【摘要】 目的：采用顶空气相色谱法对曲匹布通原料药中有机溶剂残留量予以检测。方法：应用外标法、FID检测器、毛细管色谱柱开展实验，200℃为进样口温度，升温程度中50℃为初始温度，持续6min后升温至200℃并维持12min；顶空平衡时间为30min，温度为80℃。结果：正已烷、甲醇、二氯甲烷及乙醇等良好分离，有优良的线性关系，平均回收率分别为98.7%、100.4%、99.6%及100.6%。结论：顶空气相色谱法应用简便，有较高灵敏度，可靠性与准确度高，检测曲匹布通原料药中有机溶剂残留量适用性高。
【关键词】 顶空气相色谱法 曲匹布通原料药 有机溶剂残留量
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）26-0021-02
Study on determination of solvent residue in terpibutone API by headspace-gas chromatography
【Abstract】Objective Measure the determination of solvent residue in terpibutone API by headspace-gas chromatography. Methods Began the experiment with external standard method, FID detector, restek capillary column, set the temperature of the injection port to 200℃，and set 50℃ as internal temperature, after 6 minutes heat up to 200℃ and maintain 12 minutes, headspace balance time is 30 minutes, 80℃. Result N-hexane, methanol, dichloromethane and ethanol got good separation, and also got good linear relationship. The average recovery of them is 98.7%, 100.4%, 99.6% separately. Conclusion Headspace-gas chromatography with the advantages of easy to operate, high sensitivity, reliability and high accuracy can be used in measuring the determination of solvent residue in terpibutone widely.
【Key words】Headspace-gas chromatography;Terpibutone API;Determination of solvent residue
曲匹布通为临床常用药物，主要治疗慢性胰腺炎、胆石症、胆道运动障碍、胆囊炎及胆囊术后综合征等，2014年全国已有96个曲匹布通批准文号，国家药品监督管理局国家药品标准收录其质量标准。当前曲匹布通国家标准中残留溶剂检查项缺乏。药典委员会于2014年确定曲匹布通片为标准提高品种，亦为评价抽验品种。曲匹布通合成期间应用正已烷、甲醇、二氯甲烷及乙醇等，为对产品质量予以有效控制，现采用顶空气相色谱法检测曲匹布通原料药中有机溶剂残留量，详述如下。
1.仪器与设备
应用气相色谱仪与电子天平，其感量为0.01mg；甲醇为色谱纯，正已烷、二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）及乙醇为分析纯；准备好曲匹布通原料，共有3个批号，编号为批号1、批号2及批号3。
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2.方法与结果
2.1 确定色谱条件
应用FID检测器与毛细管色谱柱，参数为2.55μm与75m×0.450mm，初始温度为50℃，持续时间为6min后升温至200℃，速率为20℃?min-1，维持12min；氮气为载气，3.0ml?min-1为流速，200℃为进样口温度，250℃为检测器温度，80℃为顶空瓶平衡温度，30min为平衡时间，1ml为进样量。
2.2 制备溶液
2.2.1制备对照品储备溶液 在50ml量瓶中添加精密称取的0.1738g正已烷、1.574g甲醇、0.3142g二氯甲烷及2.6425g乙醇，再添加DMF至刻度，取5ml溶液添加至50ml量瓶中，添加DMF至刻度即得对照品储备液。
2.2.2混合对照品溶液 在50ml量瓶中添加5ml对照品储备液，添加DMF至刻度，取3ml在20ml顶空瓶中放置，密封后即得。
2.2.3制备供试品溶液 精密称取3.0g本品在20ml顶空瓶中放置，添加3mlDMF后密封，振摇促进溶解后即得。
2.2.4制备空白溶液 精密称取3mlDMF在20ml顶空瓶中放置，密封即得。
2.3 专属性
在色谱条件下分别进样分析供试品溶液、空白溶液及对照品溶液，结果空白溶剂不对残留溶剂检测产生干扰，4种残留溶剂均分离较好。
2.4 定量限与检测限
在50ml量瓶中添加精密称取的0.3024g正已烷、1.5402g甲醇、0.4325g二氯甲烷及2.5214g乙醇，再添加DMF至刻度，取5ml溶液添加至50ml量瓶中，再添加DMF至刻度。逐级稀释该溶液，进样，分别用3、10的信噪比将检测限、定量限计算出来。结果甲醇溶剂检测限为0.19，定量限为0.62，乙醇分别为0.30、1.01，二氯甲烷为0.17、0.68，正已烷为0.01、0.02。
2.5 回收率
精密称取9份批号1样品，0.30g/份，在10ml顶空瓶中放置，分别添加3ml 50%、100%及150%线性测试溶液，各3份，在20ml顶空瓶中放置，密封溶解后进样。结果甲醇回收率均值为100.4%，RSD为0.5；乙醇为100.6%、0.6，二氯甲烷为99.6%、0.8，正已烷为98.7%、0.7。
2.6 精密度
连续进样5次混合对照品溶液，将色谱图记录下来并将峰面积计算出来，结果甲醇均值为206.0，RSD为0.7%；乙醇为336.4、0.8%，二氯甲烷为39.3、0.7%，正已烷为753.5、0.7%。
2.7 重复性
精密称取6份曲匹布通供试品，编号为批号2，0.30g/份，依据拟定方法开展重复性实验，结果甲醇均值为0.00035，RSD为6.7，乙醇分别为0.00091、8.8，正已烷为0.00025、8.0%，二氯甲烷未检出。
2.8 稳定性
取按照2.2.2项方法中制备的对照品混合溶液，分别进样于0h、2h、4h、8h、12h及24h，将色谱图记录下来。结果正已烷、甲醇、二氯甲烷及乙醇溶剂峰面积RSD均在2%以下，说明24h内溶液处于基本稳定状态。
2.9 测定样品
应用拟定方法对批号1、批号2及批号3的曲匹布通原料分别测定，结果批号1中甲醇残留溶剂测定值为0.00068，批号2为0.00035，批号3为0.00065；乙醇残留测定值分别为0.00074、0.00084、0.00150；未检出二氯甲烷；正已烷分别为0.000012、0.000024及0.000016。
3.讨论
曲匹布通为弱酸性，5.45为其pKa值，脂溶性较高，在水中难以溶解，因此本实验主要对DMF中曲匹布通原料药残留溶剂检出情况予以考察，结果样品中残留溶剂在DMF中灵敏度较高，故而将DMF作为溶剂。由各项实验结果可知，曲匹布通原料药中残留溶剂均与其相应限度要求相符。正已烷沸点为68.7℃，甲醇为64.5℃，二氯甲烷为39.8℃，乙醇为78.4℃，用程序升温法将各类残留溶剂有效分离出来。实验发现顶空时间延长与温度上升后干扰峰会出现于甲醇峰附近，故明确顶空时间为0.5h，顶空温度为80℃，该条件下未出现干扰峰，且优良检出各类残留试剂。结果表明本实验3批曲匹布通原料药均与《中华人民共和国药典》2015年版二部规定相符。
【参考文献】
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论文作者:韩立春
论文发表刊物:《医药前沿》2017年9月第26期
论文发表时间:2017/9/11
标签：溶液论文; 甲烷论文; 甲醇论文; 批号论文; 乙醇论文; 溶剂论文; 色谱论文; 《医药前沿》2017年9月第26期论文;