【摘要】目的：研究砂烫生附片制备前后生物碱改变情况。方法：将泥附子切片后，制成生附片后砂烫，并观察其制备前后的外观性状。通过用高效液相色谱法测定生物碱改变含量的变化。我们将生物碱分为：单酯型(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)、双酯型(乌头碱、中乌头碱、次乌头碱)和脂类生物碱。其中双酯型的毒性最大，是主要调查目标。结果：双酯型的生物碱在砂烫生附片制备前后含量变化较大，减少明显。（P値<0.05）有明显统计学意义。结论：砂烫生附片制备前后有利于将有毒型的双酯型生物碱含量减少，进而有利于降低药品副作用。
【关键词】砂烫；生附片；生物碱；高效液相色谱法
【中图分类号】R284.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）35-0333-01
附子是乌头属植物，具有镇痛、消炎、强心和抗癌等药理作用，而生物碱是附子发挥作用的主要活性物质。而其中双酯型的生物碱毒性最大，因此附子需要通过炮制以达到减毒增效的目的。“炮”法的本质是高温干热为主，通过包裹后加热是为了在炮制过程中让中药的受热更为均匀，故通常采用药典炮附片的炮制方法，以河砂代替包裹物而作为中间传热体，进而制备砂烫生附片。
1.材料和仪器
1.1 仪器
CGQ-750Z型自控温鼓式炒药机；Agilent 1100高效液相色谱仪；SB25-12DTDN型超声波清洗器；RE-52型旋转蒸发仪
1.2 材料
生附子购自四川江油饮片厂，经过长春中医药大学王淑敏教授鉴定；乌头碱(批号110720-201011)、中乌头碱(批号0798-201006)、次乌头碱(批号0799—201006)乙腈、四氢呋喃为色谱纯；其他试剂均为分析纯；水为纯净水。
样品制备：取洗净的河砂25kg，先放置于炒药机内，温度升至250℃，待充分加热后投入生附片3kg，将炒药机不断转动，炒制10min至样品的表面呈黄褐色时取出，用漏斗筛去河砂，晾凉，平行制备3批，充分粉碎备用。
1.3 方法
1.3.1实验组试剂制备 精密称取各样品粉末2g，置于10ml量瓶中,加入氨试液3mL调节PH値，再量取异丙醇-乙酸乙酯(1：1)混合溶液50mL，定容。超声处理30min，重新加入异丙醇-乙酸乙酯(1:1)混合溶液以补充至50mL，摇匀。精密量取续新溶液25mL，高温下蒸发成残渣，残渣精密加入异丙醇-二氯甲烷(1:1)混合溶液3.0mL溶解。
1.3.2对照组试剂制备 精密称取对照品适量，置于10mL量瓶中，加入异丙醇-二氯甲烷(1:1)混合溶液溶解，并稀释至刻度，即得含中乌头碱0.085mg／mL、乌头碱0.095mg／mL、次乌头碱0.120mg／mL
1.4 结果
1.4.1加样实验双酯型生物碱回收率（表1）
表1 加样实验双酯型生物碱回收率（n=3）
别精密吸取对照品和供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，依次计算三种双酯型乌头碱的含量，其中乌头碱和次乌头碱由于转化为其它无毒性的生物碱，含量几乎不可测得。（P値<0.05）,有统计学意义。
2.讨论
附子炮制的目的是减毒，其机制为剧毒型乌头类双酯型生物碱在加热过程中将双酯型的三种乌头碱经过化学反应转化得到相应的苯甲酰单酯型生物碱，进而大大降低了其毒性。附子是乌头属植物，具有镇痛、消炎、强心和抗癌等药理作用，而生物碱是附子发挥作用的主要活性物质。而其中双酯型的生物碱毒性最大，因此附子需要通过炮制以达到减毒增效的目的。“炮”法的本质是高温干热为主。
通过统计我们发现，生附片砂烫后，双酯型生物碱总含有量降低超过90％，单酯型生物碱总含量大大增加，由此我们可以发现，生物碱在砂烫过程之中，是由有毒的双酯型转化为无毒的单脂型。双酯型生物碱向单酯型转化的一级水解过程在浸泡加热中已完成，在砂烫时，可能促使其水解或分解，导致含有量进一步下降。在样本回收率和液相色谱分析样本含量中，我们发现双酯型中乌头碱和次乌头碱的含量下降至几乎为零（P値<0.05）,有统计学意义。
综上所述，砂烫生附片不具备明显毒性，其具有很好的抗炎镇痛、抗心衰的作用，在制备前后，其内部的生物碱变化中双酯型的减少较为明显，从有毒型到无毒型的转化使其具有更加安全的效果。
【参考文献】
[1]杨振翔,张振凌.禹白附炮制及临床应用研究进展[J].医药世界.2006(S2).
[2]黄勤挽附子炮制历史沿革研究[J]中国实验方剂学杂志2011.
[3]郭成圩.杨天惠与《附子记》[J].卫生专业参考资料.1980(01).
[4]朱日然，李启艳，朱宗敏，等.HPLC法测定附子与其炮制品中双酯型生物碱[J].中成药，2011，33(8)：1375.1378.
[5]杨栋,孙庆.浅谈伤寒论中附子的生用与熟用[J].中成药，2000(08).
[6]杨振东.中药炮制对药效和临床疗效的影响[J].中国现代药物应用，2009(03).
论文作者:任学明
论文发表刊物:《医药前沿》2017年12月第35期
论文发表时间:2018/1/11
标签：乌头论文; 生物碱论文; 附子论文; 溶液论文; 含量论文; 精密论文; 异丙醇论文; 《医药前沿》2017年12月第35期论文;