d，连续灌服3周。
低剂量辣椒素干预组：分别于建模的第8天，第14天，第20天，第26天经鼻腔滴入配制的PM2.5悬液40mg/kg.bw，按每只小鼠约30mg体重，约1.2mg（20ul）/只。自建立模型之日起，每日按6mg/kg.wet.d的剂量灌胃辣椒素，连续灌服3周。
中剂量辣椒素干预组：分别于建模的第8天，第14天，第20天，第26天经鼻腔滴入配制的PM2.5悬液40mg/kg.bw，按每只小鼠约30mg体重，约1.2mg（20ul）/只。自建模之日起，每日按10mg/kg.wet.d的剂量灌胃辣椒素，连续灌服3周。
高剂量辣椒素干预组：分别于建模的第8天，第14天，第20天，第26天经鼻腔滴入配制的PM2.5悬液40mg/kg.bw，按每只小鼠约30mg体重，约1.2mg（20ul）/只。自建模之日起，每日按15mg/kg.wet.d的剂量灌胃辣椒素，连续灌服3周。
实验开始时与实验各个周末用电子天平称量各组小鼠的体重。
将上述各组大鼠脱颈处死。取血留样并进行迅速解剖，取实验小鼠的肺，观察脏器的形态变化并称取脏器重量，计算各组实验小鼠肺脏器系数，并与空白组和肺损伤模型组进行对比。观察各组小鼠肺部组织病理形态学变化。
1.2.2 比色法 取10%肺组织匀浆，用BCA法测定蛋白含量，采用比色检测肺组织SOD，MAD，GSH-PX水平，严格按照试剂盒说明书操作。
1.3 统计学方法
采用统计学方法，对比分析各不同剂量组的实验数据，所有实验数据均应用SPSS13.0统计软件分析处理，计量资料数据以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析进行显著性检验（LSD-t法）。检验水准a=0.05，以P﹤0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 PM2.5损伤组小鼠肺组织SOD，MAD，GSH-PX水平变化及CAP的影响
与空白对照组相比，PM2，5肺损伤模型组小鼠肺组织SOD，GSH-PX活力明显降低（P<0.05），与肺损伤模型组相比，CAP干预组SOD，GSH-PX活力明显升高（P<0.05）。
与空白对照组相比，肺损伤组小鼠肺组织MAD水平明显升高（P<0.05），与肺损伤模型组相比，CAP干预组小鼠肺组织MDA明显降低（P<0.05）。
辣椒素对PM2.5致小鼠肺损伤SOD，GSH-PX，MDA的影响
4.讨论
近年来，随着城市化进程的日益加快，交通运输行业和各种工矿企业获得飞速发展，使得城市大气环境问题呈现出日益严峻的趋势。各大城市雾霾天气出现的次数越来越频繁，雾霾成为百姓生活的一个焦点问题，而导致雾霾天气形成的罪魁祸首就是PM2.5。PM2.5细颗粒物可直接入侵呼吸系统，造成气道和肺内的炎症反应及慢性损伤，并能够诱发和加重多系统疾病。
本项目通过研究定量PM2.5致小鼠肺功能损伤及氧化应激效应等指标的变化，同时采用不同剂量组辣椒素干预以及一组辣椒素对照组，观察辣椒素对PM2.5致小鼠肺功能及氧化应激效应等指标变化的影响。初步探讨辣椒素对PM2.5致小鼠肺功能损伤的修复作用，可为辣椒素的保健功能研究及对PM2.5所致肺组织损伤的修复作用研究提供相应的实验数据支持。
参考文献：
[1]赵传阳，李永安，刘学来. 粉尘PM2.5及其对人体的危害[J]. 制冷与空调（四川），2013，（04）：403-406，419.
[2]报刊文摘[J]. 中国工会财会，2013，（09）：52-53.
[3]Helyes Z，SzabóA，Németh J，et al.Antiinflammatory and analgesic effects of somatostatin released from capsaicin-sensitive sensory nerve terminals in a Freund′s adjuvant-induced chronic arthritis model in the rat[J]. Arthritis Rheum，2004，50（5）：1677-1685.
作者简介：周燃，女，15级临床医学本科生，通讯作者：粟敏，女，长沙医学院教师。
基金项目：课题编号及名称：长医教〔2017〕18号-269-辣椒素对PM2.5所致小鼠肺损伤模型的影响。
论文作者:周燃,张晓,李想,李容波,朱素梅,马晓云,粟敏（
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2018年1月第1期
论文发表时间:2018/5/19
标签：小鼠论文; 辣椒论文; 损伤论文; 模型论文; 组织论文; 剂量论文; 建模论文; 《中国医学人文》(学术版)2018年1月第1期论文;