肖志坚[1]1995年在《急性髓细胞白血病M2b型分子生物学特征的研究》文中研究说明急性髓细胞白血病(AML)M2b是我所在50年代根据形态学和临床特点提出的一个AML特殊亚型。染色体核型分析表明AML—M2b患者常有t(8；21)(q22；q22)易位．近几年来相继在21q22、8q22断裂区克隆出了AML1基因、MTG8基因．并已证明，t(8；21)导致形成了AML1—MTG8融合基因。为了研究AML—M2b的分子生物学特征，我们检测了43例AML—M2b和33例其它AML亚型患者AML1基因重排和MTG8基因重排以及AML1—MTG8融合基因的表达，并用AML1—MTG8融合基因作为标志对13例完全缓解期AML—M2b患者进行了微量残留病检测。主要结果如下： 1．35例做了核型分析的AML—M2b患者中31例(88.6％)有t(8；21)易位，另4例(11.4％)为正常核型。33例其它类型AML患者均无累及8q22、21q22的染色体异常。 2．应用Southern杂交法对32例AML—M2b进行了AML1基因重排检测，重排检出率为81.3％(26／32例)。4例核型正常的AML—M2b中有3例出现了AML1重排带。 3．应用Southern杂交法检测30例AML—M2b MTG8基因重排，阳性检出率为70.0％(21／30例)。4例核型正常的AML—M2b患者中有3例检出了MTG8重排。 4．应用逆转录—多聚酶链式反应(RT—PCR)检测40例AML—M2b AML1—MTG8融合基因表达，阳性率为100％，其中包括4例染色体核型正常和2例有t(8；21)而AML1基因重排及MTG8基因重排均为阴性的患者。 5．联合AML1基因重排、MTG8基因重排检测和AML1—MTG8融合基因检罚三者，43例M2b均有分子水平的异常。33例其它AML患者中有27例进行了AML1基因重排、MTG8基因重排检测，21例检测了AML1—MTG8融合基因表达，仅只有一例M6患者均为阳性，余均未见异常。 6．用RT—PCR扩增AML1—MTG8融合基因转录本，进行AML—M2b微量残留白血病的检测，13例完全缓解的AML—M2b中12例阳性。这12例中，3例已复发，1例死于强化治疗骨髓抑制期，8例仍持续完全缓解。阴性的1例也仍完全持续缓解。 结论： 1．约有10％的AML—M2b患者可表现为“正常”核型，但这些患者存在着与有t(8；21)AML—M2b患者相同的分子水平异常。 2．AML1基因重排、MTG8基因重排和AML1—MTG8融合基因转录本表达可以作为AML—M2b的基因诊断标志。 3．使用RT—PCR方法可以在绝大多数完全缓解的AML—M2b患者中检出携带AML1—MTG8融合基因的残留白血病细胞，其临床意义尚待进一步验证和评价。
孟庆祥, 王建祥, 肖志坚, 郝玉书, 李建波[2]2000年在《急性髓系白血病M2b型分子生物学特征的鉴定》文中进行了进一步梳理目的 :研究急性髓系白血病 (AML) M2 b细胞遗传学和分子生物学特征 ,探讨 AML- M2 b与 t(8;2 1)白血病的关系。方法 :应用 G显带技术分析染色体核型 ,用 RT- PCR法检测 AML 1/ MTG8融合基因转录本并进行微量残留白血病检测 ,采用 Southern Blot技术检测 AML 1及 MTG8基因重排。结果 :86 .1% (31/ 36例 )的 AML -M2 b具有 t(8;2 1) ,13.9% (5 / 36例 )无 t(8;2 1)。在 AML- M2 b中 ,AML1/ MTG8融合基因转录本的检出率为10 0 % (44 / 44例 ) ,其中包括 5例无 t(8;2 1)的病例 ,AML1基因和 MTG8基因的重排检出率分别为 81.8%和71.0 %。 13例完全缓解 (CR)的 AML- M2 b中 12例可检出 AML1/ MTG8融合基因转录本。结论 :AML- M2 b与国际上的 t(8;2 1)白血病所指为同一疾病实体 ,AML 1/ ETO融合基因是这种疾病的基因标志 ,AML - M2 b可分为 t(8;2 1) (+) AML 1/ ETO(+) AML - M2 b和 t(8;2 1) (- ) AML 1/ ETO(+) AML - M2 b。经化疗获 CR的 AML - M2 b仍可检出微量残留白血病细胞。
郝长来[3]2003年在《急性髓系白血病M2b型诱导分化和凋亡的研究》文中指出目的：急性白血病M2b型(AML-M2b)由染色体易位产生的AML1-ETO融合蛋白异常募集组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)从而抑制AML1靶基因的转录是关键的致病机制，并且DNA甲基化和组蛋白脱乙酰化两个重要的转录抑制机制内部存在着十分密切的关联。探讨HDAC抑制剂苯丁酸钠(PB)联合DNA甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-Aza-CdR)阻断AML1-ETO的生物学功能，消除AML1-ETO的转录抑制，诱导AML-M2b白血病细胞分化和凋亡作用。 材料和方法：体外实验应用MTT比色法观察PB或与5-Aza-CdR联合对细胞的生长抑制作用，普通光学显微镜观察细胞形态改变，流式细胞术分析细胞周期和检测髓系分化抗原的表达，Annexin V标记、DNA凝胶电泳和流式细胞术分析细胞凋亡。建立Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤模型，研究PB对Kasumi-1细胞裸鼠体内致瘤性的影响；评价PB与5-Aza-CdR联合对裸鼠移植瘤的疗效，研究体内作用机制。 结果：①PB抑制AML-M2b白血病细胞系和原代细胞生长，降低细胞的自我更新能力，使细胞阻滞于G0／G1期，诱导髓系分化抗原CD11b、CD13的表达和细胞凋亡，并且上述作用呈剂量依赖性和时间依赖性。细胞凋亡经过激活Caspase-3途径。②低剂量5-Aza-CdR可以增强PB诱导细胞分化作用，使细胞阻滞于G2／M期；高剂量5-Aza-CdR增强PB对Kasumi-1细胞的生长抑制作用和诱导凋亡作用。③通过裸鼠移植瘤模型证实Kasumi-1经PB体外培养后其致瘤性降低。④PB体内用药可以抑制Kasumi-1细胞裸鼠移植瘤生长，抑制率达49.07％。诱导移植瘤细胞周期阻滞、分化和凋亡，并抑制肿瘤血管新生，肿瘤微血管密度减低。⑤5-Aza-CdR增强PB体内抗肿瘤活性，肿瘤生长抑制率达到87.46％，发生凋亡和抑制血管新生均明显增加。 结论：体外和体内实验均证明脱乙酰化酶抑制剂PB能够抑制AML-M2b白血病细胞生长和自我更新能力，使细胞阻滞于G0／G1期；诱导细胞部分分化和凋亡；DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR增强PB的抗
刘舒畅[4]2010年在《伊马替尼类似物及冬凌草甲素衍生物的合成与活性研究》文中提出第一部分:伊马替尼类似物的合成与活性研究甲磺酸伊马替尼作为第一个分子靶向治疗的抗肿瘤药物,在治疗慢性粒细胞性白血病上取得了巨大成功。但是随着临床应用范围的扩大和时间的推移,其治疗费用昂贵及耐药现象也逐渐显现。为了开发新型的BCR-ABL激酶抑制剂,本课题通过药物化学合理设计和Discovery Studio药物发现平台的辅助,我们设计了12种结构全新、未见报道的伊马替尼类似物。应用慢性粒细胞白血病细胞株K562,对类似物的活性做了检测,发现在12种类似物中,PAP5有相对较好的活性,其IC50在6μM左右。我们对伊马替尼类似物的构效关系进行了详细研究发现,抗肿瘤活性较好的伊马替尼类似物应有以下几点特征:整个分子结构要在同一个平面上;尾端的小分子胺需要有两个氢键受体;苯胺嘧啶和酰胺键需要保留。伊马替尼类似物的合成和活性研究,为新型BCR-ABL激酶抑制剂的开发提供了有益的借鉴。第二部分:7,14-丙缩酮冬凌草甲素衍生物的活性研究我们通过化学半合成的方法,对冬凌草甲素(Ori)进行了结构改造,得到了7,14-丙缩酮冬凌草甲素衍生物(Ori-01)。该方法合成的衍生物收率高,易于纯化。Ori-01较相同浓度的Ori对M2b型急性髓细胞白血病细胞株Kasumi-1细胞的增殖抑制更明显,该化合物低浓度下能诱导Kasumi-1细胞分化,高浓度诱导细胞凋亡并降解致病融合蛋白AML1-ETO。Ori-01的化学结构与活性,为冬凌草甲素的进一步改造指明了方向。
参考文献：
[1]. 急性髓细胞白血病M2b型分子生物学特征的研究[D]. 肖志坚. 中国协和医科大学. 1995
[2]. 急性髓系白血病M2b型分子生物学特征的鉴定[J]. 孟庆祥, 王建祥, 肖志坚, 郝玉书, 李建波. 中国肿瘤临床. 2000
[3]. 急性髓系白血病M2b型诱导分化和凋亡的研究[D]. 郝长来. 中国协和医科大学. 2003
[4]. 伊马替尼类似物及冬凌草甲素衍生物的合成与活性研究[D]. 刘舒畅. 上海交通大学. 2010