摘要：紫外可见分光光度计是一种很重要的分析仪器，本文作者根据JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程的规定，总结了检定紫外可见分光光度计应注意的问题及在检定过程中的一些体会和经验，希望能够对检定员在日常检定中有所帮助。
关键词：紫外可见分光光度计；检定；注意事项
1 概述
紫外可见分光光度计是一种常见的化学类的计量器具，同时也是一种很重要的分析仪器。被广泛应用于化学、生物学、医学、环境科学等科学研究领域和化工、冶金、医药、食品、环境检测等行业，紫外可见分光光度计的准确性直接关系到后续实验的准确性和有效性。因此，为保证紫外可见分光光度计计量性能的准确可靠，对紫外可见分光光度计的计量检定至关重要，本文总结了检定紫外可见分光光度计应注意的问题，对提高紫外可见分光光度计的计量检定质量有一定的参考作用。
2 检定紫外可见分光光度计应注意的问题
2.1 检定杂散光应注意的问题
紫外可见分光光度计的杂散光指标决定了仪器的可靠性和灵敏度，过大的杂散光不但会淹没小吸收峰，造成光谱图线条的连续不光滑，还会降低仪器的测光准确度。杂散光是指到达接收器的除规定定义波长以外的其他波长的光，它以两种形式出现：第一种是杂散光波长与测量波长相同，可能不通过样品就射到检测器上，引起的原因是由于各种光学机械零件和样品本身反射和散射。第二种杂散光是测定波长以外的偏离正常光路到达检测器的光线，它通常是由光学系统的缺陷引起的，如不必要的反射面、光束孔径不匹配、灰尘的散射、光学表面的擦痕，光学系统的像差等。杂散光检定可采用标准溶液法和标准滤光片法，一般实际检定大多数采用标准滤光片法。杂散光的比例在光强强度、 光谱透光率的检测器的灵敏度等级较低时变大，所以在紫外分光光度计中应当首先检定（200～220）nm区域的杂散光。
2.2 检定波长应注意的问题
根据JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》要求，可以使用定值的氧化钬、镨钕、镨铒或者干涉滤光片进行检定，还可使用氧化钬标准溶液和分析纯1，2，4-三氯苯对波长进行检定。不带自动扫描功能的仪器，需对检定点使用空气作为空白进行100%和0%透射比的调节，然后将滤光片或标准溶液放入样品室进行测量，从同一方向逐点测量不同波长的透射比，直到找出吸光度峰值或者透射比谷值。带自动扫描功能的仪器需先设定波长范围并进行基线扫描，接着对滤光片或标准溶液进行扫描，波长的示值误差应小于规程规定。一般情况下，检定员尽量选择从低波长点向高波长点逐渐进行，这样光源强度是由弱到强、由小到大成渐进变化，对仪器光电接收系统起到有益的保护作用，而不是由强到弱或由弱到强突变刺激仪器，以免对仪器光源和光电接收系统造成意外故障，给检定工作带来不便。
若检定员发现仪器波长示值超差，需要进行调整，调整方法：先将一标准干涉滤光片放入比色槽内，找到该标准干涉滤光片的透射比峰值。打开仪器上盖，在波长盘整体不动的情况下，将固定刻度盘的三个螺丝松开，轻轻转动表层刻度盘，使其对准该干涉滤光片的标准值，然后将固定刻度盘的三个螺丝轻轻拧紧(底盘始终不能转动)，盖上仪器盖，对三个波长段均检定准确后即完成了这次调整。在此类问题的解决过程中，大部分情况下表层刻度盘的调准量要考虑到是否满足全部可见光波长段的误差要求。
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2.3 检定透射比应注意的问题
透射比反映了紫外可见分光光度计的测光准确度，实际检定中多使用金属镀膜滤光片和中性滤光片，其中金属镀膜滤光片可以满足紫外光段和可见光段的检定，中性滤光片仅可满足可见光段的检定。检定中经常会发现部分单光束低端仪器透射比示值误差超差的现象。透射比示值误差超差时，需要利用光波进行调修。因此，进行误差调修前要检定光波保证调修条件达标。比色皿架倾斜时吸收池光程发生改变就会造成透射比误差超差。此时进行调修的办法是，保证光束垂直通过比色皿中心为基点调整比色皿底座。光门密闭异常，手动挤压光门往往会导致透射比误差超差。故障排除办法是对，光门组件进行更换或维修保养。而比色皿配套性超差在往往不易引起注意。因此，紫外可见分光光度计检定过程中要对比色皿配套性误差进行检定，使比色皿配套性误差在0.5％以下方可。
2.4 检定最小光谱带宽、噪声与漂移、基线平直度应注意的问题
最小光谱的带宽主要是由于检定仪器所带广元发射的光谱线，单色光通过细缝后出现的波峰就可以确定谱宽，具体测量细缝，也可以确定仪器的分辨力。选择单光栅和双光栅检定可见分光光度计时，检定过程并不同，确定最小谱宽的过程也有所差别。噪声和漂移主要是检定仪器在检定过程中，由于电源变化或者温度变化等，对检定仪器的准确度造成影响。对于可见分光光度计的检定仪器，需要保证其漂移和吸光度符合要求，并且两个因素都不可或缺，共同决定了检定结果的准确性。基线平直度能反映不同波长的光度噪声，这也是在可见分光光度计检定过程中不可或缺的技术指标，也是影响检定准确性的因素，因此需要特别注意，这也决定了可见分光光度计在不同波长范围内的检测标准和范围。影响基线平直度的原因很多，包括滤光片安装问题、滤光片清洁性、滤色片的切换、检定设备光源切换、扫描速度等，都会造成基线平直度的损坏。
3 结语
检定员在检定紫外可见分光光度计前，首先要检测环境温度度，保证符合JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计》检定规程的要求。在使用紫外可见分光光度计时，要严格按照操作规程进行，如：紫外可见分光光度计开机后必须进行充分预热，等待电路与光路系统稳定，以减小所引入的误差。同时要经常对紫外可见分光光度计进行保养，对滤光片等标准元器件，要保证定期送检，确保检定标准自身的准确性。对检定工作人员自身来讲，要加强对检定规程的学习，理论联系实际，总结工作中的经验和教训，探讨和提升自身的技术水平，提高紫外可见分光光度计的检定水平。
参考文献
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[5] 全国物理化学计量技术委员会. JJG 178-2007[S]. 北京：中国计量出版社，2007.
作者简介：
李耀，男，1980年11月，单位：湖南省沅江市食品药品工商质量监督管理局，助理工程师，研究方向：分光光度。
论文作者:李耀
论文发表刊物:《基层建设》2018年第26期
论文发表时间:2018/9/18
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