张子旸* 廖欣1 王启峰*
1.牡丹江医学院附属红旗医院妇产科 157011；*.黑龙江省牡丹江市第二人民医院 157013
摘要：目的：研究Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响。方法：分析Stathmin1基因表达与微管药物联合对人肺腺癌细胞A549细胞存活率的影响。结果：0.5μM紫杉醇和去氧鬼臼毒素作用A549细胞时，细胞存活率分别为28.5%、45.8%，Stathmin1与0.5μM紫杉醇、DPPT联合作用A549细胞时，细胞存活率有所下降。结论：Stathmin1基因表达与微管药物结合，能够起到抑制细胞增殖作用，降低肿瘤药物用量。
关键词：Stathmin1基因表达；微管药物；抑制细胞增殖；影响
Stathmin1是一种细胞可溶性磷蛋白，普遍且多数存在于脊椎动物细胞中。基于不同阶段的细胞有丝分裂，其蛋白能够经由磷酸化与去磷酸化的状态进行活性转变调节[1]，可以和微管进行结合，对微管的解聚以及重组过程进行加速，或者和游离微管蛋白进行结合对微管的聚合进行阻止，达到对细胞微管动态系统有效调节的作用，从而对细胞增殖以及分化进行有效调节[2]。本文将研究Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响，研究如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取2016年5月至2017年8月收集的人肺腺癌细胞A549细胞。
1.2方法
1.2.1人肺腺癌细胞A549培养与转染
将A549细胞培养在器皿中，待其成长到4/5左右，对其进行消化处理，应用0.25%拥有EDTA的胰蛋白酶。后以6×104个/mL细胞浓度，铺设96孔板，待细胞成长到70%左右实行转染，在每个孔里加入0.5μL Lipofectamine以及0.2μM干扰质粒，混匀，实行转染。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆转染5h后更换与之相应的紫杉醇与DPPT培养基，将其放置细胞培养箱内进行培养，1d对荧光表达现象进行观察，2d后对细胞存活率进行检测。
1.2.2MTT法检测细胞存活率
对细胞进行加药物培养2d后，吸掉原有培养基，在每个孔内加入50μL与MTT溶液，放入5%CO2，培养箱调至恒温37℃，置于其中4h，将上清液吸去，每个孔内加入150μL DMSO溶解沉淀，置于摇床上摇30min，在酶标仪上570μm处对吸光值进行检测。
1.3观察指标
①人肺腺癌细胞A549细胞存活率。
2.结果
2.1人肺腺癌细胞A549细胞存活率影响
0.5μM紫杉醇和去氧鬼臼毒素作用A549细胞时，细胞存活率分别为28.5%、45.8%，Stathmin1与0.5μM紫杉醇、DPPT联合作用A549细胞时，细胞存活率分别为21.2%与32.4%。
3.讨论
Stathmin1蛋白能够对细胞周期进行有效调节，也可以在细胞分化中起到一定作用，是一种细胞可溶性磷蛋白。紫杉醇以及DPPT这两类抗癌药物对于肿瘤细胞的抑制都作用于微管。对于紫杉醇而言，其作用是对微管聚合进行有效促进，
并且可以对微管结构进行稳定，以达到阻止抑制微管解聚成为亚单位[3]，造成微管异常排列，导致最终形成平稳的非功能性微管束，阻碍有丝分裂纺锤体的发展与形成。而去氧鬼臼毒素则是通过与微管蛋白进行结合，从而达到对微管聚合的抑制作用，让有丝分裂细胞停止在G2/M期。经由相关研究发现，DPPT应用于人肺腺癌细胞A549细胞中，效果要略差于紫杉醇[4]。
由研究分析以及数据研究结果得到，Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用有一定影响，可以对细胞增殖进行降低，从而减少肿瘤药物用量。在0.5μM紫杉醇与去氧鬼臼毒素作用A549细胞时细胞存活率要高于0.5μM紫杉醇、DPPT联合作用下A549细胞存活率，由此可见Stathmin1基因表达与微管药物结合可以对细胞增殖产生良性影响。对Stathmin1基因表达进行降低，同时加入紫杉醇进行共同作用，比单独应用Stathmin1基因表达或单独应用紫杉醇，更能降低细胞生长率，促进癌细胞凋亡，减少用药剂量，效果更好。
综上所述，研究Stathmin1基因表达对微管药物抑制细胞增殖作用的影响，发现紫杉醇可以对Stathmin1基因表达进行抑制，而Stathmin1基因表达则可以对紫杉醇微管聚合进行削弱，因此Stathmin1基因表达与微管药物联合能够对细胞增殖进行抑制，减少肿瘤药物用量，为肿瘤治疗提供新的治疗形式。
参考文献：
[1]张彩凤，夏永华，李贞娟，等. StathminsiRNA抑制人胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤的生长并诱导细胞凋亡[J]. 中国病理生理杂志，2012，28（7）：1253-1257.
[2]林芳，高萍，刘昕阳，等. 靶向微管解聚蛋白stathmin siRNA对Aβ1-42诱发PC12细胞损伤的保护作用[J]. 临床与病理杂志，2012，32（5）：369-373.
[3]王波，王彬，张连斌，等. TUBB3/STMN1基因表达与非小细胞肺癌EGFR通路的相关性[J]. 中国肺癌杂志，2013，16（10）：547-552.
[4]雷迅，范才文，田晶，等. 微管不稳定蛋白stathmin基因沉默影响鼻咽癌5-8F细胞系增殖与凋亡[J]. 中国病理生理杂志，2012，28（7）：1335-1337.
*基金项目：牡丹江市科学技术计划项目，编号：Z2015s0026
作者简介：张子旸，（1974-），女，天津人，汉族，本科，副主任医师，研究方向：妇产科相关医技研究。
通讯作者：王启峰，主任医师，
论文作者:张子旸*,廖欣1,王启峰*
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年7月20期
论文发表时间:2018/8/31
标签：微管论文; 细胞论文; 紫杉醇论文; 存活率论文; 基因论文; 作用论文; 药物论文; 《中国误诊学杂志》2018年7月20期论文;