承德医学院附属医院067000
摘要 目的：观察不同浓度胸腺素β4对深Ⅱ烫伤大鼠愈合及炎性因子表达的影响。方法：将72只实验用大鼠随机分为四组，建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型，并分别给予生理盐水和不同浓度的Tβ4进行创面处理。结果：治疗第3、7、14d，Tβ4组烫伤愈合率均明显高于对照组，且M-Tβ4组、H-Tβ4组烫伤愈合率明显高于L-Tβ4组（P<0.05）；治疗第3、7d，Tβ4组TNF-a、NF-κB明显低于对照组，且M-Tβ4组、H-Tβ4组明显低于L-Tβ4组（P<0.05）。结论：重组胸腺素β4能下调炎性因子表达，促进深Ⅱ烫伤创面的愈合，且120mg／L胸腺素β4治疗效果最佳。
关键词 胸腺素β4；深Ⅱ烫伤；炎性因子
【中图分类号】R644 【文献标识码】A
深Ⅱ烫伤是一种严重的烧伤状态，深Ⅱ烫伤后机体促炎因子和细胞趋化因子表达增加,导致烫伤部位炎性细胞浸润，引起局部组织溶解和破坏，影响烫伤创面的愈合。肿瘤坏死因子（TNF-α）启动并促进炎症反应，还可激活细胞核内转录因子（NF-κB），后者被激活后以二聚体形式转位至细胞核内发挥转录因子活性，参与细胞炎症过程，不利于组织的愈合。胸腺素β4（Thymosin β4, Tβ4）是G-肌动蛋白偶联蛋白，能保护和修复心肌、促进皮肤组织创伤的愈合[1]。本研究重点观察胸腺素β4治疗深Ⅱ烫伤对炎性因子的影响。
1材料和方法
1.1材料
选取72只重240-260g SD大鼠，雌雄不限。随机分为实验组和对照组，实验组又依照烫伤后胸腺素β4用量分为低浓度组(60mg/L)、中浓度组(120mg/L)及高浓度组(240mg/L)，每组18只。
1.2建模及烫伤创面处理
所有试验大鼠腹腔注射10%水合氯醛（400mg／Kg）麻醉后，通过同一直径试管向大鼠背部相同部位注入91℃的热水，制作直径均为3.0cm的圆形深Ⅱ度烫伤创面模型。
对照组大鼠烫伤创面滴入0.9%生理盐水，实验组分别滴入60mg／L（低浓度：L-Tβ4组）、120mg／L（中浓度：M-Tβ4组）和240mg／L（高浓度：H-Tβ4组）的胸腺素β4，每次滴入剂量均为0.1ml，每日滴入一次。所有大鼠创面均用无菌纱布包扎，隔日换药一次。本研究重组Tβ4由北京诺思兰德生物技术有限公司提供。
1.3研究指标
1.3.1 烫伤创面愈合率
治疗3、7、14d，测量创面面积以计算创面愈合率。创面愈合率=（烫伤面积-各时间点残余创面面积/原始烫伤面积）×100%。
1.3.2 炎性因子
治疗后第3,7d各处死每组6只大鼠，以BCA法测定大鼠血清中肿瘤坏死因子（TNF-a）水平。用自配胞质裂解液和胞核裂解液抽提胞质蛋白和胞核蛋白，采用ELISA法检测细胞核内NF-κB蛋白的表达情况。抗鼠NF-κB一抗由santa cruz Biotechnology, Inc提供，选用天津灏洋生物制品科技有限公司生产的ELISA试剂盒，操作均按试剂盒说明步骤进行。
1.4 统计学分析
采用SPSS18.0软件包录入数据并进行统计学分析，烫伤愈合率和炎性因子表达水平等计量资料用（±s）表示，采用t检验，P＜0.05为有统计学意义。
2结果
2.1烫伤愈合率比较
治疗第3、7、14d，Tβ4组烫伤愈合率均明显高于对照组，且M-Tβ4组、H-Tβ4组烫伤愈合率明显高于L-Tβ4组（P<0.05）。见表1。
3讨论
重组胸腺β4（Tβ4）是一种G-肌动蛋白偶联蛋白，能够调节肌动蛋白平衡，抑制细胞凋亡及炎症过度表达，能保护和修复心肌，促进创伤修复。Qiu等[2]发现Tβ4硫氧化物有很好的抗炎作用，能抑制中性粒细胞的趋化作用，调节炎症介质的表达与释放。动物模型实验证实Tβ4还具有抗内毒素休克作用，能显著降低血液中白介素1（IL-1）、 PFG等多种炎症因子的含量，有效降低大剂量内毒素对大鼠的致死率，还具有抗炎、减少角膜内炎症细胞浸润，促进角膜损伤修复的作用。
深Ⅱ度烫伤发生后机体启动一系列的炎症进程，中性粒细胞、巨噬细胞、MIP和MCP, KC等趋化因子表达增加，大量的TNF-a, IL-1β被激活并进入损伤区域，使损伤局部炎症处于过度表达状态，炎症失调影响烫伤后组织的愈合。TNF-α能激活多种信号通路，NF-κB是TNF-α激活的重要的转录因子，二者在调节组织炎症过程中起非常关键的作用[3]。NF-κB激活后必须转位到细胞核内才能发挥其转录活性，早期应用Tβ4可以降低烫伤后炎性趋化因子及NF-κB表达水平，减轻修复过程中过度的炎症反应造成的组织损伤，促进烫伤创面愈合[4]。
本研究中，Tβ4组治疗3、7、14d时烫伤愈合率均明显高于对照组，肿瘤坏死因子（TNF-a）和细胞核内转录因子（NF-κB）均显著低于对照组，提示胸腺素β4能降低炎性因子表达，促进Ⅱ度烫伤愈合。数据同时显示，Tβ4组中M-Tβ4组各时间点炎性细胞表达最低、创面愈合率最高，临床可据此以中浓度的Tβ4来治疗深度创伤患者，在最大程度促进烫伤愈合的同时节约医药资源。
参考文献
[1]李艳，王冠．于虎，等．重组胸腺紊β4调节创伤皮肤层粘连蛋白5表达的研究[J]．中国修复重建外科杂志，2008，22(11)：1306—13lO．
[2] Qiu P, KurpakusWheater M, Sosne G. Matrix metalloproteinase activity is necessary for thymosin beta 4 promotion of epithelial cell migration[J]. J Cell Physiol,2007,212:165-173.
[3] 邵苏吉，姚登福，沈俊俊，等.肝癌组织NF-κB表达及活化干预对肝癌细胞增殖的影响[J].世界华人消化杂志，2010,18（22）：2296-2301.
[4]龙安华,李明,王晓坤,等. 重组胸腺素β4调节NF-κB表达促进兔角膜碱烧伤后修复[J]. 国际眼科杂志, 2010，10（05）：844-846.
论文作者:李树松 吴晓明 马滢,戴文英 孙喜平,赵晓玉
论文发表刊物:《解放军预防医学杂志》2015年第12期供稿
论文发表时间:2016/2/24
标签：烫伤论文; 创面论文; 因子论文; 胸腺论文; 炎症论文; 大鼠论文; 细胞核论文; 《解放军预防医学杂志》2015年第12期供稿论文;