（青海大学附属医院；青海西宁810000）
[摘要]：目的：通过测定类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者血浆蛋白Z依赖的蛋白酶抑制剂（protein Z-dependent protease inhibitor,ZPI）水平，研究探讨ZPI在易栓性疾病RA患者血浆中水平的变化和意义。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定42例RA患者及33例健康对照者血浆ZPI的水平。结果：(1)RA组血浆ZPI水平明显高于对照组血浆ZPI水平，差异有统计学意义（P＜0.01）；(2)RA组血浆纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)水平、纤维蛋白(原)降解产物(fibrin(-ogen) degradation products,FDP)水平明显高于对照组血浆FIB、FDP水平，差异有统计学意义（P＜0.01）。(3)RA组血浆ZPI水平与RA组血浆FIB水平呈正相关(P＜0.01)。结论：ZPI可能参与了易栓性疾病RA的抗凝血过程,在RA患者体内代偿性增高。
[关键词]：易栓症；类风湿关节炎；ZPI
The expression and significance of ZPI in plasma of rheumatoid arthritis patients
Sun Xia1,Chai Kexia2
Abstract:Objective:This study will explore the change and meaning of the level of ZPI of RA patients .Methods:It will determine the level of plasma ZPI of 42 RA patients and 33 healthy control subjects by enzyme linked immunosorbent assay.Results:(1)The level of plasma ZPI in RA group is obviously higher than that of control group, the difference is statistically significant (P＜0.01);(2)In RA group ,the level of plasma FIB and FDP is obviously higher than that of control group,the difference is statistically significant (P＜0.01). (3)In RA group ,the level of plasma ZPI is positively correlated with the level of plasma FIB(P＜0.01). Conclusions：ZPI may participate in the anticoagulation process of RA that it may increase compensatorily.
Keywords :thrombophilia disease;rheumatoid arthritis;ZPI
易栓症[1]是指高凝状态或血栓前状态,可分为遗传性和获得性两类。获得性易栓症[2]又包括易栓状态和易栓疾病，其中易栓疾病因素包括恶性肿瘤、抗磷脂综合征、糖尿病、血管炎等。RA属于血管炎的一种，血管炎导致内皮细胞受损,组织因子、胶原蛋白等暴露, 从而激活凝血途径形成血栓。易栓症的发生是凝血、抗凝与纤溶系统的失衡造成的。ZPI属于抗凝系统。本研究通过测定RA患者血浆ZPI的水平，探讨ZPI在类风湿关节炎患者血浆中水平的变化及意义，为RA预防血栓形成进行临床干预提供新的思路。
1 资料与方法
1.1 研究对象及分组
RA 组：选择2014年6月至2015年10月在青海大学附属医院风湿免疫科住院的初治RA患者42例，其中男性6例，女性36 例，年龄（46.69±10.25）岁。 对照组：选择2014年6月至2015年10月青海大学附属医院体检中心健康体检者33例，其中男性6例，女性27例，年龄(41.52±13.43）岁。
1.2 研究对象的入选标准及排除标准
1.2.1 入选标准
RA诊断均符合2010 年的ACR/EULAR 的类风湿关节炎分类标准。
1.2.2 排除标准
所有标本均需排除近期服用抗凝药物者、其他风湿免疫性疾病史、血栓形成、肿瘤、高血压、糖尿病、冠心病史、近期严重感染、近期有创伤手术史。
1.3 研究对象的一般临床资料
1.3.1 年龄与性别的比较
RA 组和对照组在年龄、性别方面比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1、表2。
1.4 主要试剂与仪器
ZPI试剂盒由上海经科化学科技有限公司提供，采用瑞士帝肯公司F50 型酶标仪检测，离心机为美国Eppendorf公司54150 型，超低温冰箱为青岛海尔公司DW-86L338A 型。
1.5 标本的采集与测定
1.5.1 标本的采集
采集研究对象清晨空腹静脉血5ml，沿管壁缓缓加入EDTA抗凝的紫头管中，然后迅速将血液和促凝剂轻轻颠倒混匀，切忌用力震荡。抽取标本后，在室温下2小时以内3000 r/min离心15 分钟，分离血浆并储存于-80℃冰箱中，待检。
1.5.2 标本的测定
ZPI的测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附法。冰冻血浆由实验前取出，严格按照试剂盒及仪器使用说明操作。
1.6 统计方法
数据采用SPSS19.0统计软件处理。计量资料用s描述，两组间比较采用独立样本t检验，相关性分析采用Person相关；计数资料采用卡方检验；检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 血浆ZPI的水平
RA组血浆ZPI水平明显高于对照组血浆ZPI水平，差异有统计学意义（P＜0.01）。见表3。
2.3 RA组血浆ZPI水平与RA组血浆FIB水平的相关性分析
RA组血浆ZPI水平与RA组血浆FIB水平呈正相关(P﹤0.01)，相关系数r为0.470，P=0.002.
3 讨论
类风湿关节炎是一种慢性自身免疫性疾病，同时也属于易栓性疾病。本研究结果显示，RA组血浆ZPI水平明显高于对照组血浆ZPI水平，提示ZPI可能参与了RA患者体内抗凝血过程的变化。可能的机制如下：(1)RA慢性炎症对内皮细胞的损伤。RA主要的发病机制是免疫紊乱，关节滑膜的巨噬细胞活化后使细胞因子如肿瘤坏死因子-α、白介素-1等增多，使皮下胶原暴露和内皮细胞损伤，激活内外源性凝血途径，FⅩa增多，ZPI、PZ即与FⅩa结合形成ZPI-PZ-FⅩa三联复合体抑制FⅩa的活性，下调了凝血酶生成的速率和浓度，从而在一定程度上阻止了血栓的形成[3]。ZPI与复合体的解离速度较快[4]，有部分ZPI被清除，但大部分没有被单核巨噬系统清除，而且炎症因子刺激肝脏合成ZPI增多[5]，所以RA组血浆ZPI水平是增加的。ZPI除了有抑制FXa活性的功能，还有抑制活化的因子XI(activated factor XI, FXIa)[6]的功能，形成ZPI-FXIa复合体，它的失活方式与ZPI-PZ-FXa三联复合体的失活方式相似，且大部分ZPI没有被单核巨噬细胞系统清除，因此RA组血浆ZPI水平仍是增加的。(2)ZPI可能与炎症反应有关。研究[7]显示，在内皮细胞表面,FⅩa能促使白介素-6、白介素-8和单核细胞趋化蛋白-1的合成和释放，从而使炎症反应加剧。RA患者体内存在慢性炎症，炎症对内皮细胞的损伤激活内外源性凝血途径，FⅩa水平增加。而ZPI又可以抑制FⅩa，因此它可能会间接抑制炎症反应，使RA组血浆ZPI水平代偿性增高。
本研究结果中RA组血浆FIB、FDP水平明显高于对照组血浆FIB、FDP水平，且RA组血浆ZPI水平与RA组血浆FIB水平呈正相关，可能的原因是RA组患者体内的慢性炎症引起皮下胶原暴露和内皮细胞损伤，激活内外源性凝血途径，然后发生凝血级联反应，凝血因子被大量激活，凝血酶和FIB生成增加，FIB随之降解为纤维蛋白单体，然后与钙离子和活化的因子XIII相互作用，形成纤维蛋白。纤维蛋白激活纤溶酶，纤溶系统被启动，纤溶酶降解纤维蛋白，FDP生成增加。FIB水平增高表明机体的血液凝固性的增高[8]。FDP水平的增高可反映体内高凝状态和纤溶亢进状态。我们认为在凝血因子被激活时，FXa、FXIa也大量生成，ZPI代偿性增加抑制FXa、FXIa的活性，所以，ZPI水平随着FIB水平增高而增高，使FXa的活性降低，阻止凝血过程的进程，从而阻止血栓的形成。
本研究结果表明，ZPI可能参与了易栓性疾病RA的抗凝血过程，在RA患者体内代偿性增高。根据本研究结果，我们在积极治疗RA、控制炎症活动的同时，是否可以设想通过给予ZPI来防止血栓的形成，这将是我们进一步研究的目标。
参考文献
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论文作者:孙霞,柴克霞
论文发表刊物:《医师在线》2017年9月下第18期
论文发表时间:2017/12/7
标签：血浆论文; 水平论文; 炎症论文; 患者论文; 内皮论文; 凝血论文; 因子论文; 《医师在线》2017年9月下第18期论文;