陈勇[1]2018年在《石斛合剂对db/db小鼠糖尿病肾病相关炎症因子的影响》文中研究指明目的观察石斛合剂对糖尿病肾病小鼠肾组织中相关炎症因子的影响,探讨石斛合剂治疗糖尿病肾病的可能机制,为中医药防治糖尿病肾病提供新思路和药物作用的新靶点。方法db/db小鼠(体重45g左右,SPF级,雄性,11～12周龄)32只,适应性喂养1周后,随机分为模型组、阳性对照组、石斛合剂低剂量组和高剂量组,每组8只。另取同周龄表现正常的db/m非糖尿病小鼠8只为正常对照组。以上各组动物分别灌胃给药,按人体与小鼠体表面积比值的等效剂量折算,石斛合剂低剂量组给予石斛合剂6g/(kg·d),石斛合剂高剂量组给予石斛合剂12g/(kg·d),阳性对照组给予格列吡嗪2mg/(kg·d),正常组和模型组小鼠给予等容量生理盐水。每天1次,连续给药8周。治疗期间每2周测量体重(BW)一次;第0、4、8周,采用割尾法取血,以快速血糖仪检测各组空腹血糖(FBG);实验结束前一天进行葡萄糖耐量试验(OGTT)。实验结束时,处死全部小鼠,检测血清相关生化指标:糖化血清蛋白(GSP)、胰岛素(Ins)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN);HE、PAS染色观察肾组织病理形态变化;ELISA法检测血清、肾组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及白介素-6(IL-6)蛋白表达;Western blot检测肾组织中TNF-α、MCP-1、ICAM-1及IL-6蛋白表达。结果1 一般情况实验开始时,模型组小鼠与正常组比较,表现出明显的多饮、多食、多尿、体型肥胖;检测空腹血糖明显升高(P<0.01)。经药物治疗后,上述情况较前好转。2 FBG、GSP、Ins:与正常组比较,模型组FBG、GSP、Ins明显升高(P<0.01);与模型组比较,石斛合剂治疗组和阳性对照组均能显著降低FBG、GSP、Ins(P<0.05,P<0.01);石斛合剂治疗组与阳性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3 OGTT:与正常组比较,模型组FBG明显升高(P<0.01),在口服葡萄糖30mi n后血糖明显升高(P<0.01),60min、120min后血糖下降缓慢(P<0.01)。与模型组比较,石斛合剂治疗组和阳性对照组FBG均明显下降(P<0.01),在口服葡萄糖30mi n后血糖低于模型组(P<0.05),60min、120min后血糖持续下降(P<0.01)。石斛合剂治疗组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4 TG、TC:与正常组比较,模型组TG、TC明显升高(P<0.01)。与模型组比较,阳性对照组小鼠的TG和TC均有明显下降(P<0.05,P<0.01);石斛合剂低剂量组T G和TC有所下降,但变化无统计学意义(P>0.05);石斛合剂高剂量组TG和TC均有明显下降,具显著性差异(P<0.01)。5 Scr、BUN:与正常组比较,模型组Scr和BUN明显升高(P<0.01);与模型组比较,石斛合剂治疗组和阳性对照组小鼠的Scr和BUN均明显下降(P<0.05,P<0.01);石斛合剂高剂量组与阳性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。6肾组织病理形态学改变:模型组小鼠肾小球明显肥大,系膜区增宽,毛细血管基底膜增厚;石斛合剂治疗组和阳性对照组均较轻,随着石斛合剂剂量的增加,肾脏病变程度逐渐改善。7血清、肾组织中TNF-α、MCP-1、ICAM-1、IL-6蛋白表达:模型组明显高于正常组(P<0.01),石斛合剂治疗组和阳性对照组明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论1.石斛合剂可降低db/db小鼠的空腹血糖和糖化血清蛋白水平,降低高胰岛素血症,显著改善血脂水平、肾功能及肾脏病理损害;2.石斛合剂对糖尿病肾病db/db小鼠肾脏具有保护作用,可能通过下调TNF-α、MCP-1、ICAM-1及IL-6的表达水平,抑制炎症反应,从而延缓糖尿病肾病的进展。
萧自智[2]2017年在《石斛合剂序贯法对糖尿病合并肝损伤肝纤维化的作用机制研究》文中提出目的采取高脂高糖饮食+STZ诱导法构建糖尿病合并肝损伤(NAFLD、NASH、肝纤维化)的大鼠模型,探讨石斛合剂序贯法(dendrobium mixture in order cycle method,DMOC)干预糖尿病合并肝损伤及肝纤维化的疗效及其作用机制。方法健康清洁级SD雄性大鼠五周龄(体重180±10g左右)40只,由台湾乐斯科生物科技股份有限公司购买。适应性喂养1周后实验大鼠随机分成4组:①Con组(基本饲料,n=10)、②DMOC组(基本饲料+DMOC配方,n=10)、③DMF组(高脂高糖+STZ,n=10)、④DMF+DMOC组(高脂高糖+STZ+DMOC配方,n=10),①②为控制组;③④为诱导组。各组实验大鼠分别喂食相对应饲料并提供逆渗透水饮用,喂养4周后③④诱导组以腹腔注射2次STZ(25mg/kg+m2,间隔72h),注射后第4天,用血糖测定仪测量血糖,筛选空腹血糖>11.1mmol/L、糖化红蛋白>17%为糖尿病造模成功大鼠。③④诱导组造模显示该饮食处理后大鼠出现高血糖、高血脂、肝功能异常现象,喂养至36周后③④诱导组活检显示有显着肝纤维化倾向,第36-44周②④组进行DMOC中药干预。每周称重1次,根据体重调整灌胃药量,分别喂养长达44周末进行取材。观察每组动物的健康状况、体重、脏器重量、血清学检测FBG、TC、TG、AST、ALT、ROS、TNF-α、IL-6、TGF-β1等指标。HE和Masson三色染色法观察肝损伤及肝纤维化变化情况。IHC法检测肝组织α-SMA、Fibrinogen、Ⅳ-Collagen 变化情况。WB 法检测 Smad2、Smad3、pSmad2、pSmad3、α-SMA、MMP1、MMP2、MMP9 的蛋白表达变化情况。结果1 DMOC干预糖尿病合并肝损伤的动物模式1.1大鼠一般情况观察:控制组大鼠一般情况良好,进食正常,毛色有光泽,体重稳步增加,大便呈颗粒状。诱导组大鼠均有不同程度的进食减少,精神萎靡、嗜睡,皮毛晦暗,体重增加,便溏。1.2大鼠体重变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的体重显著着升高,差异有统计学意义(P<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比,体重显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结果显示糖尿病会使体重增加,而DMOC有改善体重变化情况。1.3大鼠肝组织重量变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的肝组织重量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比,肝组织重量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结果显示糖尿病会使肝组织肿大,而DMOC有改善肝组织重量的作用。1.4大鼠腹腔脂肪重量变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的腹腔脂肪重量均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比,腹腔脂肪重量均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结果显示糖尿病会使腹腔脂肪堆积,而DMOC有减少腹腔脂肪堆积的作用。1.5大鼠空腹血糖变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的空腹血糖显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比,空腹血糖显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结果显示DMOC可有效降低糖尿病大鼠的空腹血糖功能。1.6大鼠血脂变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的总胆固醇、三酰甘油酯均显著升高,差异有统计学意义(P值均<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比,总胆固醇、三酰甘油酯均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。结果显示糖尿病罹病时间增长,血脂有上升的趋势,而DMOC具有推迟糖尿病大鼠血中总胆固醇上升及降低三酰甘油酯的功效。1.7大鼠肝功能变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的AST与ALT均显著升高,差异有统计学意义(P值均<0.01);DMOC干预后,与DMF组比,DMF+DMOC组的AST显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)与ALT降低20%,差异无统计学意义(P>0.05)。结果显示糖尿病会引起肝损伤,而DMOC能减缓糖尿病对肝脏的伤害。1.8大鼠肝组织HE染色观察肝损伤情况:DMOC可明显改善肝细胞泡沫样变、细胞肿胀、界线不清、肝窦狭窄、中央静脉周围伴汇管区少量淋巴细胞浸润程度。2 DMOC干预糖尿病合并肝损伤尤其肝纤维化的作用机制2.1大鼠血清自由基ROS变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的自由基ROS显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比的自由基ROS显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结果显示糖尿病会使肝组织自由基ROS增加,而DMOC干预后可明显减少。2.2大鼠血清炎性细胞因子TNF-α变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的TNF-α显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比的炎性细胞因子TNF-α显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结果显示糖尿病会使肝组织炎性细胞因子TNF-α表达增加,而DMOC干预后可明显减少炎性细胞因子TNF-α的表达。2.3大鼠血清炎性细胞因子IL-6变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的IL-6显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比的炎性细胞因子IL-6显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结果显示糖尿病会使炎性细胞因子IL-6增加,而DMOC干预后可明显改善炎性细胞因子IL-6的表达。2.4大鼠血清纤维化因子TGF-β1变化情况:DMOC干预前,与Con组比DMF组的TGF-β1显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比的TGF-β1显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结果显示糖尿病会使促纤维化因子TGF-β1增加,而DMOC干预后可明显减少促纤维化因子TGF-β1的表达。2.5大鼠肝组织Masson三色染色法观察胶原纤维变化情况:糖尿病会引起肝纤维化,而DMOC可抑制大鼠肝组织细胞坏死、炎性细胞浸润与胶原纤维增生。2.6大鼠肝组织IHC法观察α-SMA、Fibrinogen、Ⅳ-Collagen变化情况:糖尿病会引起肝纤维化,而DMOC对于肝细胞受损诱导α-SMA、Fibrinogen、Ⅳ-Collagen的活化有明显的抑制效果。2.7大鼠肝组织WB法观察pSmad2/Smad2、pSmad3/Smad3、α-SMA的蛋白表达情况:DMOC 干预前,与 Con 组比,DMF 组的 pSmad2/Smad2、pSmad3/Smad3、α-SMA/β-actin相对密度增加,差异有统计学意义(P值均<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF 组与 DMF 组比 pSmad2/Smad2、pSmad3/Smad3、α-SMA/β-actin 相对密度减少,差异有统计学意义(P值均<0.01)。结果显示糖尿病会引起肝纤维化,虽然Smad2、Smad3表达各组均无明显差异,而DMOC对pSmad2、pSmad3、α-SMA的蛋白表达有明显的抑制效果。2.8大鼠肝组织WB法观察MMP 1、MMP 2、MMP 9蛋白表达变化情况:DMOC干预前,与 Con 组比 DMF 组的 MMP1/β-actin、MMP2/β-actin、MMP9/β-actin 相对密度表现减少,差异有统计学意义(P值均<0.01);DMOC干预后,DMOC+DMF组与DMF组比的MMP1/β-actin、MMP2/β-actin、MMP9/β-actin相对密度显著增加,差异有统计学意义(P值均<0.01)。结果显示糖尿病会引起肝纤维化,而DMOC可增加MMP1、MMP2、MMP9蛋白表达,促进胶原蛋白分解。结论1高脂高糖饮食+STZ造模的糖尿病合并肝损伤大鼠,可损伤胰腺组织导致分泌胰岛素的功能受损,最后诱发出高血糖症,继续观察有显著肝损伤及肝纤维化。此模式与“西方饮食”习惯所造成的T2DM合并肝损伤及肝纤维化相接近。2 DMOC可改善糖尿病合并肝损伤模型伴有肝纤维化大鼠的体重、肝组织重量、腹腔脂肪重量、FBG、TC、TG、AST、ALT、ROS、TNF-α IL-6、TGFβ1 异常的情况。3 DMOC可改善糖尿病合并肝纤维化大鼠肝组织的泡沫样变、细胞肿胀、界线不清、肝窦狭窄、中央静脉周围伴汇管区少量淋巴细胞浸润程度,减少α-SMA、Fibrinogen、Ⅳ-Collagen等胶原纤维的沉积。其机制可能与DMOC抑制糖尿病合并肝纤维化模型大鼠ROS→TNF-α、IL-6的炎性、TGFβ1→Smads→α-SMA肝纤维化信号通路;促进MMP1、MMP2、MMP9蛋白表达,增加Fibrinogen、Ⅳ-Collagen胶原蛋白的降解有关。
林雅[3]2003年在《石斛合剂对糖尿病模型大鼠影响的实验研究》文中指出背景：动物试验发现，石斛合剂具有降糖、抗氧化、增强免疫的功能；初步临床实验证实，该合剂对糖尿病患者有肯定的治疗作用。本实验对其治疗糖尿病、拮抗胰岛素抵抗的机制作进一步的研究。 目的：观察石斛合剂对两种糖尿病模型大鼠的治疗作用，为石斛合剂的临床应用及其作用机制提供客观的实验依据。 方法：选用雌性大鼠，采用腹腔注射四氧嘧啶(120mg／kg、80mg／kg、80mg／kg)和高脂高糖喂养后腹腔注射链脲佐菌素(30mg／kg)两种方法，制备糖尿病模型大鼠。筛选禁食后血糖≥11mmol／L者，按体重及禁食后血糖随机分为：单纯造模组，石斛合剂低(7.5g／kg)、中(15g／kg)、高(30g／kg)剂量治疗组，降糖灵(50mg／kg)治疗组，优降糖(15mg／kg)治疗组，玉泉丸(2.7g／kg)治疗组，共7组，治疗14天后，检测各组禁食及自由进食后的血糖、胰岛素、C肽、胰高血糖素、甘油三酯、总胆固醇、游离脂肪酸、肿瘤坏死因子-α，并取胰腺、肾脏作病理检查。 结果： (1)采用多次注射ALX和高脂高糖饲料+STZ这两种方法均可制备出较为理想的糖尿病大鼠模型。 (2)石斛合剂可显著降低禁食后及自由进食后血糖(P＜0.01)；调节胰岛素、C肽的分泌，使高者降(P＜0.05)、低者升(P＜0.05)，降低胰高血糖素(P＜0.01)；显著降低甘油三酯(P＜0.01)、总胆固醇(P＜0.01)，抑制游离脂肪酸的分泌(P＜0.01)。石斛合剂对上述生化指标的检测均显示，其疗效与西药类似(P＞0.05)，优于玉泉丸(P＜0.05) (3)石斛合剂可显著降低肥胖糖尿病模型大鼠的肿瘤坏死因子-α(P＜0.01)，且TNF-α与肥胖关系更密切。(4)病理变化显示，石解合剂可减轻四氧啼咤、链脉佐菌素对胰岛口细胞的破坏，对受损伤的胰岛日细胞具一定的修复功能。 结论:石解合剂能有效的降糖、降脂，改善糖尿病模型大鼠三多一少症状，调节胰岛素、C肤的释放，拮抗胰岛素抵抗，降低胰高血糖素水平，且对损伤的胰岛有一定的修复作用，研究结果证实石解合剂是治疗糖尿病、减少糖尿病并发症的一种较为理想的中药制剂。
施红[4]2000年在《石斛合剂对糖尿病的临床和实验研究》文中提出通过石斛合剂及达美康对6O例Ⅱ型糖尿病中医辨证属阴虚热盛和气阴两虚患者的疗效分析以及高血糖症造模动物的实验研究，初步观察该合剂的降血糖作用及对临床症状，血脂、血粘度等疗效以利开发应用。 动物实验采用肾上腺素和四氧嘧啶造模；临床观察采用辨病与辨证相结合的方法，将阴虚热盛，气阴两虚者分为正常组，石斛合剂治疗组和达美康对照组，观察治疗前后中医症候，血糖、血脂、血粘度等变化。实验结果表明：该合剂具有显著降低肾上腺素和四氧嘧啶造模动物的血糖（P＜0.001），使血糖恢复正常，其疗效优于降糖灵即苯乙胍（P＜0.02），类似于优降糖（P＞0.05），且无优降糖的低血糖副反应。临床疗效观察表明，治疗组与对照组降血糖显效率分别为63.3％、23.3％；总有效率为96.7％、73.3％，对Ⅱ型糖尿病综合显效率分别为：86.7％、43.3％，治疗组明显优于对照组（P均＜0.01）。 结论：石斛合剂不仅具有直接降低血糖作用，而且具有改善患者综合症状的作用，提示：石斛合剂或西药配合石斛合剂的疗效明显优于达美康或达美康配合其它类降糖药，该研究的结果为该药作为治疗Ⅱ型糖尿病的中药制剂奠定了基础，具开发应用的重要价值。
何威, 杨洁, 施红[5]2016年在《石斛合剂及其序贯法在糖尿病研究中进展》文中研究说明石斛合剂及其序贯疗法,经反复临床-实验-临床验证,证实具有稳定血脂、血糖、抗氧化、调整免疫,并且能通过干预多种基因表达,抑制肝肾纤维化,调控胰岛细胞增殖等治疗糖尿病(DM),以减轻患者临床症状和延缓并发症的出现。口服降糖西药虽有便捷和降糖较明显的特点,但是不能减少并发症的发生率,并且可能存在相对单靶点作用,引起机体稳态失控,继发肿瘤问题[1]。
吴仕福[6]2017年在《石斛合剂加减治疗气阴两虚夹瘀型糖尿病合并脑梗死的临床研究》文中研究表明目的观察石斛合剂加减治疗糖尿病合并脑梗死的临床疗效,寻找中医药治疗糖尿病合并脑梗死的有效治疗方法,为临床应用提供科学依据。方法用随机、对照研究方法,将纳入的气阴两虚夹瘀型糖尿病合并脑梗死患者85例,按随机表随机分成基础治疗组和石斛合剂治疗组,治疗1个月,分别记录各组用药前后的中医证候、各项指标、安全性评估。同时观察对血常规、肝肾功能的影响,填入观察表,进行统计学分析,观察治疗组和对照组的临床疗效,并观察石斛合剂治疗效果。结果1本研究共纳入85例患者,共有80例病人完成了临床观察,治疗组脱落2例,对照组脱落3例,本研究脱落率为5.88%。2中医证候积分:治疗组治疗前后比较及治疗组与对照组治疗后比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。3糖尿病相关指标①治疗组空腹血糖、餐后2小时血糖在治疗1个月组内比较及治疗后与对照组组间比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);②治疗组空腹血浆胰岛素水平、HOMA-IR在治疗1个月组内比较及治疗后与对照组组间比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。4脑梗死相关指标①治疗组神经功能缺损、生活能力状态、甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白在治疗前后组内比较及治疗1个月与对照组组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);②治疗组血清同型半胱氨酸在治疗1个月组内比较及组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05);③治疗组C反应蛋白在治疗1个月组内比较及组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。5综合疗效分析治疗组总有效率90%,优于对照组总有效率75%,提示石斛合剂对气阴两虚夹瘀型糖尿病合并脑梗死具有良好的临床综合疗效。6治疗过程中两组均未出现不良反应,治疗前后肝肾功能、血常规无异常。研究结论1石斛合剂可以改善气阴两虚夹瘀型糖尿病合并脑梗死患者的中医证候。2石斛合剂与胰岛素联用可更稳定降低血糖。3石斛合剂联合应用能降低患者血清同型半胱氨酸、甘油三脂、胆固醇、低密度脂蛋白水平,提高高密度脂蛋白水平,改善胰岛素抵抗,改善神经功能缺损,从而改善患者总体生活质量。4石斛合剂加减治疗糖尿病合并脑梗死,临床综合疗效优于单纯西药治疗,且未见不良反应,可推广应用。
周勇[7]2018年在《石斛合剂序贯法对糖尿病合并肝纤维化大鼠IKK/NF-κB/IκB信号通路的影响》文中认为目的观察石斛合剂序贯法对糖尿病合并肝纤维化大鼠IKK/NF-κ B/κ B信号通路相关蛋白表达的影响,为石斛合剂序贯法防治糖尿病合并肝纤维化提供实验及理论依据。方法选用SPF级Wistar大鼠(体重200±10g,雄性)70只,适应性喂养7天后,按随机数表法随机分为正常对照组10只和造模组60只。正常对照组予普通饲料喂养,造模组予高脂高糖饲料喂养。6周后,造模组空腹腹腔注射STZ {25 mg/(kg+m2),间隔72h}2次,正常对照组腹腔注射生理盐水。选取T2DM成模的大鼠50只随机分为模型对照组、石斛合剂序贯方组、二甲双胍组、石斛合剂1方组、石斛合剂2方组各10只并在灌胃同时皮下注射CCl4(2ml/kg,每周2次),首剂加倍;正常对照组注射生理盐水。各组统一于糖尿病成模并分组后第3天灌胃,每周称重一次,每周根据体重调整注射及灌胃药量。于CC14注射及灌胃处置第8周末取材,经腹主动脉采血,采用全自动生化仪检测ALT、AST,放射性免疫法测肝纤维化四项HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ;取肝组织行HE和Masson染色、免疫组化测肝组织collagen-Ⅳ表达量;Western blot检测大鼠肝脏IKKβ、NF-κBP50、NF-κBP65、1κBβ及p-IκBβ的蛋白相对表达量。结果1大鼠一般情况观察:正常对照组一般状况良好,模型对照组一般情况较差,其余各治疗组较模型对照组明显改善。2大鼠空腹血糖变化:药物干预前,与正常对照组比,各组的空腹血糖均显著升高,且≥11.1mmol/L(P<0.01);模型对照组、石斛合剂序贯方组、二甲双狐组、石斛合剂1方组、石斛合剂2方组每两组之间空腹血糖无差异(P>0.05);药物干预后,与正常对照组相比,各用药组无明显差异(P>0.05),与模型对照组比,各用药组空腹血糖均明显下降(P<0.01)。3大鼠肝功能变化:治疗后,与正常对照组比,各治疗组AST、ALT均较高(P<0.01);与模型对照组相比,各治疗组AST、ALT明显降低,存在显著差异(P<0.01),各治疗组之间无显著差异(P>0.05);且石斛合剂序贯方组ALT降低更明显。4大鼠肝纤维化四项变化:治疗后,与正常对照组相比,模型对照组的HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ显著升高,有显著差异(P<0.01);与模型对照组相比,各治疗组组HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ均存在显著差异。5大鼠肝组织HE染色:治疗后,与正常对照组相比,模型对照组肝组织结构发生明显变化,有大量的结缔组织增生及胶原蛋白沉积,正常结构几乎完全被破坏,肝细胞排列紊乱,肝细胞脂肪变性较严重,有大量脂肪空泡,肝索结构几乎消失,伴有大量炎细胞浸润;与模型对照相比,各治疗组肝索结构有所恢复,脂肪变性、炎性改变及结构破坏程度明显改善,石斛合剂序贯方组结缔组织增生及胶原蛋白沉积较其他治疗各组改善更明显,肝血窦明显减小。6大鼠肝组织Masson染色:治疗后,与模型对照相比,各治疗组胶原纤维较模型对照组明显减少,纤维纵隔明显变细,且石斛合剂序贯方组纤维组织沉积最少,纵隔最细。7大鼠肝组织collagen-Ⅳ免疫组化:模型对照组有大量Collagen-Ⅳ(淡黄色)沉积在肝细胞外间质,各治疗组均有减少,且石斛合剂序贯方组淡黄色区域最少,即石斛合剂序贯方组对减少collagen-Ⅳ沉积疗效最佳。8 大鼠肝脏组织 IKKβ、IκBβ、P-IκBβ、NF-κBP65、NF-κBP50 蛋白表达:与正常对照组相比,模型对照组NF-κBP65、NF-κBP50、IKKβ表达量升高,Iκβ、P-IκBβ表达量降低,均存在显著差异(P<0.01),与模型对照组相比,各治疗组NF-κ BP65、NF-κ BP50、IKK β表达均有降低,Iκ B B β,P-Iκ B β表达量升高,存在显著差异(P<0.01)。结论1高脂高糖饲料+STZ联合CC14能成功建立糖尿病合并肝纤维化动物模型。2石斛合剂序贯方可改善高脂高糖+STZ联合CC14所致的糖尿病合并肝纤维化模型大鼠的血糖水平、肝功能指标(ALT、AST)、肝纤维化指标(HA、LN、PC-Ⅲ、C-.Ⅳ);能减轻大鼠肝脏的胶原蛋白及胶原纤维沉积;3石斛合剂序贯方可能通过作用IKK/NF-κ B/I κ B信号通路,下调NF-κ BP65、NF-κBP50、IKKβ的表达量及上调IκBβ、p-IκBβ表达量,抑制糖尿病大鼠的肝纤维化。
施红, 高长花, 刘宏波, 余文珍, 林心君[8]2013年在《石斛合剂序贯疗法对糖尿病模型大鼠糖脂代谢的影响》文中进行了进一步梳理目的观察石斛合剂序贯疗法对糖尿病模型大鼠糖脂代谢的影响。方法选取健康雌性Wistar大鼠68只,随机分为正常对照组(8只)和实验组(60只),实验组大鼠高脂高糖喂养4周后予腹腔注射STZ造模。将成模大鼠随机分为模型组、石斛合剂1、2、3方组、序贯方组和二甲双胍组。相应药物连续灌胃16周后,检测大鼠血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、胰岛素(INS)、胰高血糖素(GLU)等指标。结果治疗16周后,与模型组比较,石斛合剂1、2、3方组、序贯方组、二甲双胍组的FBG降低(P<0.05或P<0.01),石斛合剂3方组的TG降低(P<0.05),石斛合剂序贯方组的TC降低(P<0.05),石斛合剂1、2、3方、序贯方组INS升高(P<0.05或P<0.01);石斛合剂序贯方组的INS、GLU最接近正常组。结论石斛合剂1、2、3方及序贯方能有效降低糖尿病模型大鼠血糖、血脂,石斛合剂序贯法的综合疗效最佳。
李长征[9]2012年在《石斛合剂对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用机制的研究》文中进行了进一步梳理目的：观察石斛合剂对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,探讨糖尿病肾损伤的发病机制,揭示中药复方治疗糖尿病肾损伤的作用机理。方法：SPF级雄性Wistar大鼠60只,随机分为：正常对照组、造模组,正常对照组给予基础饲料,造模组给予高脂高糖饲料,喂养6周后,禁食12h,正常对照组腹腔注射生理盐水,造模组一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)25mg/kg,筛选空腹血糖≥16.7mmol/L者为成模大鼠,后者随机分为模型组、石斛合剂低剂量组、石斛合剂高剂量组和阳性对照组。在给药12周后各组大鼠处死,采用生化、光镜、电镜、免疫组化等检测手段和方法,观测：(1)血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)；(2)肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)；(3)24h尿白蛋白含量(UAER);(4)肾重指数(KW/BW);(5)肾组织病理及超微结构；(6)免疫组化法检测肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果：1.FBG、TC、TG:石斛合剂低、高剂量组FBG、TC、TG明显低于模型组(P<0.01),阳性对照组FBG TC(?)于模型组(P<0.05或P<0.01)；石斛合剂低剂量组FBG、TG低于阳性对照组(P<0.05或P<0.01)。2. BUN、Scr、24h尿白蛋白定量：各药物干预组明显低于模型组(P<0.01)；3. KW/BW的比值：各药物干预组明显低于模型组(P<0.01)；石斛合剂高剂量组明显低于阳性对照组(P<0.01)。4.肾组织病理形态学改变：模型组大鼠肾脏病理改变明显,肾小球毛细血管扩张,系膜增生,系膜区增宽,基底膜增厚,足细胞足突融合明显；肾小管上皮细胞空泡样变性。石斛合剂低、高剂量组和阳性对照组均较轻。模型组及各治疗组肾小球平截面积(MGA)、系膜平均面积(MMA)、系膜面积比(FMA)均明显高于正常对照组(P<0.01或P<0.05)；各治疗组MMA、FMA均明显低于模型组(P<0.01)；石斛合剂高剂量组MMA、FMA均明显低于阳性对照组(P<0.01)。5.TGF-β1、VEGF蛋白表达：模型明显高于正常对照组(P<0.01),石斛合剂低、高剂量组和阳性对照组明显低于模型组(P<0.01)。结论：1.石斛合剂可降低糖尿病大鼠血糖、改善脂代谢、降低BUN、Scr、尿白蛋白,改善肾功能。2.石斛合剂可抑制糖尿病大鼠肾组织TGF-β1的过度表达,影响ECM代谢,改善肾脏形态结构,延缓肾脏纤维化进程。3.石斛合剂可抑制糖尿病大鼠肾组织VEGF的过度表达,降低蛋白尿,延缓DN的发生、发展。4.石斛合剂能延缓DN的发生、发展,对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制之一与其抑制肾组织TGF-β1、VEGF的表达而减少ECM过度聚集有关。
郑晓玲[10]2013年在《石斛合剂序贯疗法对糖尿病模型大鼠糖脂代谢的影响及相关机制研究》文中指出[目的及意义]以西药二甲双胍为阳性对照组,观察石斛合剂序贯疗法对高脂高糖联合STZ致糖尿病大鼠的影响,并探索其对JAK-STAT通路的作用,以揭示其可能的分子机制。研究方法1、实验分组：正常对照组、模型组、石斛合剂序贯疗法组、西药二甲双胍组2、糖尿病大鼠造模方案：大鼠随机分普通饲料组、高脂高糖饲料两组,分别给予相应饲料4W。(1)高脂高糖饲料组大鼠,给予STZ处理。STZ按25mg/kg体质量的剂量,腹腔注射STZ(用pH4.4的0. lmol/L的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液稀释)分二次给予,间隔72h。(2)普通饲料组大鼠,平行两次(间隔72h)腹腔注射相应容量的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。以尾尖采血测随机血糖≥16.7mmol/L为成模大鼠(成模率95%)。3、给药方案：取成模大鼠29只,按体重、血糖随机分层后分为模型组9只、石斛合剂序贯疗法组10只,西药二甲双胍组10只。正常对照组、模型组,给予相应体积蒸馏水,共15w；石斛合剂序贯疗法组,按临床等效剂量,依次给予石斛合剂1号方12天、2号方6天、3号方3天,循环4次,共15w；西药二甲双胍组,给予二甲双胍(lmg/100g体质量),每日1次,共15w；每灌胃3天停1天。给药期间给予普通饲料喂养。4、指标测定：每日观测饮水、进食、排尿、活动情况等；每周观测体重1次；末次灌胃后次日处死,取2cm肝组织以福尔马林固定,行HE染色,另取4cm肝组织在1‰的焦碳酸二乙脂(DEPC)水中稍作漂洗迅速置入液氮中冷冻2-3小时,转入-80℃冰箱保存,用于后续RT-PCR和western blot检测；并测定血糖、胰岛素、胰高血糖素、甘油三酯、总胆固醇、瘦素水平；以RT-PCR, western-blot方法测定瘦素受体、STAT3、 p-STAT3、 CPT-1等指标。5、统计学分析：采用SPSS16.0软件进行分析,实验数据用x±S表示,组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA分析)；其中P<0.05为有统计学意义。[结果]1、石斛合剂序贯疗法可降低糖尿病模型大鼠血糖水平,提高其胰岛素水平,对胰高血糖素之影响无统计学意义。2、石斛合剂序贯疗法可降低糖尿病模型大鼠甘油三酯、总胆固醇、血清瘦素水平。3、石斛合剂序贯疗法可提高糖尿病模型大鼠肝组织瘦素受体、p-STAT3、 CPT-1水平,其调节脂代谢的作用可能与JAK-STAT信号通路有关[结论]石斛合剂序贯疗法具有改善糖尿病模型大鼠肝脏形态结构,降低血糖、血脂、血清瘦素水平以及调节脂代谢的作用,其作用机制可能与激活JAK-STAT信号通路,上调瘦素受体、STAT3的磷酸化水平,进而上调CPT-1有关。该实验结果印证了临床用药效果,为石斛合剂影响JAK-STAT通路提供了部分依据,为今后进一步研究提供了方向。
参考文献：
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[2]. 石斛合剂序贯法对糖尿病合并肝损伤肝纤维化的作用机制研究[D]. 萧自智. 福建中医药大学. 2017
[3]. 石斛合剂对糖尿病模型大鼠影响的实验研究[D]. 林雅. 福建中医学院. 2003
[4]. 石斛合剂对糖尿病的临床和实验研究[D]. 施红. 福建中医学院. 2000
[5]. 石斛合剂及其序贯法在糖尿病研究中进展[J]. 何威, 杨洁, 施红. 中国中医药现代远程教育. 2016
[6]. 石斛合剂加减治疗气阴两虚夹瘀型糖尿病合并脑梗死的临床研究[D]. 吴仕福. 福建中医药大学. 2017
[7]. 石斛合剂序贯法对糖尿病合并肝纤维化大鼠IKK/NF-κB/IκB信号通路的影响[D]. 周勇. 福建中医药大学. 2018
[8]. 石斛合剂序贯疗法对糖尿病模型大鼠糖脂代谢的影响[J]. 施红, 高长花, 刘宏波, 余文珍, 林心君. 福建中医药大学学报. 2013
[9]. 石斛合剂对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用机制的研究[D]. 李长征. 福建中医药大学. 2012
[10]. 石斛合剂序贯疗法对糖尿病模型大鼠糖脂代谢的影响及相关机制研究[D]. 郑晓玲. 福建中医药大学. 2013