老年浸润性乳腺癌患者的临床病理特点、治疗现状及预后分析
马永强
（山西省肿瘤医院 乳腺放疗科，山西 太原 030013）
摘 要： 目的 研究老年浸润乳腺癌组织中IL-15 与IL-5Ra 的临床病理特点及CD8+、NK 细胞浸润和治疗现状及预后分析。方法 采用免疫组化检测51 例老年乳腺癌肿瘤组织标本中IL-15Ra 与IL-15 的表达关系及CD8+、NK细胞的浸润，研究IL-15Ra、IL-15、CD8+细胞、NK 细胞之间存在的临床病理因素关系、治疗现状及预后进行分析。结果 乳腺癌组织中IL-15 阳性染色密度表达值（PSD）根据临床分期增加而逐渐减少，研究显示，肿瘤直径≥3 cm 组显著小于肿瘤直径＜3 cm 组，无淋巴结转移组显著大于有淋巴结转移组。老年浸润乳腺癌肿瘤组织中IL-15Ra 的表达与IL-15 表达无相关性，与CD8+细胞及NK 细胞浸润呈正相关性。IL-15Ra 表达与老年浸润乳腺癌患者的临床分期、淋巴转移、肿瘤大小、临床预后及临床治疗无相关性。结论 老年浸润乳腺癌患者早期临床预后较好，根据不同指标进行评价治疗效果及病理特点是目前临床常采用的方法。
关键词： 老年乳腺癌；人肿瘤；细胞浸润
0 引言
白细胞介素-15（interleukin-15，IL-15）是1994 年被发现的一种细胞因子，是由多种细胞产生，研究显示，IL-15与IL-2 生物学作用极为相似。IL-15 靶细胞分布和细胞来源分布较IL-2 广，但IL-2 已被证实在临床肿瘤免疫上具有良好的治疗效果。据推测，白细胞介素-15 也应在免疫肿瘤中具有良好的治疗效果[1-2]。目前关于IL-15 与乳腺癌、肺癌的研究，多数学者选用体外及裸鼠试验，试验结果能否表达IL-15在人体乳腺癌和肺癌中的治疗作用，结果尚不得知[3]。本次全文研究老年乳腺癌与肺癌组织中IL-15 的表达及临床病理因素、临床预后的相关因素进行分析，明确IL-15 在人体浸润乳腺癌中的发展作用。
1 材料与方法
1.1 临床资料。选取2018 年10 月至2019 年3 月经我院病理科确诊为乳腺癌的患者纳入51 例，为本全文研究对象，其中男28 例、女23 例，年龄61-87 岁，平均（64.8±5.6）岁；临床分期：Ⅰ期7 例、Ⅱ期22 例、Ⅲ15 例、Ⅳ7 例；患者病理类型：腺癌6 例、浸润性导管癌23 例、浸润性小叶癌18 例、髓样癌4 例。
1.2 研究试剂与切片制作。兔抗人白介素-15Ra 多克隆抗体（Rabbit anti-human Interleukin-15Ra beta polyclonal Antibody）与小鼠抗人白介素-15（Mouse Anti Human Interleukin-15） 单克隆抗体均购自美国Molecular Innovations 公司。小鼠抗人单抗克隆体CD8、小鼠抗人（NK细胞表面标志）CD57 及DAB 与SP 试剂盒均购自上海佑隆生物科技有限公司。肿瘤组织标本采用40g/L 多聚甲醛进行固定，然后进行梯度酒精兑水、浸蜡、透明、包埋制成蜡块4Lm，连续切片。
为配合标准教材的使用，韩国还开发了学术道德事例介绍与问答集等辅导性教材。如，2013年由经济人文社会研究会出版的《学术道德评价标准及事例》，2016年韩国研究财团编撰的《学术道德问答集最终本》，2016年韩东大学编撰的《韩东大学教师学术伦理指南》等。这些辅导性学习材料主要内容包括：学术道德的定义、学术不端行为的界定、调查与处理、学术道德真实委员会的作用，研究者的责任，利益冲突解决，研究数据管理，合作研究合同的签订，生命科学研究伦理的定义与类型等。为掌握国外学术道德研究最新发展动态，韩国教育部还出版了《外国高等院校建立学术道德的研究》，主要介绍外国高校如何建立学术道德以及具体举措等。
1.3 观察结果。阳性着色显示棕黄色，IL-15、IL-15Ra 阳性着色采用NikunE800 光学显微镜图像分析系统测定阳性染色密度（positive staining density，PSD）；CD8 与CD57 通过计满每张切片7 mm×7 mm 面积内所有阳性细胞个数，并同时计算出每平方毫米阳性细胞的个数，并作为阳性细胞密度（PCD）。
2.2 浸润乳腺癌肿瘤组织中CD8 与CD57 的染色。研究显示，胞膜着色阳性着色细胞仅在浸润淋巴细胞中显示，呈片状聚集分布。乳腺癌在临床分期早期中，无患者淋巴结转移病例显示，CD8+与NK 细胞浸润较多；临床分期晚期显示，或有患者发生淋巴结转移，CD8+与NK 细胞浸润较少。浸润乳腺癌肿瘤组织中的NK 细胞及CD8+阳性细胞密度分别为：（12.3±3.8）和（13.7±3.5）。
(4) 临床诊断为冠心病，动态心电图出现上述改变但是没有临床症状，按照“无痛性心肌缺血”出具诊断报告。
2 结果
2.1 浸润乳腺癌肿瘤组织中IL-15 及IL-15Ra 免疫组化染色。实验显示，少量浸润淋巴细胞与肿瘤细胞的胞浆、胞膜有着色，余下无显示着色。乳腺癌肿瘤组织中显示IL-15 及IL-15Ra阳性染色密度值分别为：（779.1±305.1）和（982.8±375.9）；29 例肺癌组织中IL-15 及IL-15Ra 阳性染色密度值分别显示为：（1179.9±658.8）和（1248.7±603.1）。
2.3 IL-15 与肿瘤临床病理临床特点、临床分期的关系。IL-15 在不同病理临床特点浸润乳腺癌组织中表达无显著差异（P＞0.05）。研究显示，乳腺癌伴随着临床分期的增加，肿瘤组织中IL-15 表达显著降低，详见表1。
在广大农村地区，由于农产品种植规模小、种植分散、品种较多，使得各个农产品标准化生产难度较大，即使某些农产品能够实现标准化生产，构建了完善的标准化体系，在具体生产经营过程中，也需要面临大量小规模经营主体，相应的标准化体系在具体执行过程中存在一定差异性，导致农产品品质不统一。
1.4 统计学分析。全文采用SPSS 11.0 统计学软件进行数据分析，结果以
s）表示，采用t 检验及单因素方差分析和Pearson 相关因素分析。
如图1所示，为了尽可能提高M2e的蛋白量，采用3个M2e序列串联形成3M2e；同时为了提高小多肽段（M2e）的抗原性，在3M2e前加接一个鞭毛蛋白基因（FljB基因），合成出Flagellin-3M2e的DNA片段。 目的基因Flagellin-3M2e被构建于表达载体pET28a相应位置（EcoRⅠ-XhoⅠ），经内切酶鉴定（图1）和基因测序确定序列正确。
表1 乳腺癌肿瘤组织中IL-15 的表达与临床分期的关系
2.4 IL-15 与浸润乳腺癌肿瘤组织中CD8+、NK 细胞的关系。浸润乳腺癌组织中IL-15 的表达与CD8+、NK 细胞的Pearson 相关系数分别为：0.61、0.39、0.59、0.76，差异显著（P＜0.05）。研究显示，IL-15 在肿瘤组织表达中，CD8+、NK 细胞浸润较多显著高于IL-15 表达低，浸润较少。
2.5 浸润乳腺癌中IL-15Ra 的表达分析。实验显示，IL-15Ra 的表达与肿瘤直径大小、临床分期及治疗预后等因素无相关性。
3 讨论
实验结果显示，乳腺癌组织中IL-5 表达高的患者均处于肿瘤分期早期，肿瘤体积较小，伴有少量的淋巴结转移；IL-15 表达较低的患者均处于肿瘤分期晚期，肿瘤体积明显较大，伴有淋巴结转移。研究表明，IL-15 的表达显示有某种抑制乳腺癌与肺癌的作用。本试验纳入的老年浸润乳腺癌显示IL-15 表达肿瘤组织中，NK、CD8+细胞浸润较多，此数据与免疫组化检测的结果数据相同[4]。国内相关学者指出，在表皮T 淋巴细胞瘤与急性T 淋巴细胞白血病中，IL-15 的表达与肿瘤细胞中的IL-Ra 有效结合，从而促进肿瘤细胞的繁殖。
试验显示，乳腺癌切片中，肿瘤细胞组织中IL-15 存在受体表达，但综合表现显示，IL-15 对乳腺癌具有遏制的作用，据分析发生遏制作用可能是在IL-15 的作用导致下，造成NK、CD8+细胞繁殖影响肿瘤组织，从而造成多量浸润和激活，并起到了杀伤肿瘤细胞的作用，超过了IL-15 抗肿瘤抗体的繁殖，从而造成肿瘤细胞分裂。研究结果显示，对没有IL-15 受体的表达不分泌IL-15 的肿瘤组织来说，如给予IL-15 会促进NK、CD8+细胞繁殖分裂的作用，增加IL-15在肿瘤组织中浸润的数量和激活，并有效促进NK、CD8+细胞对肿瘤细胞的杀伤。对无受体表达的IL-15 肿瘤组织通过外界因素给予IL-15，也可达到抗肿瘤的效果，通过外部因素给予IL-15，可与肿瘤组织中IL-15 受体表达相结合，从而促进肿瘤生长，也可有效激活NK、CD8+细胞的繁殖对肿瘤细胞起到杀伤作用[5]。研究显示，针对肿瘤组织的研究，应扩大样本量，分析IL-15 在临床中针对不同肿瘤作用的效果做出指导，合理应用IL-15 对抗肿瘤治疗具有重要研究意义。
参考文献
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Clinicopathological Characteristics, Treatment Status and Prognosis Analysis of Elderly Infiltrating Breast Cancer Patients
MA Yong-qiang
(Mammary Radiotherapy Department, Shanxi Cancer Hospital, Taiyuan Shanxi 030013)
ABSTRACT： Objective to study clinicopathological characteristics of IL-15 and IL-5Ra in elderly infiltrating breast cancer patients, analyze status and prognosis of CD8+, NK cell infiltration and treatment. Methods detect expression relations of IL-15Ra and IL-15 and infiltration of CD8+, NK cells of 51 cases elderly breast cancer patients with immunohistochemistry, and study clinicopathological relationship between IL-15Ra, IL-15, CD8+ cells and NK cells,treatment status and prognosis. Results positive staining density (PSD) expression of IL-15 in breast cancer tissues decreased with clinical stages increase gradually. Study showed tumors diameter (≥3 cm) group was significantly smaller than (＜ 3 cm) group, and non-lymph node metastasis group was significantly larger than lymph node metastasis group. IL-15Ra expression and IL-15 expression in invasive breast cancer tissues of elderly showed no correlation,but IL-15Ra expression and CD8±cell and NK cell infiltration showed positive correlation. IL-15Ra expression was not correlated with clinical stage, lymphatic metastasis, tumor size, clinical prognosis and clinical treatment of elderly infiltrating breast cancer. Conclusion elderly infiltrating breast cancer patients has good early clinical prognosis. It is common method to evaluate curative effect and pathological characteristics according to different indicators.
KEY WORDS： Elderly breast cancer; Human tumors; Cell infiltration
中图分类号： R737.9
文献标识码： A
DOI： 10.19613/j.cnki.1671-3141.2019.90.001
本文引用格式： 马永强.老年浸润性乳腺癌患者的临床病理特点、治疗现状及预后分析[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(90)：1-2.
标签：老年乳腺癌论文; 人肿瘤论文; 细胞浸润论文; 山西省肿瘤医院乳腺放疗科论文;