许文林[1]2004年在《白血病细胞血管内皮生长因子自分泌链作用的实验研究》文中指出目的:运用血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)抗体阻断白血病K562细胞株VEGF的自分泌作用,探讨其对K562细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响;将携带抗VEGF发夹状核酶基因的真核表达载体转导白血病细胞株K562,建立稳定表达的细胞株克隆,探讨抗VEGF发夹状核酶基因对K562细胞增殖、凋亡等生物学行为的影响及其分子机制;构建血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)Flt-1和KDR特异性短发夹环RNA(shRNA)真核表达载体,并将Flt-1ShRNA导入白血病细胞株K562,观察对白血病细胞Flt-1基因表达的作用,并探讨其对白血病细胞浸润能力的影响及其机制。 方法:将不同浓度的VEGF抗体作用于白血病细胞株K562,采用台盼兰拒染细胞直接计数和MTT方法测定抗体处理前后白血病细胞株K562增殖速度和细胞生长抑制率:DNA凝胶电泳法检测抗体处理前后白血病细胞的凋亡程度;应用RT-PCR法测定抗体处理前后白血病细胞株K562中相关基因表达的变化。采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体pcDNA-RZ转染白血病细胞株K562,G418抗性筛选获得阳性克隆;抽提基因组DNA,用PCR方法验证核酶基因已转入K562细胞;荧光定量PCR和免疫印迹反应检测白血病细胞中VEGF mRNA和蛋白表达量的改变;采用台盼兰拒染细胞直接计数、MTT法、甲基纤维素半固体培养法和细胞周期测定分析抗VEGF发夹状核酶基因对白血病细胞增殖的影响;DNA凝胶电泳和AnnexinⅤ检测白血病细胞的凋亡程度;将白血病细胞皮下接种BALB/c裸鼠,检测转染核酶基因前后白血病细胞致瘤能力的变化。采用Tuschl法设计并合成被9bp序列间隔的19bp长短的针对VEGF受体Flt-1和KDR靶序列的反向重复序列,将其连入带有人U_6启动子的pEGFP-C1质粒载体中,构建Flt-1和KDR特异性的短发夹环RNA(Short hairpin RNA,ShRNA)重组质粒Cl/U_6/FltS及Cl/U6/KDRS;分别用PstⅠ和Sall酶切鉴定;并将经酶切鉴定正确的重组质粒作测序分析;将构建的人Flt-1基因特异性shRNA真核表达载体转染K562细胞,观察白血病细胞Fit-1基因表达的高低及对白血病细胞浸润能力的影响。 结果:1、抗VEGF抗体能抑制白血病细胞株K562的生长,促进白血病细胞的凋亡,这一作用呈剂量依赖关系,当抗体浓度为0.033μg/ml时,白血病细胞生长抑制率仅为13.2±6.3%,而当抗体浓度增加到0.825μg/ml时,抑制率达到
刘爽, 贾舒麟, 张梦凡, 王丽, 赵臣[2]2018年在《血管内皮生长因子在白血病中相关作用的机制》文中研究指明血管内皮生长因子(VEGF)是血管生成过程中重要的调控因子,与白血病的发生发展密切相关。VEGF可通过自分泌链作用与其自身表面的VEGFR结合,生成微血管甚至形成血管网,对自身生长周期进行调节,对白血病细胞的增殖和迁移起到促进作用。
佚名[3]2007年在《《中华血液学杂志》2007年第28卷关键词索引》文中提出关键词基本按照中国医学科学院医学信息研究所2003年出版的《医学主题词表(英汉对照)》标引,按照汉语拼音字母及论文发表的先后顺序排列。 A阿霉素阿霉素增强 TRAIL 诱导的人骨髓瘤细胞系 KM3细胞凋亡的分子机制研究(王华芳,陈朝晖,孙春艳,等)(1):30干扰 RNA 抑制组织因子表达对阿霉素诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的影响(方峻,汤浩,夏凌辉,等)(9):594阿糖胞苷氟达拉滨联合中剂量阿糖胞苷治疗难治性急性髓系白血病初步疗效观察(马梁明,朱秋娟,姜波,等)(1):49
苏亚丽[4]2005年在《叁氧化二砷对体外培养的人视网膜色素上皮细胞作用的实验研究》文中提出增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是指孔源性视网膜脱离或视网膜脱离复位手术后,及眼球穿通伤后,由于玻璃体内及视网膜表面的细胞增生和纤维膜收缩,造成牵引性视网膜脱离。是孔源性视网膜脱离的严重并发症和手术失败的最主要原因,也是常见的难治性致盲眼病之一。 PVR的确切发病机制尚未能完全了解,但其基本病理过程已经明了。经过大量的实验和临床研究,认为PVR属于眼内发生的过度损伤修复反应,是多种细胞相互作用,眼内、眼外多种因素相互影响的多因素疾病。其中视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)细胞的过度增生是PVR的主要病理改变。RPE细胞几乎在所有的PVR膜中都可以观察到,它可以转化成不同的形态,具有多种功能,如分泌各种刺激因子、转化成巨噬细胞、合成胶原等,在生长因子的刺激下发生增生。 过去的数十年内经玻璃体手术治疗PVR已日趋成熟,成功率显着提高,现代玻璃体手术可以解除视网膜牵拉使视网膜复位,但通常情况下手术本身并不能阻止细胞增生和PVR纤维膜的形成,所以术后仍有一定复发率。为了提高视网膜手术在治疗PVR中的成功率,近年来很多研究都尝试用药物辅助手术治疗来达到此目的。 PVR与RPE细胞的密切关系已被广泛证实,PVR的治疗也是从RPE细胞入手,通过抑制RPE细胞移行、增生、纤维膜收缩,促进其凋亡来达到治疗目的。
荆洋[5]2007年在《促红细胞生成素与增殖型糖尿病视网膜病变相关性研究》文中研究指明一项新研究显示，促红细胞生成素(EPO)是增殖型糖尿病视网膜病变视网膜血管生成的重要促发因素。提示促红细胞生成素阻断剂可能有效地治疗这种常见眼病。已经证明血管内皮生长因子(VEGF)是视网膜血管生成的主要介质。但是，单纯抑制VEGF不能防止视网膜血管新生，提示其它因子也起作用。已知促红细胞生成素有促血管生成的作用，但其对眼血管生成的作用还不清楚。哈佛医学院的Lloyd Paul Aiello医生在相关的评论中指出，这些有关促红细胞生成素的发现强调，糖尿病患者的眼病治疗不应该只考虑VEGF，还应重视在视功能变化过程中发挥重要作用的其它因子。本次研究的目的就在于调查增殖型糖尿病视网膜病变患者玻璃体液中的EPO浓度是否升高，以及在动物实验中模拟视网膜组织的缺氧环境并观察视网膜中EPO的表达情况。第一部分增殖型糖尿病视网膜病变患者玻璃体液中促红细胞生成素浓度的测定目的了解增殖型糖尿病视网膜病变患者玻璃体液中促红细胞生成素浓度的变化方法应用ELISA法测定10例正常人、15例PDR患者和12例伴玻璃体积血的视网膜静脉周围炎患者玻璃体液及血清中促红细胞生成素的浓度结果10例正常人玻璃体液EPO浓度均值为33.5(19.9-63.8mU/ml)mU/ml,15例PDR患者玻璃体液EPO浓度均值为880.7(157.0-1850.0mU/ml)mU/ml,12例伴玻璃体积血的视网膜静脉周围炎患者玻璃体液EPO浓度均值为396.4(83.7-1080.0mU/ml)mU/ml。各组间有显着性差异(P＜0.0001)。PDR患者和伴玻璃体积血的视网膜静脉周围炎患者玻璃体液的EPO浓度显着高于正常人(伴玻璃体积血的视网膜静脉周围炎患者vs正常人，P=0.038；PDR患者vs正常人，P＜0.0001)。10例正常人血清中EPO浓度均值为21.3(16.3-25.5mU/ml)mU/ml,15例PDR患者血清中EPO浓度均值为20.7(14.4-28.7mU/ml)mU/ml,12例伴玻璃体积血的视网膜静脉周围炎患者血清中EPO浓度均值为25.3(12.4-63.8mU/ml)mU/ml。组间无显着性差异(P＞0.05)。把PDR患者的玻璃体液和血清EPO浓度进行相关性分析，发现玻璃体液的EPO浓度和血清EPO浓度并没有显着的相关性(r=0.18,P=0.18)。结论PDR患者玻璃体液中EPO浓度显着升高，但是与全身循环血液中的EPO浓度没有相关性，推测应是糖尿病视网膜局部病变引起的浓度升高。第二部分促红细胞生成素在CoCl_2诱导的大鼠视网膜缺氧模型中的表达目的研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)在玻璃体腔注射CoCl_2诱导的大鼠视网膜组织化学缺氧模型中的表达方法通过大鼠(体重120±20g)双眼玻璃体腔注射CoCl_2建立视网膜组织化学缺氧模型，CoCl_2处理组大鼠一只眼玻璃体腔内注射4ul 200u mol/l的氯化钴，另一只眼注射4ul的磷酸盐缓冲溶液(PBS)作为对照，同时设正常对照组(NC组)。分别于注射后第1、2、3周末处死大鼠摘除眼球，采用免疫组织化学化学方法检测氯化钴处理眼和正常大鼠视网膜促红细胞生成素蛋白的表达。结果与正常对照组相比，氯化钴处理组的视网膜组织EPO的表达增加(P＜0.05)，氯化钴处理组中第1、2、3周组间有明显差异(P＜0.01)，且随着实验时间的延长EPO的表达有增高的趋势，说明EPO和视网膜局部组织的缺氧性损伤之间存在着密切的联系。用免疫组织化学检测的方法可见表达EPO的视网膜细胞主要位于神经节细胞层、内核层和外核层。结论随着视网膜缺氧的加重和时间的延长，大鼠视网膜EPO的表达增高，且主要在视网膜神经节细胞层、内核层和外核层表达。
王琳[6]1997年在《人RPE细胞的冻存、PCNA和bcl-2表达及其增生的反义核酸抑制》文中提出目的： 视网膜色素上皮(RPE)是维持视网膜结构和功能稳定性的重要细胞。它的生物学活性对RPE损伤性眼病如老年黄斑变性和另一方面的增殖性病变如孔源性视网膜脱离后的增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)的发展及其临床防治都有重要关系。本研究旨在建立一种人RPE细胞冻存和复苏的方法，为临床上开展RPE移植以治疗相关眼病提供可能的细胞库；同时通过观察培养的RPE细胞的生长特性及PCNA和bcl-2的表达，了解其在恢复生长活性后的细胞学表现，为今后临床上判断PVR高危眼提供可能的检查指标打下基础。本研究还试用反义PCNA和反义bcl-2脱氧寡核苷酸抑制体外培养的人RPE细胞，以探讨反义核酸方法对PVR辅助治疗的可能性。 方法：
参考文献：
[1]. 白血病细胞血管内皮生长因子自分泌链作用的实验研究[D]. 许文林. 苏州大学. 2004
[2]. 血管内皮生长因子在白血病中相关作用的机制[J]. 刘爽, 贾舒麟, 张梦凡, 王丽, 赵臣. 吉林医药学院学报. 2018
[3]. 《中华血液学杂志》2007年第28卷关键词索引[J]. 佚名. 中华血液学杂志. 2007
[4]. 叁氧化二砷对体外培养的人视网膜色素上皮细胞作用的实验研究[D]. 苏亚丽. 郑州大学. 2005
[5]. 促红细胞生成素与增殖型糖尿病视网膜病变相关性研究[D]. 荆洋. 郑州大学. 2007
[6]. 人RPE细胞的冻存、PCNA和bcl-2表达及其增生的反义核酸抑制[D]. 王琳. 第四军医大学. 1997
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