周振雷[1]2003年在《笼养蛋鸡骨质疏松症防治的研究》文中提出本文研究了半胱胺、大豆黄酮以及基于IP98的复合添加剂对产蛋后期笼养蛋鸡生产性能以及骨代谢的影响，并对其作用机理进行了探讨。试验研究分为两大部分： 实验一 半胱胺、大豆黄酮对防治笼养蛋鸡骨质疏松症的影响 目的：探讨半胱股、大豆黄酮对笼养蛋鸡骨质疏松症的防治作用。 方法：1500只455日龄伊莎褐蛋鸡，随机分为3组，即对照组、半胱胺组、大豆黄酮组。各组日粮处理分别为：对照组为基础日粮，半胱胺组为基础日粮+400mg／kg半胱胺，大豆黄酮组为基础日粮+10mg／kg大豆黄酮。实验为期9周。 结果：(1)实验结果表明：与对照组比较，半胱胺组、大豆黄酮组显着提高产蛋率(P＜0.01)和显着降低蛋破壳率(P＜0.01)和料蛋比(P＜0.01)；(2)与对照组比较，半胱胺蛋壳厚度增加0.003cm(p＜0.01)，蛋壳强度提高0.041kg／cm~2(P＜0.01)；大豆黄酮组蛋壳厚度平均增加0.002cm(p＜0.01)，蛋壳强度提高0.09kg／cm~2(P＜0.01)，但各组蛋形指数无显着变化；(3)与对照组比较，半胱胺、大豆黄酮血浆AKP、BGP水平显着下降(P＜0.05)；(4)实验期末，半胱胺组、大豆黄酮组左胫骨BMD比对照组增加了7％(P＞0.05)和19％(P＜0.05)。半胱胺与大豆黄酮组左肱骨BMD分别高于对照组增加了5％(P＞0.05)和11％(P＞0.05)； 结论：半胱胺与大豆黄酮均可改善产蛋后期蛋鸡骨质，而大豆黄酮效果则更好。 试验二 复方IP98添加剂对防治笼养蛋鸡骨质疏松症的影响 目的：研究不同药物与IP98配合，利用药物的协同作用，对笼养蛋鸡骨质疏松症的防治效果。 方法：从南京某集约化养鸡场随机选60只，450日龄体况良好、产蛋率无显着差异、体重相近的伊莎蛋鸡，随机分为5组，即A、B、C、D、E5组，每组12羽。A组为基础日粮组。B组为基础日粮+25mg／kgIP98+200mg／kg单氟磷酸钠。C为基础日粮+25mg／kgIP98。D组为基础日粮+400mg／kg半胱胺。E组为基础日粮+25mg／kgIP98+400mg／kg半胱胺。试验为期60d。 结果：门）与A组比较，B、C、D、E组均可以显着提高产蛋后期蛋鸡生产性能（Pwto．of），E组效果最好；（2）与其它各组比较，D组可显着增加蛋壳厚度（P＜0．01），C组显着增加蛋壳强度（P＜0．of）：（3）与A组比较，B、C、D、E组均可以降低产蛋后期蛋鸡血浆中脱P、BGP水平（P＜0．of），但各组之间，血浆 StrACP水平天显着变化（MO．05）。（4）与对照组比较，B、C、D、E组均可提高左防骨骨密度，D、E组可提高左股骨骨密度，D组可提高股骨骨密度，但差异不显着（ho．05） 结论：IP98与半脱胺配合使用可提高产蛋后期蛋鸡生产性能和骨质。
张皎[2]2004年在《笼养蛋鸡骨质疏松的IP98防治机理及骨质疏松与IGF-Ⅰ的RFLP关系研究》文中研究表明1．建立有效的鸡胚额骨成骨细胞的培养方法，为笼养蛋鸡骨质疏松症研究提供新的试验手段。主要剔取15日龄鸡胚颅骨，剪碎，采用混合Ⅱ型胶原酶和胰酶的方法，进行两次消化，获取鸡胚额骨原代成骨细胞群。经消化培养的细胞具有明显的成骨细胞样特点：形态学观察显示成纤维母细胞型，有长梭形、叁角形、星形；组化染色结果：碱性磷酸酶黑染、基质前体红染；长期培养能形成肉眼可见的白色矿化结节，茜素红染色为红色结节。总之酶混合消化可以得到较纯的成骨细胞，具有明显的成骨细胞特征。 2．用建立的鸡胚额骨成骨细胞的培养方法，体外直接研究IP98对蛋鸡成骨细胞增殖和分化功能的影响。采用混合胶原酶和胰酶、两次消化的方法，获取成骨细胞，经培养传代，取状态良好的第二、叁代细胞在96孔板上进行增殖率和碱性磷酸酶活性的测定。发现酶消化法获得的细胞具有明显的成骨细胞的特点：属于成纤维母细胞型、碱性磷酸酶黑染、基质前体红染，长期培养能形成矿化结节。应用IP98后发现10~(-4)M IP可抑制成骨细胞增殖，而10~(-8)M对改善成骨细胞的增值和分化有显着功效(p＜0.01)，小于10~(-10)M浓度的IP则对成骨细胞与对照组无差异。酶混合消化可以得到较纯的成骨细胞群，能够满足药物研究所需，应用IP98后试验结果表明，适宜浓度的IP可促进鸡胚额骨成骨细胞增殖合和分化，提高其碱性磷酸酶活性，增强成骨细胞矿化，促使骨形成。 3．500羽58周龄ISA蛋鸡分为5组，A组为对照组，B、C、D、E组在基础日粮上添加15、25、50、100ppm的IP98，持续饲喂70天。每月采血测血钙、血磷、骨钙素、碱性磷酸酶、雌激素，记录体重，测骨矿含量。每天记录产蛋量、蛋重、破壳蛋数。结果表明：C组产蛋率显着高于对照组和其他实验组，D、E组产蛋率显着低于A、B、C组。C组蛋重、破壳率优于其他各组，差异不显着：各组体重无显着差异；C组血磷显着低于其他各组，B组血钙显着低于其他各组，C组碱性磷酸酶、骨钙素均显着高于其他各组；实验各组雌激素水平上升、无显着差异。结论：日粮中添加适量(25ppm)IP98能改善骨代谢、促进生产性能、提高产蛋率。 4．扩增出准确的ISA蛋鸡ICF-Ⅰ基因序列用于多态性分析。收集鸡血红细胞，提取红细胞基因组DNA，以此为模板，根据Nagaraja的方法适当改变PCR反应条笼养蛋鸡骨质疏松的IP98防治机理及骨质疏松与IGF一I的RFLP关系研究件，扩增出IGF一I启动子上游7Kb处长62lbp的基因片断，先凝胶电泳检验其正确性。再将该扩增片断克隆到PMD 18一T载体再进行序列测定，将测序结果和参照基因序列用DNAstar分析其同源性。l%琼脂糖凝胶电泳初步显示扩增出的目的条带为621bp的基因片断，测序报告所得的结果和参照基因有”%的同源性，说明PCR成功扩增出了目的片断，为下一步的试验研究、利用莫定基拙. 5.从分子遗传学角度来探讨ISA笼养蛋鸡胰岛素样生长因子一I限制性片断多态性与骨质疏松的关系。选择高产期ISA蛋鸡90只，应用PCR扩增鸡ICF一I启动子上游7kb处基因片断，用Pstl限制性内切酶消化产生限制性片断长度多态性，分析工GF一I多态性和胫骨、股骨、肚骨骨密度，骨代谢指标骨钙素和碱性磷酸酶之间的关系。结果显示90只蛋鸡PP、PP、PP基因型频率分别为0.256、0.311、0.433，P、p等位基因频率分另，i为0.4111、0.5889。方差分析(ANOVA)显示肚骨骨密度与ICF一I基因多态性相关，其PP基因型骨密度和骨矿含量均显着大于PP基因型(p<0 .05)，股骨、胫骨基因型间无显着差异。骨钙素、碱性磷酸酶各基因型间无显着差异，PP基因型体重显着大于Pp基因型;逐步多元回归分析发现，体重与对各基因型的骨质有良好的影响，PP基因型股骨和胫骨骨质与骨钙素显着负相关，PP基因型肚骨。结论:ISA笼养蛋鸡IGF一I基因多态性和肚骨骨密度显着相关。较大体重有矛!」于笼养蛋鸡骨质发展。P等位基因具有一定的优良骨质指针作用，提示从分子水平探讨骨量丢失以及对骨质疏松症基因诊断和杭性基因选育有一定的显着意义。
周振雷[3]2007年在《骨疏康防治笼养蛋鸡骨质疏松症的效果及其机理研究》文中提出笼养蛋鸡骨质疏松症是以全身性结构性骨丢失及骨脆性增加和易发生骨折为特征的一种严重骨骼疾病。饲养管理、营养、遗传、内分泌因素等对本病的发生均有一定的作用，但其确切作用机制仍不明了。本文研究了ISA蛋鸡的骨代谢变化规律，探讨了中药骨疏康对笼养蛋鸡骨质疏松症的防治效果和作用机理。1 ISA蛋鸡骨代谢的增龄性改变研究了15、35、58和70周龄ISA蛋鸡骨代谢变化规律。试验表明，与15周龄比较，70周龄ISA蛋鸡的AKP、TRAP水平分别下降了61.06％和54.38％(P<0.05)，肱骨、胫骨、股骨、龙骨的放射密度分别增加了35.23％、34.86％、28.38％和34.86％(P<0.05)，而肱骨、胫骨、股骨的平均皮质骨宽度分别下降了11.43％、36.96％和28.75％(P<0.05)，皮质骨面积百分率分别下降了13.97％、38.02％和28.53％(P<0.05)。结果显示，70周龄ISA蛋鸡骨形成减弱，骨吸收增加，已发生显着的骨质疏松症。皮质骨在产蛋周期的持续性重吸收是笼养蛋鸡骨质疏松症的重要发病机理之一。2骨疏康对蛋鸡骨代谢的影响研究了中药骨疏康对蛋鸡骨代谢的影响。选择90羽58周龄蛋鸡，随机分为3组。对照组饲喂基础日粮，骨疏康组在基础日粮中添加1％的骨疏康，依普拉芬组在基础日粮中添加25 mg/kg的依普拉芬。试验为期90 d。结果显示，与对照组比较，骨疏康组和依普拉芬组血清Ca、P、AKP、TRAP、BGP水平显着降低，肱骨、胫骨、股骨的骨指数、骨放射密度、皮质骨厚度、皮质骨面积、皮质骨面积比例以及血清中IGF-1水平显着升高，而骨疏康组与依普拉芬组之间无显着差异，表明骨疏康能显着抑制产蛋后期蛋鸡的骨吸收，促进骨形成，改善骨代谢。3骨疏康在集约化鸡场的应用及其对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋壳品质和骨代谢的影响研究了骨疏康在集约化鸡场的应用及其对产蛋后期蛋鸡生产性能和骨代谢的影响。选择1000羽55周龄的蛋鸡，随机分为2组。对照组饲喂基础日粮，骨疏康组在基础日粮中添加1％的骨疏康，试验为期10周。结果显示，与对照组比较，骨疏康组的破壳蛋率和饲料转化率显着降低，产蛋率、蛋壳强度，肱骨、胫骨、股骨的骨指数、骨放射密度、皮质骨指数、皮质骨比例以及胫骨的骨强度显着增加，胫骨的髓质骨面积比例以及血清AKP水平显着降低，表明骨疏康能显着提高产蛋后期蛋鸡的生产性能和蛋壳品质，改善骨代谢，有效防治笼养蛋鸡骨质疏松症的作用。4骨疏康对成骨细胞增值和活性的影响研究了中药骨疏康血清对成骨细胞增值和活性的影响。采用二次酶消化法获得鸡胚成骨细胞，与骨疏康血清混合培养，MTT法和PNPP法检测成骨细胞增值率和AKP活性。结果显示，与对照组比较，骨疏康血清可促进成骨细胞的增值和AKP的分泌，给药5 h后的骨疏康血清作用最佳，表明骨疏康可促进成骨细胞的增值、分化和活性，促进骨形成。5骨疏康有效成份对成骨细胞增殖和AKP活性的影响研究了骨疏康有效成份对鸡胚成骨细胞增殖和分化的影响。将不同浓度的柚皮苷、黄芪甲苷加入第二代成骨细胞中，分别于培养24、48、72 h时，使用MTT法和PNPP法检测成骨细胞的增殖和AKP活性。结果显示，与对照组比较，适宜浓度的柚皮苷和黄芪甲苷(10～80 ng/mL)具有显着促进鸡胚成骨细胞增殖和AKP活性的作用(P<0.05)。40 ng/mL浓度作用效果最佳，表明柚皮苷和黄芪甲苷对鸡胚成骨细胞增殖和分化均有促进作用。
邓益锋[4]2001年在《维生素D_3对青年蛋鸡骨代谢的影响及中药对笼养蛋鸡骨质疏松症的防治》文中进行了进一步梳理175只10周龄伊莎蛋鸡，随机分为5组，分别饲喂添加维生素D为0、100、200、500、1000IU每公斤的日粮10周。实验期间每隔2周同步测定血钙、血磷、碱性磷酸酶、骨钙素、骨矿含量及体重。实验开始及结束杀鸡取胫骨跖骨，进行组织学检查。 结果表明，维生素D对血钙、血磷无显着影响（P＞0.05）；维生素D不足或过量都会导致BMC下降，且差异显着（P＜0.05）；维生素D对AKP的影响也较显着，200IU组的AKP显着低于500IU组（P＜0.05）、极显着低于0、1000IU组（P＜0.01）；BGP水平与日粮维生素D含量呈负相关。降钙素水平各组之间差异不显着。骨组织学检查显示：实验开始时，青年蛋鸡皮质骨、骨小梁正常；实验结束时，低维生素D组和高维生素D组皮质骨都出现了不同程度的吸收腔增多的现象，且严重程度与维生素D缺乏或过量程度呈正相关性。 结论：1）当日粮中维生素D不足或过量都会对青年蛋鸡骨骼造成伤害。 2）每公斤含200IU维生素D的日粮对骨发育最适宜。
陶庆树[5]2006年在《日粮中不同粒度钙源对产蛋后期笼养蛋鸡骨代谢及生产性能的影响》文中研究指明茏养蛋鸡骨质疏松症是以全身性结构骨丢失及骨脆性增加和易发生骨折为特征的一种严重骨骼疾病。饲喂粒状钙源能够缓解产蛋后期蛋鸡骨质疏松。本文研究了在日粮中使用6目、10目钙源、100目叁种不同粒度钙源对产蛋后期笼养蛋鸡骨代谢及生产性能的影响，探讨了粒状钙源能够缓解蛋鸡骨质疏松症的机理。试验研究分为两大部分： 1 不同粒度钙源对产蛋后期笼养蛋鸡骨代谢及生产性能的影响 目的：探讨粒状钙源对笼养蛋鸡骨质疏松症的防治作用。方法：75羽58周龄ISA蛋鸡，随机分为叁组，即A组、B组、C组。A组为基础日粮+100目方解石粉；B组为基础日粮+10目方解石颗粒；C组为基础日粮+6目方解石颗粒。试验为期10周。结果：①试验结果表明：与A组比较，B组、C组显着提高产蛋率(P＜0.01)，降低料蛋比(P＜0.01)，C组可显着降低软破壳蛋率(P＜0.01)，B组、C组蛋壳厚度高于A组(P＞0.05)，A组平均蛋重显着高于于B组、C组(P＜0.01)；②B组、C组胫骨骨骼指数分别比A组增加了6.66％(P＞0.05)和8.03％(P＜0.05)，B组、C组长骨重及肱骨、股骨骨骼指数以及均高于A组，但差异不显着；③B组、C组肱骨放射骨密度分别高于A组19.03％(P＜0.05)和14.19％(P＞0.05)，股骨放射骨密度B组、C组高于A组，差异不显着(P＞0.05)；胫骨放射骨密度B纽、C组分别高于A组9.81％(P＜0.05)和3.73％(P＞0.05)；龙骨放射骨密度B组、C组高于A纽24.91％(P＜0.05)和29.46％(P＜0.01)；④肱骨皮质骨平均厚度B组、C组分别比A组增加了15.9％(P＜0.05)和9.15％(P＞0.05)，股骨皮质骨平均厚度B组、C组分别比A组分别增加了13.7％(P＜0.05)和21.9％(P＜0.01)，胫骨皮质骨平均厚度B组、C组分别比A组增加了33.56％(P＜0.01)和63.9％(P＜0.01)；⑤B组、C组血浆中钙、磷浓度与A组比较，差异不显着(P＞0.05)，血浆中碱性磷酸酶B组、C组分别比A组下降了35.98％(P＜0.01)和61.33％(P＜0.01)；抗酒石酸酸性磷酸酶B组、C组分别比A组下降了18.96％(P＜0.05)和26.3％(P＜0.05)。B组和C组血浆中BGP含量显比A组下降了36.6％(P＜0.05)和17％(P＜0.05)，血浆中雌激素和IGF-Ⅰ水平差异不显着。结论：6目、10目钙源可显着改善产蛋后期蛋
姜明君[6]2015年在《笼养蛋鸡钙代谢对蛋壳质量的影响及其机制研究》文中研究表明在蛋鸡养殖商业化越来越规范的今天,蛋鸡钙代谢一直都是研究重点,在正常的养殖条件下通过营养的手段对蛋鸡钙代谢进行调控是研究的重点。本研究通过五个试验探讨了蛋鸡体内钙代谢的调控,解决商业生产中蛋壳质量的问题,缓解蛋鸡因为钙代谢而产生的笼养蛋鸡骨质疏松,改善蛋壳质量,保障蛋鸡健康和生产提供理论支持。试验一进行了日粮添加0.3%的碳酸氢钠对蛋鸡钙代谢的影响。25周龄海兰褐蛋鸡240只,随机分为2组,日粮中NaHCO3含量分别为0和0.3%,连续饲喂50周。结果表明,长期使用添加0.3%NaHCO3的碱性日粮对蛋鸡产蛋率和体重没有显着影响(P>0.05),显着减少蛋鸡蛋重、产蛋量和耗料量(P<0.05);在产蛋高峰期前期显着的增加了十二指肠钙结合蛋白(CaBP-D28k)的表达(P<0.05),显着增加了钙在蛋鸡体内的沉积(P<0.05),使得蛋壳厚度在高峰期前期显着增加(P<0.05);在产蛋后期的代谢试验表明,日粮添加0.3%NaHCO3对十二指肠和肾脏内钙结合蛋白(CaBPD28k)的表达并没有显着影响(P>0.05),蛋鸡体内钙的沉积没有变化,蛋壳厚度和蛋壳强度没有显着影响(P>0.05)。试验二进行了产蛋高峰期日粮添加0.3%的碳酸氢钠对蛋鸡钙代谢影响的重复试验。25周龄海兰褐蛋鸡240只,随机分为2组,日粮中NaHCO3含量分别为0和0.3%,连续饲喂20周。试验结果表明,产蛋高峰期添加0.3%NaHCO3的碱性日粮对蛋鸡产蛋率、采食量和产蛋量没有显着影响(P>0.05),但是显着减少蛋鸡蛋重和料蛋比(P<0.05);在高峰期前期(试验第12周)显着增加了蛋壳厚度(P<0.05),代谢试验的结果表明,日粮添加0.3%NaHCO3可以显着增加十二指肠钙结合蛋白(CaBP-D28k)的表达(P<0.05),对肾脏钙结合蛋白(CaBP-D28k)的表达没有影响(P>0.05),从而显着增加了钙在蛋鸡体内的沉积,产蛋高峰期代谢试验的结果与试验一一致。试验叁进行了蛋壳质量和笼养蛋鸡钙代谢之间的关系研究。试验对农大3号暗斑蛋和海兰褐沙皮蛋的产生和改善进行了深入的研究。结果表明,农大3号暗斑蛋的产生存在着个体的差异性,而且暗斑蛋和蛋重之间存在着负相关性;暗斑蛋严重的蛋壳钙含量显着减少(P<0.05),产暗斑蛋的蛋鸡相对于正常蛋鸡蛋壳腺内钙结合蛋白(CaBP-D28k)和钙泵(PMCA)的表达量显着减少(P<0.05),这是暗斑蛋产生的主要原因;日粮中添加“地顶孢霉培养物”可以显着增加蛋壳腺钙结合蛋白(cabp-d28k)和钙泵(pmca)的表达(p<0.05),显着增加蛋壳厚度(p<0.05),降低暗斑蛋的等级(p<0.05),在添加第10天就有效果,效果持久。海兰褐沙皮蛋的产生主要是因为蛋壳腺内钙结合蛋白(cabp-d28k)和钙泵(pmca)的表达量增大(p<0.05),导致蛋壳腺内钙离子沉积紊乱,形成蛋壳的钙增多,导致了沙皮蛋的产生。试验四进行了笼养蛋鸡骨质疏松症的评定研究。试验对选取70周龄产蛋后期海兰褐蛋鸡200只,对血钙血磷、骨指标(胫骨、股骨和龙骨)和蛋壳质量指标(蛋壳厚度、蛋壳强度和蛋壳比重)进行了相关性分析,结果表明,蛋壳厚度、蛋壳重和蛋壳强度之间存在着相关性(p<0.05);龙骨和蛋壳强度之间存在着负相关性(p<0.05);胫骨骨密度和各指标之间没有显着的相关性;股骨骨密度和蛋壳厚度、蛋壳强度、蛋壳重和蛋壳比重存在着负相关(p<0.05);蛋形指数和蛋壳强度呈正相关(p<0.05);蛋壳厚度和蛋壳强度、蛋重呈显着正相关(p<0.05);蛋壳重和蛋重存在显着正相关(p<0.05),蛋壳比重和蛋重呈负相关(p<0.05,r=-0.16716),和蛋壳厚度、蛋壳强度呈显着正相关。试验五进行了维生素d对蛋鸡免疫应激和蛋壳质量的影响。23周龄海兰褐蛋鸡360只随机分为3组,维生素d的水平分别为3200、6400、9600iu/kg,其中3200iu/kg为对照组。每组设5个重复,每个重复24只,试验20周。结果表明,日粮添加维生素d对产蛋率、蛋重、采食量、产蛋量和料蛋比没有显着影响(p>0.05);试验第十周6400iu/kg的添加量显着的增加了血清中1,25羟基维生素d的含量(p<0.05);在试验第10周和第20周,不同水平的维生素d的添加对十二指肠、肾脏和蛋壳腺内的钙代谢相关蛋白的表达没有显着变化(p>0.05);维生素d添加量为6400iu/kg可以显着的增加蛋壳厚度(p<0.05);免疫可以显着减小蛋壳厚度(p<0.05),维生素d对此具有缓解作用;维生素d的添加可以增强免疫效果,增加新城疫和禽流感的抗体效价(p<0.05);在免疫之后反应最强烈的7天内,维生素d添加量为6400iu/kg对蛋壳厚度有着很好的改善作用,维生素d添加量为9600iu/kg对蛋壳强度有着很好的改善作用。综上所述,蛋鸡长期饲喂添加0.3%nahco3的碱性日粮,在产蛋高峰期通过增加十二指肠钙结合蛋白(cabp-d28k)的表达,达到了增加体内钙的沉积和蛋壳厚度的增加,但是在产蛋后期没有显着作用,探明了钙代谢过程中相关的蛋白的调控作用,为以后的研究提供了理论依据;利用钙代谢过程的研究结果,针对生产中暗斑蛋和沙皮蛋的现象进行研究,结果发现产生暗斑蛋和沙皮蛋主要是蛋壳腺钙结合蛋白(CaBPD28k)和钙泵(PMCA)表达的问题,通过此途径,成功的用“地顶孢霉培养物”解决暗斑蛋的问题,探明沙皮蛋产生的原因,而且在笼养蛋鸡骨质疏松症的评定方面,建立了通过蛋壳质量来进行粗略估计骨质量的方法;针对钙代谢和免疫应激之间的研究,发现了维生素D可以减缓免疫应激所产生的蛋壳变薄的作用。
周振雷, 胡云峰, 陈秀霞, 陶庆树, 侯加法[7]2007年在《笼养蛋鸡骨质疏松症研究进展》文中指出笼养蛋鸡骨质疏松症(cage layer osteoporosis,CLO)是高产笼养蛋鸡的常见病、高发病,是危害养鸡业最为严重的骨代谢疾病之一,给养鸡业带来较大的经济损失。本文根据国内外研究报道,就该病的病因、流行病学、症状、病理发生和防治进行了综述。
马健[8]2009年在《苏中地区笼养蛋鸡瘫痪综合征的调查与诊断》文中指出笼养蛋鸡瘫痪综合征成为近年来危害蛋鸡养殖的严重的疾病之一,发病率及蛋鸡的死亡淘汰率呈逐年上升的趋势,越来越引起广大养殖户及科技工作者的重视。2006年1月到2008年12月的3年间,我们对苏中蛋鸡养殖密集区的南通市如皋、海安,盐城市东台以及其他县市的部分鸡场进行了笼养蛋鸡瘫痪综合征的发病情况调查。共调查8622批产蛋鸡,发病批次1123批,发病率13.02%,死亡淘汰率11.58%。调查表明,引起笼养蛋鸡瘫痪的原因主要有：病毒性疾病(28.22%)、细菌性疾病(33.42%)、猝死症(8.34%)、骨质疏松症(11.65%)、营养代谢病(10.78%)、中毒(0.14%)、应激(2.96%)、其他因素(4.27%)。笼养蛋鸡瘫痪综合征一年四季均可发病,但炎热季节多发,集中在5月-9月。对海安县墩头地区100个用自配料的蛋鸡场,共计325个批次的产蛋鸡群的调查,以及对产蛋鸡群开产后发生瘫痪患病鸡血钙与血磷的检测。结果表明：患病鸡血清中的钙磷比例显着低于正常鸡中的钙磷比例(P<0.01),提示瘫痪的发生与钙磷比例失调有直接的关系。同时对该地区另外40个蛋鸡养殖户,共计120个批次全程使用某厂家配合饲料与自配料的蛋鸡群调查的比较,证实了蛋鸡瘫痪与钙磷比例失调有关。2007年9月,南通市海安县隆政伟桥养殖户杨某饲养的5000只28周龄罗曼商品蛋鸡,产蛋率突然由95%降到40%,蛋壳颜色变浅,薄壳,软壳；部分笼养蛋鸡瘫痪。经病理剖检、实验室检验、饲料化验、攻毒试验和饲养试验,诊断为饲料的钙磷比例失调引起。通过更换饲料,后鸡群恢复正常。
马利芹, 利凯, 吕文亭, 杨永红, 徐彤[9]2009年在《植物雌激素对笼养蛋鸡疲劳综合症骨骼重塑作用机制的研究进展》文中提出笼养蛋鸡疲劳症,又名笼养蛋鸡骨质疏松症,是现代化集约化生产中产蛋鸡重要的营养代谢性骨骼疾病之一。多发于高产鸡群的产蛋高峰期,可导致产蛋减少,蛋壳褪色,软壳蛋、破壳蛋和畸形蛋的数量增多等现象。植物雌激素广泛存在于天然植物中,安全性较高,可与雌激素受体相结合,表现出雌激素激动剂作用,从而有效防止笼养蛋鸡骨质疏松症,对其作用机制的研究可对今后该病的防治提供有效理论基础和实践参考。
侯乐乐[10]2011年在《鸡骨保护素真核质粒pcDNA3.1（+）-chOPG的构建及其在蛋鸡体内、外表达及功能的研究》文中进行了进一步梳理骨保护素(oeteoprotegerin, OPG)是一种能阻断RANKL与RANK结合,抑制破骨前体细胞分化、成熟破骨细胞活性并诱导其凋亡的分泌型糖蛋白。体内调节骨代谢的许多激素和细胞因子最终通过调节OPG/RANKL的表达而发挥作用。鉴于OPG在骨代谢中的重要调节作用,本文旨在构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-chOPG;体外试验,通过脂质体介导转染鸡胚成纤维细胞,表达能够抑制破骨细胞生物学活性的外源chOPG蛋白；体内试验,通过肌肉注射蛋鸡骨骼肌,探讨质粒pcDNA3.1(+)-chOPG在蛋鸡体内的分布、外源chOPG蛋白的表达和对主要器官组织的病理学变化,以及对蛋鸡生化指标、生产性能和骨骼代谢的影响,为进一步研究笼养蛋鸡骨质疏松发生机制提供新的思路。试验Ⅰ鸡骨保护素(chOPG)的亚克隆及pcDNA3.1(+)-chOPG真核重组质粒的构建亚克隆OPG基因开放阅读框并构建pcDNA3.1(+)-chOPG真核重组质粒。以本实验室保存的重组鸡pMD1 8-T-OPG质粒为模板,用PCR方法亚克隆OPG基因的阅读框(ORF),并插入NheⅠ、XhoⅠ酶切位点和相应的保护碱基,连接到克隆载体pMD18-T,测序、双酶切后,用T4DNA连接酶连接到pcDNA3.1(+),连接产物转化大肠杆菌DH5α进行筛选、序列测定。得到了OPG基因的阅读框(ORF)的双链DNA,阳性质粒酶切鉴定有pcDNA3.1(+)和chOPG两条带；OPG基因的阅读框(ORF)测序图谱与GenBank上登录的鸡OPG (DQ098013)(?)报道完全一致。成功构建真核重组质粒pcDNA3.1(+)-chOPG.试验Ⅱ质粒pcDNA3.1(+)-chOPG体外转染成纤维细胞表达的研究探讨质粒pcDNA3.1(+)-chOPG体外转染鸡胚成纤维细胞chOPG蛋白表达。由阳离子脂质体2000介导将pcDNA3.1(+)-chOPG质粒转染鸡胚成纤维细胞,用RT-PCR法检测OPG mRNA的转录；间接免疫荧光试验检测细胞内蛋白表达；Western Blot检测表达的chOPG蛋白的大小；ELISA法检测上清液中OPG蛋白含量。在pcDNA3.1(+)-chOPG质粒转染组OPG mRNA转录结果呈阳性,而对照组和空载体组呈阴性;在荧光显微镜下观察,质粒组有绿色荧光成纤维细胞出现,而对照组和空载体组呈阴性,并且脂质体和质粒的比例为1：3时,效果最明显。Western Blot检测表达的chOPG蛋白的大小约为90 kDa；ELISA检测显示chOPG含量在上清液中为15.78±0.22 ng·mL-1。pcDNA3.1(+)-chOPG质粒能被转染到鸡胚成纤维细胞中,并表达chOPG蛋白。试验ⅢchOPG重组蛋白对体外培养鸡胚破骨细胞凋亡、骨吸收功能的影响研究真核重组质粒pcDNA3.1(+)-chOPG转染鸡胚成纤维细胞后表达的外源chOPG蛋白对破骨细胞凋亡、骨吸收功能的影响。机械分离鸡胚破骨细胞,获得破骨细胞悬液,随机分为空白对照组、空载体组、pcDNA3.1(+)-chOPG质粒组。用流式细胞仪检测破骨细胞凋亡结果；重氮盐法检测破骨细胞分泌的TRAP活力;噬骨试验检测骨吸收陷窝的数量和面积以及测定钙离子含量,观察破骨细胞的骨吸收功能。与空白组和空载体组相比,pcDNA3.1(+)-chOPG质粒组破骨细胞凋亡率显着升高,而TRAP酶浓度,骨吸收陷窝的数量、面积和钙离子浓度,pcDNA3.1(+)-chOPG质粒组下降,差异极显着(P<0.01)。真核重组质粒pcDNA3.1(+)-chOPG转染鸡胚成纤维细胞后表达的OPG蛋白能抑制体外破骨细胞的生物学活性,促进破骨细胞凋亡。试验ⅣchOPG外源蛋白的表达及其在不同组织中的分布研究chOPG外源蛋白的表达及其在不同组织的分布。36羽56周龄的ISA蛋鸡随机分为2组(12羽对照,24羽试验)。对照组和试验组分别肌肉注射300pL生理盐水和300雌质粒pcDNA3.1(+)-chOPG。注射后3h、1 d、7d、14d、21d、28d采集注射部位的肌肉、对侧肌肉、肝、肾、脾及心脏。分别采用RT-PCR和Western Blot (?)(?)方法检测其组织中chOPG基因蛋白表达及含量,PCR法和组织切片技术用于检测质粒分布和组织病变。注射部位骨骼肌3h后即检测到chOPG蛋白的表达,7d达到最高值,然后逐渐下降,28d完全消失。1d后所有组织均检测到质粒pcDNA3.1(+)-chOPG,以后则逐渐下降,28 d后所有组织中均消失。质粒在肝脏中代谢速度最快。主要器官即心、肝、脾、肾、注射部位骨骼肌组织未发现明显的病理学变化。肌注300μg pcDNA3.1(+)-chOPG质粒后,chOPG外源蛋白及质粒表达量在开始数天较高,以后逐渐下降,28 d完全消失,主要器官组织未发现明显的病理学异常。试验Ⅴ质粒pcDNA3.1(+)-chOPG对产蛋后期ISA蛋鸡生产性能和骨代谢的影响探讨质粒pcDNA3.1(+)-chOPG对产蛋后期ISA蛋鸡生产性能和骨代谢的影响。80羽56周龄ISA蛋鸡随机分为A、B、C、D 4组。每隔2周肌肉注射剂量分别为0μg、200μg、400μg、600μg pcDNA3.1(+)-chOPG真核重组质粒。每周采血测血钙、血磷、碱性磷酸酶。每天记录产蛋量、破壳蛋数,测定蛋壳强度和厚度。最后测定骨生物力学特性和骨密度。各试验组血浆中钙、磷含量的总平均值均低于对照组,呈下降趋势,与对照组相比,血钙有显着性差异(P<0.05),而血磷含量差异不显着(P>0.05)；B、C、D组与A组相比,血浆碱性磷酸酶活性的总均值呈上升趋势,有显着性差异(P<0.05)。产蛋后期蛋鸡周平均产蛋量、蛋壳厚度和强度与对照组比较,均无显着性差异(P>0.05)。B组平均软破壳蛋数量与A组相比,无显着性差异,而C、D组平均软破壳蛋数量上升,有显着性差异(P<0.05)。各试验组胫骨和股骨的最大载荷值、韧性和骨密度均呈上升趋势,与A组相比均有显着性差异(P<0.05)；其中B组有极显着性差异(P<0.01)。结果表明,适当剂量(200μg)的外源质粒pcDNA3.1(+)-chOPG在不影响产蛋量的情况下,可以改善骨代谢。
参考文献：
[1]. 笼养蛋鸡骨质疏松症防治的研究[D]. 周振雷. 南京农业大学. 2003
[2]. 笼养蛋鸡骨质疏松的IP98防治机理及骨质疏松与IGF-Ⅰ的RFLP关系研究[D]. 张皎. 南京农业大学. 2004
[3]. 骨疏康防治笼养蛋鸡骨质疏松症的效果及其机理研究[D]. 周振雷. 南京农业大学. 2007
[4]. 维生素D_3对青年蛋鸡骨代谢的影响及中药对笼养蛋鸡骨质疏松症的防治[D]. 邓益锋. 南京农业大学. 2001
[5]. 日粮中不同粒度钙源对产蛋后期笼养蛋鸡骨代谢及生产性能的影响[D]. 陶庆树. 南京农业大学. 2006
[6]. 笼养蛋鸡钙代谢对蛋壳质量的影响及其机制研究[D]. 姜明君. 山东农业大学. 2015
[7]. 笼养蛋鸡骨质疏松症研究进展[J]. 周振雷, 胡云峰, 陈秀霞, 陶庆树, 侯加法. 畜牧与兽医. 2007
[8]. 苏中地区笼养蛋鸡瘫痪综合征的调查与诊断[D]. 马健. 南京农业大学. 2009
[9]. 植物雌激素对笼养蛋鸡疲劳综合症骨骼重塑作用机制的研究进展[J]. 马利芹, 利凯, 吕文亭, 杨永红, 徐彤. 养禽与禽病防治. 2009
[10]. 鸡骨保护素真核质粒pcDNA3.1（+）-chOPG的构建及其在蛋鸡体内、外表达及功能的研究[D]. 侯乐乐. 南京农业大学. 2011