采用家系重建法鉴定单亲祖孙关系1例论文_徐丹丹 1,吉董董 1,潘湖1

摘要 目的 探讨单亲隔代祖孙关系的鉴定方法 方法 提取被鉴定人检材DNA，通过复合荧光扩增和毛细管电泳得到STR基因座分型。分别用 ITO 法和家系重建法计算祖孙关系指数。对于不能确定的基因型，按最小概率值计算。 结果 家系重建法计算祖孙亲权指数明显高于ITO法。 结论 对于单亲隔代亲权鉴定的案例，尽可能引入更多的家庭成重建家系，以便推断缺失成员的STR基因座分型，从而计算祖孙亲权指数，以便提供更加明确的鉴定意见。

关键词：孟德尔遗传定律；STR基因座；家系重建；单亲隔代；祖孙关系

1.案例

1.1简要案情

江某,女,未婚育有一子一女,现孩子生父因病去世,因继承遗产需要委托我中心进行祖孙关系鉴定。

1.2 检验方法

1.2.1 DNA提取

采用chelex 100法分别抽提祖母、生母、孙子、孙女、大伯、大姑、小姑共7人口腔拭子DNA。

1.2.2常染色体STR分型检测

采用人类STRtyper-21G扩增荧光检测试剂盒（plus）和STRtyper-23comp常染色体补充位点试剂盒（宁波海尔施基因科技有限公司）对上述7份口腔拭子提取的DNA进行复合扩增（扩增体系均为10μL,扩增程序按照相关试剂盒说明书进行,扩增反应在9700型PCR（美国ABI公司）仪上进行）,用ABI-3130XL型基因分析仪（美国ABI公司）进行毛细管电泳后用GeneMapper ID v3.2软件进行数据分析。

1.2.3 X染色体和Y染色体STR分型检测

采用MiroreaderTM 19X Direct ID System试剂盒（阅微基因技术有限公司）检测祖母与孙女的19个X-STR基因座分型,采用MiroreaderTM 29Y Direct ID System试剂盒（阅微基因技术有限公司）检测大伯与孙子的29个Y-STR基因座分型。按照试剂盒说明书进行扩增、电泳和结果分析。

1.3检验结果

1.3.1常染色体STR分型结果

所检测个体STR分型结果及祖父STR分型推断见表1

表1 STR分型结果及祖父STR分型推断

1.3.2 X染色体和Y染色体STR分型结果

性别染色体STR分型结果见表2、表3。

表2 Y-STR基因座分型结果

1.4 数据分析

根据性别染色体STR分型结果显示，祖母与孙女的X-STR基因分型均能在祖母的X-STR基因分型中找到来源，符合孟德尔遗传定律；大伯与孙子的Y-STR基因分型除了DYS570基因座之外均一致，考虑突变可能。

1.4.1 ITO法计算祖孙关系指数

采用本实验室使用的中国汉族人群STR基因座分布频率，按照ITO法[1-2]分别计算祖母与孙子、孙女的祖孙关系指数(HS)LR值。当检测20个STR基因座时，祖孙关系指数(HS)LR值分别为1.2485和27334.9880；当加试剂盒至39个STR基因座时，祖孙关系指数(HS)LR值分别为325.9551和94965.9559。结果见表4。

1.4.2 家系重建法计算祖孙亲权指数

根据家系重建法推断祖父的等位基因或可能的等位基因，按照生物学祖孙关系鉴定规范[3]采用本实验室使用的中国汉族人群STR基因座分布频率，分别计算孙子、孙女的祖孙亲权指数（GI值），20个STR基因座累积祖孙亲权指数（CGI值）分别为7147.1676和920202.2736；当加试剂盒至39个STR基因座时累积祖孙亲权指数（CGI值）分别为27253706028.0891和3782182867.5743。计算结果见表5。

2.分析讨论

TIO法是基于孟德尔遗传分离定律计算两个个体之间存在亲缘关系机会的方法，在同胞、祖孙关系鉴定中可以得到较好的应用。本案中，采用ITO法分别计算祖母与孙子、孙女20个STR基因座的祖孙关系指数，LR指分别为1.2485和27334.9880；当加试剂盒至39个STR基因座时，LR值分别为325.9551和94965.9559。参照标准三联体认定亲权关系的PI值，目前业界比较认同的LR阈值为4000，本例中孙子的LR值未达到认定要求，孙女的LR值达到认定要求。

根据孟德尔遗传定律，通过比对祖母、大伯、大姑和小姑的基因型可以推断出祖父的基因型。其中D3S1358、D21S11、D5S818、CSF1PO、Penta D、vWA、D19S433、D12S391、D6S1043、D2S1338、D1S1656、D13S325、D9S1122、D3S1744、D21S2055、D20S482、D7S3048、D2S441、D19S253、D10S1248、D17S1301、D22-GATA等22个基因座可以确定祖父的基因型，在其余的基因座只能确定其中一个等位基因。

在计算祖孙亲权指数时，祖父母传递生父基因的概率及该基因座中生父在祖父母的4个等位基因中所占的比例。本案中，由于祖父的部分基因座等位基因不确定，故取生父基因在该基因型中所占的最小概率计算其最小累积亲权指数，20个STR基因座累积祖孙亲权指数（CGI值）分别为7147.1676和920202.2736；当加试剂盒至39个STR基因座时累积祖孙亲权指数（CGI值）分别为27253706028.0891和3782182867.5743。根据生物学祖孙关系鉴定规范，累积祖孙指数大于10000时给出支持意见，累积祖孙指数小于0.0001时给出排除意见。本案中孙子的20个STR基因座累积祖孙指数为7147.1676，无法给出鉴定意见；但当检测系统增至39个STR基因座时，其累积祖孙亲权指数为27253706028.0891，达到认定要求。孙女的累积祖孙亲权指达到认定要求。

在复杂亲缘关系中，特别是隔代单亲亲缘关系鉴定，当ITO法无法满足鉴定需求时，应竟可能引入更多的家庭成员，采用家系重建法给出鉴定意见。当检测系统无法满足鉴定需求时，应增加检测的STR基因座数量以达到检测要求。

［1］ 陆惠玲，杨庆恩 . 用 ITO 法计算两个体间的血缘关系机会［J］.中国法医学杂志，2002, 17(3) ：188?191.

［2］ 赵书民 ，张素华 ，等. 两个个体间常用亲缘关系机会［J］.法医学杂志，2011, 27(5) ：330?333.

［3］ 祖孙亲缘关系鉴定规范 SF/Z JD0105005-2015

作者简介：徐丹丹（1991-），女，浙江宁波人，法医学学士，主要从事于法医物证学方向研究。

论文作者:徐丹丹 1,吉董董 1,潘湖1

论文发表刊物:《科学与技术》2019年19期

论文发表时间:2020/4/29

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