天津市河西区疾病预防控制中心 300211
【摘 要】目的：探讨在手足口病病毒核酸检测中应用荧光PCR技术的价值。方法：对本科室203例手足口病患者（2016年1月1日到2018年8月13日间收治）进行研究，采集样本（203份）实施荧光PCR技术检测病毒核酸，分析总结患者的检测结果。结果：203份样本CA10型检出率为6.90%；EV71检出率为18.23%；CA6型检出率为25.62%；CA16型检出率为23.65%；混合感染检出率为0.49%，总阳性率为74.88%。重症患儿标本中检测EV71型阳性率、混合感染阳性率及总阳性率明显高于普通患儿（P<0.05）。结论：在手足口病病毒核酸检测中应用荧光PCR技术可有效了解患儿感染状况。
【关键词】手足口病；病毒核酸检测；荧光PCR技术；价值
手足口病是当前较为常见的感染性疾病，是指感染肠道病毒而引起的传染性疾病。加强手足口病患者实际感染病毒检测，根据检测结果进行针对性治疗是保证治疗效果，改善患者预后的关键[1]。目前荧光PCR技术在病毒核酸检测中的应用逐渐增多，为了解该检测技术的效果，本研究对203例手足口病患者（2016年1月1日到2018年8月13日收治）实施了荧光PCR技术检测病毒核酸，现将检测效果总结：
1 资料与方法
1.1 一般资料
将2016年1月1日到2018年8月13日间作为本研究病例纳入时间范围，取期间本科室203例手足口病患儿作为研究对象。患者年龄范围4个月～43岁，平均年龄 5.8岁（s=3.7）；性别分布：男/女为111/92；采集便样本203份；病情：普通患者标本163份，重症患儿标本40份。患者均实施临床检查确诊为手足口病。
1.2 方法
对所有样本均实施荧光PCR技术检测病毒核酸，采集便样本，挑取少量加入1000ml生理盐水进行震荡离心，制成混悬液，在低温下（4℃）保存，并在2h内完成检测。取样本进行RNA提取，采取江苏硕世生物科技股份有限公司提供的病毒核酸提取试剂盒（膜吸附柱法）进行RNA提取，并实施-80℃保存。在标本中加入PCR反应液、酶混合液、肠道病毒通用反应液、多重反应液等，将反应模置入QuantStudio 3 荧光PCR扩增仪，设置质控品，并进行标记，完成扩增及结果判定。以出现扩张曲线（S型），且Ct≤35表示阳性。
1.3 观察指标
①分析总结患者的检测结果。
②分析不同年龄样本的检测结果。
③分析不同病情样本的检测结果。
1.4 数据统计
用SPSS20.0软件处理，用率表示检出率，检验，P＜0.05表示存在统计学意义。
2 结果
2.1 患者的检测结果分析
203份样本中检出CA10型14份，检出率为6.90%；EV71型37份，检出率为18.23%；检出CA6型52份，检出率为25.62%；检出CA16型48份，检出率为23.65%；混合感染（EV71+CA16）1份，检出率为0.49%，阴性标本51份，检测阳性标本152份，总阳性率为74.88%。
2.2 不同年龄样本的检测结果分析
3-4岁患者样本检测阳性率最高，详见表1。
表1 不同年龄样本的检测结果分析
2.3 不同病情样本的检测结果分析
重症患儿标本中检测EV71型阳性率、混合感染阳性率及总阳性率明显高于普通患儿（P<0.05），见下表2。
表2 不同病情样本的检测结果分析
3 讨论
手足口病多数患儿病情可自愈，少数患儿治疗不及时可引起心肌炎、脑膜炎、肺水肿等严重并发症，甚至危及患儿生命安全。因此，及早对患儿实施针对性诊治是改善患儿预后的关键。肠道病毒感染是手足口病发生的主要原因，及早明确患儿肠道病毒感染类型在患儿疾病治疗过程中具有重要意义[2]。本研究中采取荧光PCR技术检测病毒核酸，通过该技术可及时明确患儿病毒感染状况，并明确病毒类型。且实施荧光PCR技术诊断时，操作过程受外界因素影响较小，诊断准确率高，因此，可通过荧光PCR技术辅助病毒感染检测，辅助手足口病的诊治过程[3]。本研究中检测总阳性率为74.88%，感染标本较多，且在标本中，CA6型检出率最高，樊亚丽[4]等人的研究中标本肠道病毒检出率为74.85%，且EV71型检出率最高，达41.92%，与本研究结果存在一定差异，说明不同地区、不同样本手足口病的肠道病毒流行特点存在较大差异，需根据实际检测结果指导临床治疗。不同年龄患儿检测结果显示3-4岁患者检测阳性率最高，说明小儿是手足口病的主要发病人群，3-4岁儿童年龄小，且多进入幼儿园或相关学前教育机构学习，且免疫力较差，自我管理及护理能力较差，感染风险较高，需进行重点监察。本研究中重症患儿标本中检测EV71型阳性率、混合感染阳性率、总阳性率明显高于普通患儿，提示EV71型感染、混合感染可能会加重患儿病情，影响患儿预后，需加以重视。
综上所述，在手足口病病毒核酸检测中应用荧光PCR技术可有效了解患儿感染状况，辅助患儿疾病诊治过程。
参考文献：
[1]贺赛红.双重实时荧光PCR在手足口病快速检测中的应用[J].大家健康（下旬版），2015，9（3）：351-351.
[2]赵凯丽，王芳，林牧，等.实时荧光定量PCR技术在手足口病病原体检测中的临床应用[J].现代医药卫生，2016，32（15）：2310-2311，2314.
[3]袁海涛，刘丽娜，李忠延，等.实时荧光PCR技术在手足口病实验诊断中的应用价值[J].中国农村卫生，2015，7（8）：81-81.
[4]樊亚丽，李卫国.实时荧光PCR技术应用于手足口病病原学检查的体会[J]. 医药论坛杂志，2015，36（6）：56-58.
论文作者:马超阳
论文发表刊物:《兰大学报（医学版）》2018年6期
论文发表时间:2018/11/20
标签：检出论文; 手足论文; 患儿论文; 荧光论文; 样本论文; 核酸论文; 率为论文; 《兰大学报（医学版）》2018年6期论文;