中性粒细胞内的颗粒主要包括嗜天青颗粒与特异性颗粒两类。嗜天青颗粒在细胞的早幼粒阶段形成，是一种含有过氧化物酶的球形或椭圆形颗粒；特异性颗粒在中幼阶段形成，不含过氧化物酶。嗜天青颗粒内含有髓过氧化物酶、溶菌酶等多种酶类和化学成分，可以催化NADH的活性形式或NADPH氧化酶产生氧化物和过氧化氢，使中性粒细胞具有杀死细菌、真菌、病毒及肿瘤细胞的能力。因此，观察中性粒细胞胞内颗粒的数量变化，对判断个体抵抗微生物侵袭、抗感染能力具有重要意义。近日，我们在对一例严重感染患者进行血细胞计数及分类时，发现其白细胞的散点图及对应的NEUT-X和NEUT-Y参数明显异常，提示中性粒细胞颗粒缺乏，该发现可能与患者病情恶化或治疗效果欠佳有关，遂将检测经过详述如下：
病例回顾：患者男，28岁，间断发热2月余，期间曾在多家医院多次就诊，胸部CT示大叶性肺炎并进行性加重，肺部出现大面积实变，给予多种抗生素及大剂量激素均无法控制病情，于2017年11月13日就诊我院。
本次检测使用的血球仪为Sysmex XE-5000，患者的白细胞散点图如图1所示，仪器报警提示Blasts?、Imm Gran？、Atypically?、WBC Abn Scg。对比健康成人DIFF散点图（图2），可见该患者DIFF散点图中性粒细胞群与单核细胞群分界不清，并向荧光强度较大的IG区域延伸，仪器未给出分类结果；此外，IMI散点图在X-轴左侧出现大量荧光信号，且RF信号相对较强。其中，NEUT-X和NEUT-Y数值分别为118.8ch和52.3ch，与NEUT-X和NEUT-Y正常参考范围143±3和43.5±3（Sysmex公司提供）[1]相比，发现NEUT-X值严重偏低，NEUT-Y值偏高。为排除仪器状态不稳定等因素的影响，我们查看了临近标本的检测结果，未发现NEUT-X值有显著偏低的情况，推测该患者外周血白细胞可能存在异常。进一步结合该患者DIFF散点图、IMI散点图、IP报警信息，考虑血标本中存在原始细胞及幼稚粒细胞增多的可能性较大，因缺乏中性粒细胞颗粒从而导致NEUT细胞群左移，该推测则需要接下来的镜检予以明确。
首先，我们将该患者标本用SysmexSP1000i血液学全自动推片染色机制片后，再用CellVisionDM96全自动血细胞形态分析仪扫描，发现中性粒细胞存在明显颗粒缺失和空泡变性（见图3），并可见原始细胞及幼稚粒细胞。随后，我们采用人工镜检进行复核，镜下所见与仪器扫描结果相符，提示该患者外周血中性粒细胞确实存在颗粒缺失的情况。为进一步佐证上述结论，我们采用POX染色处理血片，染色结果显示中性粒细胞阳性反应明显减弱、甚至消失（见图4），该结果也与胞内颗粒缺乏有关。综上，我们报告该患者的血常规结果如图5。
3.讨论
Sysmex XE-5000仪采用半导体激光流式S技术结合核酸荧光染色技术对白细胞进行计数及分类。在DIFF通道的散点图中，X轴表示侧向散射光信号（SSC）的强度，反映细胞的颗粒和细胞核等内容物的信息[1]，Y轴表示侧向荧光信号（SFC）的强度，反映细胞内DNA和RNA的含量。DIFF-X 和DIFF-Y、NEUT-X和NEUT-Y、WBC-D是DIFF通道的研究参数，其中，NEUT-X 指DIFF散点图NEUT区域X轴的平均强度，反映中性粒细胞的颗粒指数，NEUT-Y 指DIFF散点图NEUT区域Y轴方向的平均强度，反应中性粒细胞的成熟幼稚程度。研究表明，当细菌感染时NEUT-X和NEUT-Y的值有明显改变，与C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）具有良好的相关性[2]。细菌感染时，中性粒细胞被炎症因子所激活，胞浆出现中毒颗粒、空泡变性、杜勒小体等特异性改变，同时胞浆中的细胞器增大变粗，引起侧向散射光增强从而使NEUT-X数值升高。另外，在炎症因子的刺激下不成熟粒细胞释放增加，包括杆状、晚幼、中幼甚至早幼粒细胞，引起侧向荧光信号增强，NEUT-Y值升高。因此，NEUT-X和NEUT-Y参数能很好地反应中性粒细胞的形态结构的变化[3]。
本病例患者感染症状严重，中性粒细胞比值升高并伴重度核左移，说明机体对外感染反应尚好。但是NEUT-X数值严重偏低，说明中性粒细胞的颗粒指数下降，其依赖MPO介导杀伤细菌、真菌、病毒及肿瘤细胞的能力下降，机体抵抗微生物侵袭、抗感染能力减弱[4]，这可能是导致该患者重症、久治不愈的重要因素。因此，当发现中性粒细胞颗粒严重缺失时，我们应该及时提醒临床医生，以便在用药治疗上采取与普通感染患者不同的治疗方法，起到检验医师参与临床诊断与建议的作用。
总体来说，Sysmex XE-5000全自动血液分析仪的NEUT-X、NEUT-Y参数能反映实际细菌感染时激活的中性粒细胞内在结构或生物物理病理性质的变化。我们在做血细胞计数及分析时，可以根据异常的NEUT-X和NEUT-Y参数值，并结合报警提示信息，判断中性粒细胞是否有颗粒缺失、中毒颗粒等现象的存在、以及是否存在幼稚粒细胞，为镜检复核提供较为准确的思路及方向，也为临床医生诊治提供重要的线索和依据。
参考文献：
[1] Sysmex Journal vol.31.p45-51.2008
[2]张时民 五分类法血球分析仪测定原理和散点图特征 中国医疗器械信息 2008年第14卷第12期
[3]崔玲 刘云 金立钢 柏晓松 NEUT-X和NEUT-Y 参数在细菌感染诊断中的价值探讨 [J] 检验医学 2014年3月第29卷第3期
[4] 胡型忠 徐克 林晓 等 中性粒细胞新参数 NEUT-X和NEUT-Y 在在细菌感染中的应用价值研究 [J] 中华医院感染 学杂志，2012。22（5）：1０9５ 1098
[5]任继欣 吴连杰 冯燕 白细胞髓过氧化物酶缺失一例分析 临床误诊误治 2015年2月第28卷第2期
论文作者:唐露平,姜习新,许勇
论文发表刊物:《中国结合医学杂志》2019年2期
论文发表时间:2019/4/25
标签：粒细胞论文; 颗粒论文; 患者论文; 细胞论文; 细菌论文; 白细胞论文; 参数论文; 《中国结合医学杂志》2019年2期论文;