张美佳 万歆 张爱华 牟基伟通讯作者
佳木斯大学附属第一医院 黑龙江佳木斯 154003
【摘 要】目的 探讨喉癌组织中Survivin 和VEGF（血管内皮生长因子）的表达及其临床意义；方法 选取2014 年1 月-2014 年12 月我院收治的喉癌患者30 例做作究组，同时选取健康体检人员喉部粘膜组织30 例作对照组，应用免疫组织化学法检测两组研究对象Survivin 以及VEGF蛋白表达；结果 研究组Survivin 以及VEGF 蛋白阳性表达水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；结论 喉癌组织中Survivin以及VEGF 蛋白表达均提高，且二者在喉癌发生以及发展的过程当中存在正相关关系，临床上应用引起足够重视。
【关键词】喉癌组织；Survivin；VEGF；表达；意义
【中图分类号】R344+.13【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2015）-07-377-01
喉癌是耳鼻喉科的一种常见恶性肿瘤，统计显示喉癌发病率占耳鼻咽喉科肿瘤发病率的10%左右。由于致癌因子作用以及环境当中致癌因素的增加，临床上喉癌发病率日益增高。喉癌形成是多种因素作用的结果，饮酒、吸烟、空气污染、病毒感染、微量元素缺乏和放射线等因素都会激活癌基因或导致抑癌基因的凋亡[1]。研究显示恶性肿瘤的发生与细胞凋亡以及细胞增殖失控有着一定的联系。Survivin 作为凋亡抑制蛋白的一种，是最强的凋亡抑制因子，研究人员发现Survivin 同肿瘤发生有密切关系。VEGF 则是有着强大作用的血管生长因子，能够促进肿瘤细胞生长以及转移，因此在肿瘤组织当中的高表达也应引起人们的重视。对比喉癌组织与喉部粘膜组织在Survivin 和VEGF 表达方面存在的差异，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2014 年1 月-2014 年12 月我院收治的喉癌患者30 例做研究组，男18 例，女12 例，年龄34-61 岁，平均年龄46 岁；根据国际抗癌协会分期方案，I 期患者3 例，Ⅱ期患者13 例，Ⅲ期患者8 例，Ⅳ期患者6 例。所有患者术前均未行放化疗治疗。同时选取健康体检人员喉部粘膜组织30 例作对照组，男16 例，女14 例，年龄33-63岁，平均年龄47 岁。
1.2 方法
1.2.1 Survivin 组织化学染色方法。取石蜡切片脱蜡脱水，使用3%双氧水孵育10min，从而清除过氧化物酶活性，使用蒸馏水冲洗后PBS 浸泡4min；修复抗原，使用10%山羊血清稀释封闭，孵育10min之后去除血清，加入1：00 兔抗人Survivin 一抗，孵育1h 后PBS 冲洗10min；滴加稀释过的单抗IgG，室温孵育20min 后PBS 冲洗10min；低价稀释过的辣根酶酶卵白素，室温孵育20min，PBS 冲洗10min，使用显色剂显色后使用自来水冲洗完成封片[2]。
1.2.2 VEGF 组织化学染色方法。VEGF 组织化学染色方法同上，一抗改用1：100Rabbit Anti VEGF。
1.2.3 结果判定方法。因为免疫反应发生在喉癌组织细胞质，细胞质呈现出棕黄色，则认为Survivin 为阳性，同时VEGF 表达的阳性结果同样为细胞质棕黄色。使用计算机图像分析染色结果，每个标本选一张切片，切片要选取颗粒清晰能够反映染色强度的部位为代表，200 倍视野下测量阳性细胞平均吸收值，并作为标本的测量结果。
1.3 统计学方法
将所检测的数据用统计学专业软件数据包SPSS18.0 进行分析，数据用（x s ??）表示，以P＜0.05 具有差异统计学意义[3]。
2 结果
在两组标本的检测结果方面，研究组组织中Survivin 及VEGF 蛋白阳性表达水平均显著高于对照组，显示喉癌组织标本当中Survivin及VEGF 蛋白水平显著高于正常组织标本，表明Survivin 及VEGF 在喉癌发生以及发展的过程当中存在正相关关系，差异有统计学意义（P＜0.05），具体结果见表1。
3 结论
随着临床上对于肿瘤发病机制研究的日益深入，人们意识到细胞凋亡受到抑制会引发细胞增殖以及凋亡间失衡，从而导致肿瘤的发生发展。Survivin 作为抑制凋亡基因家族的一员，能够延长细胞生存，调节人体染色体分离以及胞质分裂，阻断凋亡进程。Survivin 基因除了胎盘以及胸腺组织之外，正常的成人组织当中并没有表达，其过表达可以抑制细胞的凋亡。VEGF 通过与特异性受体结合，刺激内皮细胞增殖，并且提高血管通透性促使内皮细胞的迁移，最终为新血管的生成提供条件。VEGF 在成人以及动物组织当中的水平比较低，不过在胎儿以及生理性生长组织当中的水平比较高。大部分肿瘤细胞以及巨噬细胞当中，往往会分泌高水平的VEGF，并且VEGF 能够为肿瘤细胞生长提供营养，为肿瘤生长以及转移提供条件。VEGF 同肿瘤生长转移的关系在乳腺癌以及胃癌等肿瘤组织当中已得到证实。
Survivin 以及VEGF 在喉癌组织当中表达的研究比较少，本研究的结果显示，Survivin 以及VEGF 都能够当作喉癌生物学指标的客观反映，与对照组研究对象比较而言有显著差异（P＜0.05）。除此之外，有研究显示其与喉癌分期、病理类型以及淋巴结转移等都存在一定程度的关系，同时二者在喉癌组织当中的表达也存在相关性。因此通过免疫组化法检测二者异常表达，能够实现可疑癌的早期确诊，同时为准确判断肿瘤的恶性程度、手术时机选择以及预后提供支持，帮助临床医师制定科学的治疗方案，改善患者的治疗结果以及生存质量。综上所述，喉癌组织当中Survivin 以及VEGF 蛋白表达提高，表明二者在喉癌发生以及发展的过程当中有着重要的作用，临床上应用引起足够重视。
参考文献：
[1]王彦军，孔维佳，熊新高，等．Survivin 和VEGF 蛋白在喉癌组织中的表达及其相关性研究[J].临床耳鼻咽喉科杂志，2014，19（18）：838-841．
[2]杨娜，孙克巍，辛丁，等．Suivivin 基因和增殖细胞核抗原在喉鳞状细胞癌中的表达及相关性研究[J].中国耳鼻咽喉颅底外科杂志，2013，12（5）：326-329．
[3]陈杰，田勇泉，邢晓为，等．喉鳞状细胞癌中Survivin 基因的表达[J].中国耳鼻咽喉颅底外科杂志，2014，12（3）：171-174．基金项目：黑龙江省卫生厅科研项目，编号：2013-234
论文作者:张美佳 万歆 张爱华 牟基伟通讯作者
论文发表刊物:《世界复合医学》2015年第7期供稿
论文发表时间:2015/9/18
标签：组织论文; 喉癌论文; 肿瘤论文; 细胞论文; 蛋白论文; 凋亡论文; 患者论文; 《世界复合医学》2015年第7期供稿论文;