敖永琴
(重庆市丰都县人民医院 重庆 丰都 408200）
【摘要】 目的：对乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制进行分析探讨，为今后的临床病理工作提供有价值的参考信息。方法：选择2013年1月～2015年12月，我院收治的乳腺癌患者56例作为研究对象，取乳腺组织标本展开免疫组化学染色，并实施有效的质量控制措施，观察乳腺切片标本以及检验结果。结果：乳腺组织切片没有出现收缩干裂现象，组织结构细胞形态相对清晰，能够对乳腺癌细胞、炎症细胞予以清晰的辨别。HE染色鲜艳，细胞核染色结果显示，颜色为鲜明蓝色。结论：免疫组化染色对乳腺癌的病理检查具有重要意义，染色结果可为临床诊断提供可靠的参考依据，值得关注并推广。
【关键词】 乳腺癌；免疫组织化学染色；病理；质量控制
【中图分类号】R655.8 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）13-0153-02
临床上，乳腺癌为女性常见恶性肿瘤，临床诊断多依赖病理检查。免疫组织化学染色为病理诊断中应用较广的一种诊断方式，为临床诊断中常用的辅助性参考指标，病理技师为免疫组化的操作者与质量控制的执行者，对免疫组化诊断的准确性具有重要意义[1]。本次研究中，出于对乳腺癌免疫组织化学染色及质量控制进行分析探讨，为今后的临床病理工作提供有价值的参考信息，对我院收治的乳腺癌患者采取免疫组化法进行染色诊断，并对检查结果进行回顾性分析，结果汇报如下。
1.资料与方法
1.1 一般资料
研究中资料来源于我院收治、且符合病理诊断标准的乳腺癌患者，选择其中的56例作为研究对象，均为女性，年龄34～67岁，平均（47.6±12.1）岁。
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1.2 方法
1.2.1研究方法 选择2013年1月～2015年12月，我院收治的乳腺癌患者56例作为研究对象，取乳腺组织标本展开免疫组化学染色，并实施有效的质量控制措施，观察乳腺切片标本以及检验结果。
1.2.2操作步骤 实验试剂：PBS液,第一抗体为兔抗人雌激素受体（ER）、兔抗人孕激素受体（PR）、均为细胞核着色，兔抗人CerbB-2单克隆抗体，为细胞膜着色。第二抗体为快捷免疫组化Elivision试剂盒，DAB试剂盒。
①组织切片。取受检者乳腺标本，经浓度为10%的中性甲醛进行固定，取病变组织，经酒精梯度脱水，二甲苯透明、石蜡浸润包埋，制成蜡块，切片，厚度在2～3um之间，而后展片，保证切片展开充分，然后采取APES防脱片处理过的载玻片捞片，最后在65℃条件下温箱烤片，持续2～4小时。
②免疫组化染色：烤片完成后，经二甲苯脱蜡、酒精梯度浓度脱水，后经蒸馏水洗，PBS液将切片浸泡2min，连续操作3次，浓度为3%的过氧化水浸泡5～10分钟，从而将内源性过氧化物酶活性予以消除。PBS浸泡2分钟，连续3次，在高压锅内放置柠檬酸缓冲液，加热至沸腾，然后将切片放置在高温塑料切片架上，放入锅内，将锅盖盖好，继续加热，加热完成后压力锅离开水源，冷却后采取二步法，保证切片不含有生物素，避免生物素造成非特异性背景染色，修复后切片采取PBS液清洗2次，滴加一抗工作液，在37℃条件下孵育1小时，PBS液清洗3次，滴加二抗，37℃条件孵育15～20分钟，最后经PBS液清洗3次，DAB显色。复染，封片。
1.3 结果判定
在癌细胞胞质或胞膜上出现黄染颗粒视为染色结果为阳性。其中颗粒呈现淡黄色,且均匀视为染色结果呈现弱阳性（＋）；颗粒呈现黄色，分布较不均匀视为染色结果呈现中度阳性（＋＋）；颗粒呈现深黄或者是褐色，块状视为染色结果呈现为强阳性（＋＋＋）。
1.4 免疫组化标准化管理
①检测方法选择。免疫组化检测方法较多，多为生物素型，非生物素型两类，由于组织中含有内源性生物素，因此会对免疫组化染色进行干扰，生物型检测过程中，应对内源性生物素进行干扰。②免疫组化操作标准化。现阶段，免疫组化染色包括手工操作、全自动免疫组化仪器操作两种，手工染色时，一定程度上会受实验员因素的干扰。全自动免疫组化仪的问世，避免了人为因素干扰，使染色结果可靠性得以保证，对于免疫组化质量控制有益。③阴性与阳性对照。在每次免疫组化染色中，应严格设立阳性对照、阴性对照。
2.结果
乳腺组织切片没有出现收缩或者是干裂现象，组织结构细胞形态观察清晰，乳腺癌细胞、炎症细胞均可获得清晰的辨别，经HE染色后，颜色鲜艳，细胞核呈现为鲜明的蓝色，细胞质伊红染色，呈现深浅不同的粉红色，细胞核呈现不同程度的蓝色，对比度鲜明，免疫组化染色结果显示，病变组织结构完整，未发生明显的脱片状况，阴性与阳性存在鲜明的对比，阳性物质定位十分准确，背景干净并且十分清晰，没有非特异性染色。结果稳定可靠，具有高度的敏感性，且特异性也较强。
3.讨论
近几年，随着临床各类抗体的出现，人们逐渐发现，免疫组化在病理诊断、临床治疗中均具有十分重要的作用，值得注意的是，现阶段临床上免疫组化技术依旧存在一定程度的缺陷或者不足，病理技术应对其给予足够的重视，通过适当的质量控制，弥补免疫组化的不足，保证临床病理诊断的准确性，为临床诊断和治疗提供可靠的参考信息[2]。
曾有研究指出[3]，免疫组化质量的影响因素较多，涉及到方方面面，因此，出于确保免疫组化结果可靠性、稳定性的目的，加强免疫组化室内质量控制管理，对相应质控标准予以制定的意义重大。曾有学者[4]结合科室实际情况，对实验前、实验中、实验后三个方面，可能会对免疫组化染色结果产生影响的因素展开了总结分析，并制定了相应的质控管理细则，并且在实践中获得良好效果。
【参考文献】
[1]张卫琴.免疫组化技术在病理诊断中的应用[J].安徽医药,2012,16(11):1700-1702.
[2]孙琪.免疫组化染色质量控制的经验和体会[J].宁夏医科大学学报,2010,32(01):146.
[3]马恒辉,周晓军.提高免疫组化染色质量的相关处理和操作[J].临床与实验病理学杂志,2011,27(07):760-782.
[4]林蓁,田甜.免疫组化染色防止脱片几点改进[J].实用癌症杂志,2010,25(01):73-75.
论文作者:敖永琴
论文发表刊物:《医药前沿》2016年5月第13期
论文发表时间:2016/5/25
标签：免疫论文; 病理论文; 切片论文; 乳腺癌论文; 质量控制论文; 乳腺论文; 组织论文; 《医药前沿》2016年5月第13期论文;