【摘 要】目的：评价血清学抗体，肛拭子pcr及咽拭子PCR三种方法对于手足口病肠道病毒的检出率。方法：采用ELASA方法检测血清抗体，采用RT—PCR实时荧光定量PCR分别检测肛拭子及咽拭子并对结果进行分析。结果：疾病早期肛拭子阳性率最高，抗体最低。发病3—7日咽拭子和肛拭子无差别。7日后抗体阳性率最高。结论：手足口病在发病早期或潜伏期易采用RT—PCR荧光定量PCR方法检测肛拭子，能够提高检出率。预警重症患者。降低实验前误差。
手足口病是由肠道病毒以柯萨奇A组16型，肠道病毒71型多见引起的急性传染病。多发于学龄前儿童，重症病例可出现脑膜炎，脑炎，脑脊髓炎，肺水肿，循环障碍等。多由EV-71感染引起，致死原因主要为重症脑干脑炎及神经源性肺水肿。
手足口病的实验室检测主要是病原学检测和血清学检测，病原学检测常规使用实时荧光定量PCR检测粪便或气道分泌物中的肠道病毒特异性核酸（CA—16，EV—71）血清学检测血液中肠道病毒特异性抗体。三种方法在不同病程的检出率不同。相应的临床意义也有差异。我们在对2016年在我院住院的150例患儿，同时使用三种方法进行检测，对结果进行分析。
1.对象与方法
1.1研究对象：2016年4月——2016年10月在我院三病区住院的手足口患儿。116例，年龄8-10岁，诊断符合卫生部发布的《手足口病诊疗指南》2010年版。
1.2方法
1.2.1标本的采集 肛拭子采集方法：用常用的病毒采样管棉签，从患儿肛门轻轻插入3—5厘米，适度用力擦拭数次拔出后，确认有粪便后迅速将棉签放入病毒采样管。{友康恒业生物科技北京有限公司，密封送检。咽拭子采集方法：用咽拭子迅速擦拭患儿口腔黏膜溃疡处，取出时不得沾有唾液，放入含有病毒保存液的采样管中，密封送检。血清抗体检测法：用真空采血管采空腹静脉血2ML送检。
1.2.2标本检测
1.2.2.1肠道病毒核酸检测：采用中山大学达安基因股份有限公司生产的肠道病毒核酸检测试剂盒{PCR—荧光探针发}及配套的RNA提取试剂盒。可同时检测通用型，CA-16及EV-71型。按照说明书进行结果判定。
1.2.2.2血清学检测：采用万泰生物科技公司生产的肠道病毒CA-16及EV-71型IgM检测试剂盒。按照说明书进行结果判定。
1.2.2.3结果：在病程的第3日、第7日、和第10-14日（出院前）分别检测咽拭和肛拭的肠道病毒核酸检测及血清学CA—16和EV—71抗体IgM，结果显示在疾病的早期一，以肛拭核酸检测阳性率最高。血清学阳性率最低。（有统计学意义）第7日后，肛拭阳性率开始下降。10病日后低于咽拭及血清学。
1.2.2.4表一如下：
116例肠道病毒检测结果
2.讨论：
手足口病是由多种肠道病毒引起的传染病，确定诊断主要依靠实验室结果的支持，核酸检测能诊断出早期病毒甚至潜伏期患者。核酸检测的标本可以是疱疹液、分泌物及粪便等。同一患者同时检测可得到不同的结果，使用不同的检测方法其结果也不尽相同。早期以粪便的检出率最高，原因除了肠道是病毒的第一复制环境外，粪便标本采集易于标准化，受干扰因素少也是很重要的因素，尤其是对于婴幼儿采集肛拭远远比咽拭容易得多。因此肛拭肠道病毒核酸检测可应用于早期诊断，且可早期预警EV—71型肠道病毒感染的重要病历。
论文作者:林红,王卫东,李璐,郑明明
论文发表刊物:《航空军医》2017年第5期
论文发表时间:2017/5/8
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